油茶根腐病是普遍危害油茶樹的一種根部病害,已成為影響海南山茶油生產(chǎn)的主要病害之一。為弄清其病原種類及其多樣性關系,進而找到有效的防治策略,提高海南油茶成林率,本研究對海南油茶根腐病的病原菌進行了形態(tài)、分子鑒定和進化發(fā)育分析。從海口云龍、五指山、通什、紅山、瓊中、白沙、文昌等地采集腐根病樣,經(jīng)組織分離、形態(tài)特征觀察、ITS序列測定和分析,GenBank中BLAST同源性比對搜索,以及構(gòu)建系統(tǒng)進化樹,分析系統(tǒng)進化發(fā)育關系。明確了海南油茶根腐病的病原有兩種,一種為層生鐮刀菌（Fusarium proliferatum）,一種為尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）,以層生鐮刀菌為主。形態(tài)學上代表菌株可分為兩類,產(chǎn)生紫紅色色素和黃褐色色素。序列比對和系統(tǒng)進化分析發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生紫紅色色素的代表菌株與層生鐮刀菌的多條序列相似性為100%,并聚在同一分支上;產(chǎn)生黃褐色色素的代表菌株尖孢鐮刀菌多條序列相似性為100%,并聚在同一分支上。這是國內(nèi)首次報道油茶根腐病由兩種以上病原菌單獨或復合侵染引起。研究結(jié)果對油茶抗病育種和致病機理的研究具有重要的指導作用。 

【文章來源】：分子植物育種. 2020,18(19)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

病原菌菌落形態(tài)

病原菌分生孢子,厚垣孢子形態(tài)

將T2FS-29的ITS序列在Gen Bank數(shù)據(jù)庫中BLAST比對(圖5)，得到大量同源性較高的同屬不同種ITS序列。其中，與層生鐮刀菌Fusarium prolif-%eratum isolate RS＿79 (登錄號:MK332493)、Fusarium-%%proliferatum strain Can R-8 (登錄號:JF817300)、Fusar-%ium proliferatum isolate 165PG/F (登錄號:GU066714)、Fusarium proliferatum isolate CLFpr2 (登錄號:MN-481204)、Fusarium proliferatum strain D2 (登錄號:EU151485)、Fusarium proliferatum isolate ZXY5 (登錄號:MK158221)、Fusarium proliferatum isolate F039 (登錄號:KU891521)、Fusarium proliferatum strain E-2018(登錄號:MK372368)相似性最高，均超過99%，且僅在335、499和510號位點上堿基序列不同，在這幾個位點T2FS-29的堿基分別為C、C、C，而層生鐮刀菌Fusarium proliferatum isolate RS＿79的堿基分別為T、T、G。Landeweert等(2003)研究認為：真菌ITS區(qū)序列相似性達99%以上，則可歸屬于同一個種；而序列相似性在95%～99%之間時，則可認為是同一個屬；序列相似性小于95%，則結(jié)合形態(tài)學觀察結(jié)果可以認為是相同科。根據(jù)比對結(jié)果，可以初步確定菌株T2FS-29、HS-18、TS-01、TS-09、YL-11、QZ-1和WC-18為層生鐮刀菌。圖4 油茶根腐病菌ITS基因PCR擴增

【參考文獻】：
期刊論文
[1]辣椒枯萎病菌的分離鑒定與進化分析[J]. 趙志祥,凌斌,嚴婉榮,曾向萍,肖敏,陳圓.  分子植物育種. 2019(19)
[2]高粱鏈格孢葉斑病病原鑒定[J]. 趙艷琴,于華榮,石凱,張麗娟,張冬梅,朱鵬濤,柴暢,賈愛民.  植物病理學報. 2017(02)
[3]海南油茶資源調(diào)查與分析[J]. 鄭道君,潘孝忠,張冬明,謝良商,曾建華,張治禮,葉航.  西北林學院學報. 2016(01)
[4]海南薯蕷莖腐病病原菌的鑒定[J]. 趙志祥,陳圓,陳綿才,符美英,王三勇,肖彤斌.  基因組學與應用生物學. 2013(06)
[5]油茶根腐病拮抗內(nèi)生細菌的篩選及鑒定[J]. 宋光桃,周國英,劉君昂,李河,李琳.  植物保護學報. 2010(02)
[6]油茶根腐病病原菌分子鑒定及其生物學特性研究[J]. 李河,周國英,何末軍.  西南林學院學報. 2008(05)

碩士論文
[1]油茶根腐病病原學初步研究[D]. 劉三寶.華中農(nóng)業(yè)大學 2011
[2]油茶根腐病原菌及其PCR快速檢測技術研究[D]. 郝芳.中南林業(yè)科技大學 2009



本文編號：3526140