樹錦雞兒（Caragana arborescens（Amm.）Lam.）枯枝病是在樹錦雞兒枝干上發(fā)現(xiàn)的一種新病害,需明確該病害的病原菌,了解其發(fā)生和侵染,并制定相應(yīng)的防治措施。本文依據(jù)柯赫氏法則,對(duì)該病害進(jìn)行了分離、純化、接種和再分離確定病原菌,并結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定出了該病害的病原菌;隨后對(duì)其進(jìn)行了培養(yǎng)特性研究,確定最適生長(zhǎng)條件;測(cè)定了該病原菌接種后引起的樹錦雞兒枝條皮層內(nèi)主要防御酶的變化;在對(duì)1～5年生的樹錦雞兒枝條內(nèi)生真菌群落分離鑒定基礎(chǔ)上,選取4株生防菌對(duì)病原菌進(jìn)行室內(nèi)對(duì)峙培養(yǎng),篩選出具有最優(yōu)生防潛力的菌株;采用8種常見低毒殺菌劑對(duì)該病原菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的抑制效果進(jìn)行測(cè)定,并選出最佳藥劑。這些研究為該病害的防控奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、樹錦雞兒枯枝病病原菌的確定:采用單孢分離和組織分離的方法分離得到疑似病原菌的菌株S1,用燒傷、劃傷、無傷三種方法接種健康3～5年生水培枝條,30d后僅燒傷接種表現(xiàn)出典型癥狀。選擇燒傷接種進(jìn)行野外接種試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)野外接種的發(fā)病時(shí)間較室內(nèi)接種的短,且發(fā)病率高達(dá)83.3%。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定和rDNA-ITS序列分析表明引起該病害的病原菌S1... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２樹錦雞兒枯枝病的癥狀??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｅ?ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?Ｃａｒａｇａｎａ?ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ?（Ａｍｍ．）?Ｌａｍ．?ｂｒａｎｃｈ?ｂｌｉｇｌｉｔ??

?毛樣菌絲，每個(gè)子座上產(chǎn)生１？３個(gè)半透明的孔口，隨著分生孢子器的成熟，顏色逐漸加??深，成熟后變?yōu)槌赛S色，直徑０．６０？１．６８?＿（ｎ＝３０），個(gè)別直徑達(dá)到３．５?ｍｍ（圖２－３：?ｉ）。??另外，從菌絲的分支上也可以產(chǎn)生分生孢子，產(chǎn)孢細(xì)胞瓶梗形，（６．２？１６．０）?ｐｍｘ（１．７￣３．０）??ｐｍ（ｎ＝３０）。分生孢子頂生或側(cè)生，單細(xì)胞，無色，與自然寄主上產(chǎn)生的分生孢子形狀相??同，（４．２？５＿５）ｐｍｘ（ｌ．ｌ？２．１）叫ｉ（ｎ＝５０）（圖２－３：ｆ）。分生孢子２４ｈ左右開始萌發(fā)，從兩頭分??別長(zhǎng)出芽管（圖２－３：?ｈ）。ＰＤ液體培養(yǎng)基２５°Ｃ搖培３？４?ｄ后搖培液變渾濁，鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲??上開始分枝并產(chǎn)生分生孢子，產(chǎn)孢細(xì)胞瓶梗樣，７?ｄ后鏡檢，４００倍鏡下一個(gè)視野中孢子??超過２００個(gè)，但菌絲量很少，整個(gè)視野中幾乎全是孢子。??根據(jù)病原菌的形態(tài)特征和培養(yǎng)特性初步鑒定該菌為樹錦雞子座叢赤殼菌??｛Ｓｔｒｏｍａｔｏｎｅｃｔｒｉａ?ｃａｒａｇａｎａｅ）?〇??＿１１八??－?ｖｙ??＿??圖２－３樹錦雞子座叢赤殼菌（＆??Ｆｉｇ．２－３?Ｓｔｒｏｍａｔｏｎｅｃｔｒｉａ?ｃａｒａｇａｎａｅ?（Ｈｏｈｎ．）?Ｊａｋｌｉｔｓｃｈ?＆?Ｖｏｇｌｍａｙｒ．??ａ、ｂ．分生孢子器；ｃ．分生孢子器切片；ｄ、ｅ．分生孢子器中產(chǎn)生的分生孢子梗（標(biāo)本Ｓｃ－１）；?ｆ．菌絲??上產(chǎn)生的分生孢子和分生孢子梗；ｇ．分生孢子；ｈ．萌發(fā)的孢子；ｉ．菌落形態(tài)特征（ＰＤＡ培養(yǎng)基）。??對(duì)比該菌原始資料［２８］，研究標(biāo)本的形態(tài)特征與原始描述基本相同。在原始描述中該??菌的無性型在自然寄主上產(chǎn)生的子座大小為０．３？０．９?ｍｍ

樹錦雞兒枯枝病病原菌Ｓ１的序列在ＧｅｎＢａｎｋ上進(jìn)行了注冊(cè)，菌株號(hào)為ＭＧ１９０３４５。并??用菌株Ｓ１與ＢＬＡＳＴ結(jié)果中的近緣菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果表明Ｓ１與菌株５：??在同一分支上，親緣關(guān)系最近，可信度為１００（圖２－３）。??８４??ＩｊｕｈｖａｃｏｎｒｎｏｓｐｏｎｉＫＹ６Ｑ７５３９．１）??９４１??????Ｉｊｕｈｙａ?／？？ｒ／／？（ＫＹ６０７５４３－１）???ｉｊｕｈｙａ?ｖｉｔｅｉｉｉｎａ｛?ＫＹ６０７５３１．５???ｐ?Ｓｌ（ＭＣｆ?１９０３４５）????＾?＾?Ｓｔｒｏｍａｔｏｍｃｉｒｋｉ?ｃａｒａｇａｎａ＾?ＩＱ?１?１２２?８８＊?ｌ｜????Ｎｅｃｔｒｉａｃｅｉｅ?ｓｐ＊?（ＫＲ５２７Ｉ４８．１）??７５??Ｎｅｃｔｒｉａ?／＞￡ｆ／￡ｒｍ￡？＾＜ＫＲ９０９２０７．１）??９３?Ｈ?ｖｐｏｃｒｅａｋｓｓｐ．?＜?ＨＱ３２８０２６．１）??Ｂｋｍｅｃｔｒｉａ?ｏｃｈｒｏｋｕｃａ（ＥＸＷ３５５Ｓ，?Ｉ）??＼?１??圖２－３?ＳＩ菌株與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中的近緣菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹??Ｆｉｇ．２－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?ＳＩ??２．４本章小結(jié)??本章試驗(yàn)通過對(duì)樹錦雞兒枯枝病野生標(biāo)本進(jìn)行切片觀察并分離得到活體菌株ｓｉ，??根據(jù)柯赫氏法則進(jìn)行接種和再分離確定了病原菌。結(jié)合對(duì)該菌株的培養(yǎng)特性、形態(tài)學(xué)鑒??定及ｒＤＮＡＩＴＳ序列分析鑒定此菌為樹錦雞子座叢赤殼菌（Ｓ．?ｃｆｌｒａｇｍｗ）。??致病性試驗(yàn)則表明該病在無傷接種和劃傷接種的枝條上未產(chǎn)生明顯發(fā)病癥狀，只有??燒傷接種可大量發(fā)病

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小葉錦雞兒化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 賀程,樸惠順.  延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào). 2015(02)
[2]沈陽地區(qū)油松枝枯病病原菌的鑒定[J]. 王月,高國(guó)平,張瑤琪,周陽,王允,祁金玉.  西北林學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(03)
[3]青藏高原20種灌木抗旱形態(tài)和生理特征[J]. 邱權(quán),潘昕,李吉躍,王軍輝,馬建偉,杜坤.  植物生態(tài)學(xué)報(bào). 2014(06)
[4]南方紅豆杉內(nèi)生真菌的分離鑒定及其細(xì)胞毒活性研究[J]. 張慶波,陳玉嬋,李浩華,潘清靈,王磊,李冬利,陶美華,章衛(wèi)民.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(01)
[5]錦雞兒屬植物化學(xué)成分及藥理活性研究新進(jìn)展[J]. 杜慶波,蔡紅.  宿州學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(11)
[6]植物病害生物防治概述[J]. 李凱,袁鶴.  山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(07)
[7]樹錦雞兒、檸條錦雞兒、小葉錦雞兒和鷹嘴豆干旱適應(yīng)能力比較[J]. 方向文,李鳳民,張海娜,蔣志榮.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2011(09)
[8]一種適用于多數(shù)植物病原真菌的單孢分離方法[J]. 邱小燕,湯智鵬,張敏,荊海瑜.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(09)
[9]我國(guó)植物病害生物防治的現(xiàn)狀及發(fā)展策略[J]. 邱德文.  植物保護(hù). 2010(04)
[10]我國(guó)害蟲化學(xué)防治現(xiàn)狀與發(fā)展策略[J]. 高希武.  植物保護(hù). 2010(04)

博士論文
[1]南方紅豆杉內(nèi)生真菌多樣性、次生代謝產(chǎn)物及其與宿主的相關(guān)性研究[D]. 吳令上.第二軍醫(yī)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]錦雞兒屬響應(yīng)干旱脅迫的形態(tài)適應(yīng)特征和生理機(jī)制的研究[D]. 周萌.蘭州大學(xué) 2016
[2]小葉錦雞兒化學(xué)成分及抗癌活性初步研究[D]. 賀程.延邊大學(xué) 2015
[3]水杉赤枯病發(fā)生規(guī)律及防治技術(shù)研究[D]. 匙明強(qiáng).南京林業(yè)大學(xué) 2012
[4]檸條籽化學(xué)成分及生物活性研究[D]. 金桂林.第二軍醫(yī)大學(xué) 2011



本文編號(hào)：3609873