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甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用(英文)

發(fā)布時(shí)間:2021-11-03 21:15
  【目的】建立甘蔗線條花葉病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)的RT-LAMP檢測(cè)方法,為SCSMV的檢測(cè)提供技術(shù)支持!痉椒ā扛鶕(jù)甘蔗線條花葉病毒外殼蛋白基因的保守序列設(shè)計(jì)特異引物,優(yōu)化RT-LAMP的反應(yīng)條件,對(duì)比分析RT-LAMP的檢測(cè)靈敏度和特異性;并在RT-LAMP反應(yīng)產(chǎn)物中加入SYBR GREEN I進(jìn)行可視化檢測(cè),方便快速判定結(jié)果!窘Y(jié)果】成功建立了一種用于檢測(cè)SCSMV的RT-LAMP方法,可在60 ~ 63 ℃下60 min完成對(duì)SCSMV的檢測(cè),且具有較高的靈敏度,比傳統(tǒng)RT-PCR高100 倍,最低檢測(cè)RNA濃度為167.9×10-5 ng。此外,該方法具有較高的特異性,可特異檢測(cè)SCSMV。【結(jié)論】建立了一種靈敏、簡(jiǎn)便、快速的SCSMV RT-LAMP檢測(cè)方法并用于田間甘蔗樣品的檢測(cè)。 

【文章來(lái)源】:廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,47(04)

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
1 Materials and methods
    1.1 Source of viruses
    1.2 Total RNA extraction
    1.3 Primer designed for RT-LAMP
    1.4 Virus detection by RT-PCR
    1.5 RT-LAMP assay
    1.6 Specificity of RT-LAMP
    1.7 Sensitivity comparison between RT-LAMP and RT-PCR
    1.8 Detection of field samples by RT-LAMP
2 Results and analysis
    2.1 Reaction condition optimization for SCSMV detection by one-step RT-LAMP assay
    2.2 Specificity of RT-LAMP detection of SCSMV
    2.3 Sensitivity of RT-LAMP amplification
    2.4 Detection of SCSMV in field samples by RT-LAMP
3 Discussion
4 Conclusion


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]RT-LAMP技術(shù)檢測(cè)菜豆莢斑駁病毒的研究[J]. 聞偉剛,楊翠云,崔俊霞,張穎.  植物保護(hù). 2010(06)
[2]侵染甘蔗的高粱花葉病毒遺傳多樣性分析[J]. 許東林,周國(guó)輝,沈萬(wàn)寬.  作物學(xué)報(bào). 2008(11)
[3]侵染華南地區(qū)甘蔗的SCMV遺傳多樣性初探[J]. 許東林,周國(guó)輝.  植物病理學(xué)報(bào). 2005(S1)



本文編號(hào):3474361

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