黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因克隆與表達分析
發(fā)布時間:2022-01-09 02:49
黑尾葉蟬Nephotettix cincticeps(Uhler)是水稻矮縮病毒(RiceDrawf Dwarf Virus,RDV)的重要傳播媒介。在長期進化過程中,水稻、RDV和黑尾葉蟬之間形成了復雜的互作關系。前期研究表明,黑尾葉蟬攜帶RDV后出現(xiàn)若蟲發(fā)育歷期延長、雌成蟲壽命縮短、產(chǎn)卵量下降以及子代存活率降低等生物學變化。為探討其內(nèi)在機制,本論文以黑尾葉蟬類胰島素及其受體為研究對象,就相關基因及其在RDV與黑尾葉蟬互作中的功能作用開展了初步研究,獲得主要結果如下:1.黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因克隆與序列分析在黑尾葉蟬轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫中篩選獲得10條類胰島素基因(NcILP1-10)和2條胰島素受體基因(NcInR1-2)。這些基因均包含18~26個氨基酸殘基的信號肽序列,都屬分泌蛋白。采用RT-PCR技術克隆獲得這些基因的全長cDNA序列。黑尾葉蟬類胰島素及其受體蛋白在進化上存在多樣性特征。2.黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因表達分析采用實時熒光定量PCR對黑尾葉蟬類胰島素及其受體基因的時空轉(zhuǎn)錄特征作了分析。除NcILP5在卵、若蟲和成蟲的表達量均相對較高外,其他類胰島素及其受體主要在...
【文章來源】:浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1人胰島素和六種昆蟲胰島素氨基酸多重序列的比對(I)及類胰島素氨基??酸序列模體(n)??Fig.?1.1?Amino?acid?sequences?of?some?insulin?superfa?
生長、發(fā)育、代謝、生殖和免疫等生命活動(Wu和Brown,2006)。??目前,有關昆蟲類胰島素信號通路在黑腹果蠅中己有較多的研究積累,??主要涉及果蠅RTK受體傳導的信號通路(圖1.2)?(Garofalo,2002;??Goberdhan?和?Wilson,2003;?Wu?和?Brown,2006;?Teleman,2010;?Antonova??等,2012;?Nassel?等,2015)?〇??在果蠅中,與人胰島素信號通路基因同源的類胰島素、類胰島素生??長因子(DIR)、胰島素受體底物(IRS/chico)、PI3K、磷酸肌醇依賴的??蛋白激酶(Phosphoinositide-dependent?protein?kinase,PDK)、AKT/PKB??和FOXO等基因已相繼被發(fā)現(xiàn),表明其信號通路和哺乳動物類似(B6hni??等,1999;?Verdu?等,1999;?Weinkove?等,1999;?Jtlnger?等,2003)。類??胰島素受體在與類胰島素結合后即發(fā)生P亞基自磷酸化,激活的RTK將??IRS的酪氨酸殘基磷酸化
NcILP2-3、NcILP6和NcILP8,與岡比亞按蚊AgILP3和火紅蟻SiILP2歸為??一支;(3)?NcILPl、NcILP4-5和NcILP9-10,與果蠅DILP1-2、DILP5-6??以及褐飛虱N1ILP4聚類在一起(圖2.2)。這表明黑尾葉蟬類胰島素蛋白??的進化存在多樣性。??黑尾葉蟬胰島素受體蛋白NclnRl和NcInR2的結構域分布較為相似,??從N端均依次排列有:1個Furin-like結構域(Furin-like?cysteine?rich??region)位于2個Recep-L結構域之間、2個FN3結構域(Fibronectin?type??3?domain)和?1?個?PTKc?InsR-like?結構域(Catalytic?domain?of?Insulin??Receptor-like?Protein?Tyrosine?Kinases)(圖?2.3)。這與褐飛風?NcInR2?的??結構域組成與排列一致。褐飛虱NclnRl在相同區(qū)域則具有3個FN3結??構域,而果蠅則僅有1個FN3結構域。??*?20?*?40?*?60?*?80?*?100?*??KCILP2?:?JvS??jQlj?|^G';YQCMFSS?SPVSG?EQGKFSS?L?:?#常崳?NCILP3?:???x|AA^?SlA^Clr?aSFI?iTAAVSlKHH??'G?3?piGVYJJTVEUR?Vn??S\T?ZFVE?V?UlS?J?AITSFI?:?83??HCILP6?:???M?T?|rIiJsSIJJaisYEDDCIYNIDKKSGRFH
【參考文獻】:
期刊論文
[1]無脊椎動物胰島素樣蛋白(Insulin-like/related peptides)研究進展——以昆蟲為例[J]. 張龍輝,王國棟. 生物技術通報. 2014(10)
[2]植物病毒病媒介昆蟲的傳毒特性和機制研究進展[J]. 史曉斌,謝文,張友軍. 昆蟲學報. 2012(07)
[3]胰島素信號轉(zhuǎn)導、昆蟲發(fā)育與老化[J]. 顧世紅,陳建國. 昆蟲知識. 2009(04)
碩士論文
[1]水稻、黑尾葉蟬與水稻矮縮病毒三者間關系的初步研究[D]. 梁莉.浙江大學 2010
本文編號:3577796
【文章來源】:浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.1人胰島素和六種昆蟲胰島素氨基酸多重序列的比對(I)及類胰島素氨基??酸序列模體(n)??Fig.?1.1?Amino?acid?sequences?of?some?insulin?superfa?
生長、發(fā)育、代謝、生殖和免疫等生命活動(Wu和Brown,2006)。??目前,有關昆蟲類胰島素信號通路在黑腹果蠅中己有較多的研究積累,??主要涉及果蠅RTK受體傳導的信號通路(圖1.2)?(Garofalo,2002;??Goberdhan?和?Wilson,2003;?Wu?和?Brown,2006;?Teleman,2010;?Antonova??等,2012;?Nassel?等,2015)?〇??在果蠅中,與人胰島素信號通路基因同源的類胰島素、類胰島素生??長因子(DIR)、胰島素受體底物(IRS/chico)、PI3K、磷酸肌醇依賴的??蛋白激酶(Phosphoinositide-dependent?protein?kinase,PDK)、AKT/PKB??和FOXO等基因已相繼被發(fā)現(xiàn),表明其信號通路和哺乳動物類似(B6hni??等,1999;?Verdu?等,1999;?Weinkove?等,1999;?Jtlnger?等,2003)。類??胰島素受體在與類胰島素結合后即發(fā)生P亞基自磷酸化,激活的RTK將??IRS的酪氨酸殘基磷酸化
NcILP2-3、NcILP6和NcILP8,與岡比亞按蚊AgILP3和火紅蟻SiILP2歸為??一支;(3)?NcILPl、NcILP4-5和NcILP9-10,與果蠅DILP1-2、DILP5-6??以及褐飛虱N1ILP4聚類在一起(圖2.2)。這表明黑尾葉蟬類胰島素蛋白??的進化存在多樣性。??黑尾葉蟬胰島素受體蛋白NclnRl和NcInR2的結構域分布較為相似,??從N端均依次排列有:1個Furin-like結構域(Furin-like?cysteine?rich??region)位于2個Recep-L結構域之間、2個FN3結構域(Fibronectin?type??3?domain)和?1?個?PTKc?InsR-like?結構域(Catalytic?domain?of?Insulin??Receptor-like?Protein?Tyrosine?Kinases)(圖?2.3)。這與褐飛風?NcInR2?的??結構域組成與排列一致。褐飛虱NclnRl在相同區(qū)域則具有3個FN3結??構域,而果蠅則僅有1個FN3結構域。??*?20?*?40?*?60?*?80?*?100?*??KCILP2?:?JvS??jQlj?|^G';YQCMFSS?SPVSG?EQGKFSS?L?:?#常崳?NCILP3?:???x|AA^?SlA^Clr?aSFI?iTAAVSlKHH??'G?3?piGVYJJTVEUR?Vn??S\T?ZFVE?V?UlS?J?AITSFI?:?83??HCILP6?:???M?T?|rIiJsSIJJaisYEDDCIYNIDKKSGRFH
【參考文獻】:
期刊論文
[1]無脊椎動物胰島素樣蛋白(Insulin-like/related peptides)研究進展——以昆蟲為例[J]. 張龍輝,王國棟. 生物技術通報. 2014(10)
[2]植物病毒病媒介昆蟲的傳毒特性和機制研究進展[J]. 史曉斌,謝文,張友軍. 昆蟲學報. 2012(07)
[3]胰島素信號轉(zhuǎn)導、昆蟲發(fā)育與老化[J]. 顧世紅,陳建國. 昆蟲知識. 2009(04)
碩士論文
[1]水稻、黑尾葉蟬與水稻矮縮病毒三者間關系的初步研究[D]. 梁莉.浙江大學 2010
本文編號:3577796
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