昆蟲(chóng)病原真菌是自然界中調(diào)節(jié)害蟲(chóng)種群數(shù)量的一類重要生物防治資源,具有寄主范圍較廣、寄主不易產(chǎn)生抗性及容易人工培養(yǎng)等特點(diǎn),其研究開(kāi)發(fā)已得到越來(lái)越多的重視。但在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中,真菌生防制劑存在致死害蟲(chóng)速度慢、防治效果不穩(wěn)定等問(wèn)題。昆蟲(chóng)病原真菌感染宿主昆蟲(chóng)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,易受到環(huán)境因素如溫度、濕度、紫外照射等影響。因此,昆蟲(chóng)病原真菌在感染宿主過(guò)程中抵御外界環(huán)境脅迫的能力是影響殺蟲(chóng)效果的重要要素。研究發(fā)現(xiàn),鋅指蛋白在真菌生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程和抗逆性等方面發(fā)揮重要作用。全局調(diào)控因子LaeA調(diào)節(jié)了球孢白僵菌致死昆蟲(chóng)后菌絲生長(zhǎng)及孢子發(fā)育。轉(zhuǎn)錄組分析顯示,兩個(gè)Zn2Cys6轉(zhuǎn)錄因子（命名為Bbstr1與Bbstr2）在laeA敲除菌株中高水平表達(dá)。因此,為分析這兩個(gè)基因是否參與球孢白僵菌的生長(zhǎng)發(fā)育及抗逆性,構(gòu)建了兩個(gè)基因的敲除突變株、超量表達(dá)菌株及互補(bǔ)菌株,比較了不同菌株在生長(zhǎng)發(fā)育及逆境脅迫等方面的差異。得到的主要結(jié)果如下:1.球孢白僵菌Bbstr1、Bbstr2基因序列分析與表達(dá)特性分析Bbstr1開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng)2250 bp,編碼749個(gè)氨基酸。Bbstr2開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng)2013 bp,編碼670個(gè)氨基酸... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

昆蟲(chóng)病原真菌侵染過(guò)程示意圖（Wangetal,2017）

各種影響昆蟲(chóng)病原真菌致病性的非生物因素和生物因素，不論寄主本身的免疫防御體系，都將影響球孢白僵菌正常的生理活蛋白研究進(jìn)展蛋白蛋白最初是從非洲爪蟾卵母細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的（Miller et al, 1985）構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子。鋅指結(jié)構(gòu)域含有若干半胱氨酸（Cys）和組氨殘基與鋅離子形成的穩(wěn)定的手指狀結(jié)構(gòu)（圖 1.2），其穩(wěn)定性主維持（Frankel et al, 1988）。鋅指蛋白在真核生物中分布十分、大豆等植物及稻瘟病菌、釀酒酵母等真菌中都有發(fā)現(xiàn)（Mu; Kim et al, 2006; Yuan et al, 2018; Hirayama et al, 2003; Cao, H. e因子的鋅指蛋白，主要通過(guò)與 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)的結(jié)合在發(fā)揮不同的功能。據(jù)報(bào)道鋅指蛋白參與調(diào)控基因表達(dá)、細(xì)胞分脅迫等生命過(guò)程（Crook et al, 1993; Nakashima et al, 2002; Jangt al, 2017）。

第四章 結(jié)果與分析第四章 結(jié)果與分析4.1 Bbstr1 與 Bbstr2 基因序列分析全局調(diào)控因子 LaeA 調(diào)節(jié)了球孢白僵菌致死昆蟲(chóng)后菌絲生長(zhǎng)及孢子發(fā)育。轉(zhuǎn)錄組分析顯示，laeA 突變株中兩個(gè) Zn2Cys6 轉(zhuǎn)錄因子（命名為 Bbstr1 與 Bbstr2）高水平表達(dá)。Bbstr1 開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng) 2250 bp，編碼 749 個(gè)氨基酸。Bbstr2 的開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng) 2013 bp，編碼 670 個(gè)氨基酸。Bbstr1 與 Bbstr2 蛋白在 NCBI 中注釋為氮源吸收轉(zhuǎn)錄因子，N端都含有一個(gè)保守的Zn(2)-Cys(6) 結(jié)構(gòu)域（4.1.A）。用MEGA6.0軟件對(duì) Bbstr1 與 Bbstr2 蛋白與多種真菌的同源蛋白進(jìn)化樹(shù)分析，發(fā)現(xiàn) Bbstr1 和Bbstr2 蛋白均與冬蟲(chóng)夏草中同源蛋白的親緣關(guān)系較近，而與尖孢鐮刀菌親緣關(guān)系較遠(yuǎn)（4.1.B, 4.1.C）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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