馬鈴薯是世界上最重要的非谷類糧食作物,對(duì)國(guó)家的糧食安全起重要作用。病害是威脅馬鈴薯產(chǎn)量最主要的原因之一,馬鈴薯黃萎�。≒otato verticillium wilt）是一種真菌性病害,最高可造成每公頃馬鈴薯產(chǎn)量損失5 t-12 t。在生產(chǎn)上,應(yīng)用抗病品種是防控病害最經(jīng)濟(jì)有效的手段。挖掘抗病基因、開(kāi)發(fā)連鎖標(biāo)記可加速抗病品種的選育。但到目前為止,關(guān)于馬鈴薯黃萎病抗病基因定位和分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)的相關(guān)研究較少。本研究利用二倍體馬鈴薯種間雜種V67為母本,與C545雜交構(gòu)建了BC₁抗性分離群體,獲得的研究結(jié)果如下:1、BC₁群體表型鑒定:經(jīng)過(guò)多輪盆栽接種鑒定與莖段培養(yǎng)相結(jié)合,獲得175份表型準(zhǔn)確的單株,其中87個(gè)為抗病后代,88個(gè)為感病后代,抗感分離比符合1:1。2、Ve基因的定位:重新選擇了23個(gè)抗病單株組建抗病混合池,22個(gè)感病單株組建感病混合池,進(jìn)行DNA-Seq測(cè)序分析,繪制了Δ（SNP-index）分布圖,仍然將馬鈴薯黃萎病抗性基因定位于第五號(hào)染色體0 Mb-4.5 Mb的范圍,與本課題組前期的定位結(jié)果一致。在定位區(qū)段內(nèi)重新開(kāi)發(fā)多態(tài)性標(biāo)記,共篩... 

【文章來(lái)源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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接種黃萎病菌株Vd18后親本和后代表型CD

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文26以下的群體植株認(rèn)定為抗病植株，以上則為感病植株。共獲得175份表型確定的單株，抗病單株87個(gè)，感病單株88個(gè)（附錄1），后代中抗、感病單株分離比為1:1，卡方檢驗(yàn)值為0.005，小于3.84，符合一對(duì)基因控制下的孟德?tīng)柗蛛x規(guī)律（圖3）。表明BC1群體中存在控制表型分離的抗黃萎病基因。圖2莖段培養(yǎng)法鑒定表型培養(yǎng)皿中黑色菌落是通過(guò)莖段培養(yǎng)后長(zhǎng)出的菌斑；下方數(shù)字代表材料編號(hào)，“R”表示在該輪中表型鑒定為抗，“S”表示在該輪中表型鑒定為感。Fig2PhenotypicidentificationbystemsegmentcultureTheblackcolonyintheculturedishistheplaquethatgrowsafterthestemsegmentiscultured;thenumberbelowrepresentsthematerialnumber,“R”representsthephenotypicisresistanceand“S”representsthephenotypicissensitivityinthisround.

馬鈴薯抗黃萎病Ve基因的精細(xì)定位與連鎖標(biāo)記開(kāi)發(fā)273.2基因組DNA的提取與檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)中175份群體單株的葉片基因組DNA采用改良版快速小量提取法（CTAB）分離，隨機(jī)選擇10個(gè)單株材料的DNA用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其質(zhì)量，結(jié)果表明主條帶清晰無(wú)降解，繼續(xù)使用紫外分光光度計(jì)對(duì)DNA的OD值進(jìn)行檢測(cè)，樣品DNA的在OD260時(shí)有明顯吸收峰，OD260/OD280值在1.8左右，以上結(jié)果表明所提的DNA質(zhì)量較好，滿足本實(shí)驗(yàn)研究要求（圖4）。M12345678910圖4瓊脂糖凝膠檢測(cè)葉片基因組DNAM：Marker，1-10：隨機(jī)樣品。Fig.4DetectionofleafgenomicDNAbyagarosegelM:Marker,1-10:Randomsamples.M12345678910圖3表型統(tǒng)計(jì)結(jié)果A1-A5：多輪重復(fù)下各單株菌斑平均數(shù)，B：基于菌斑平均數(shù)統(tǒng)計(jì)抗并感病單株數(shù)量。Fig.3ResultsofphenotypicstatisticsA1-A5:Averagenumberofplaqueofeachindividualundermultipleroundsofrepetition,B:Statisticsofthenumberofdiseaseresistantandsusceptibleindividualsbasedontheaveragenumberofplaque。BA5A2A3A1A4

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3467720