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藥用植物內生細菌HDXY-02抗真菌物質毒黃素的分離鑒定和合成調控機制

發(fā)布時間:2021-09-04 08:54
  真菌病害是制約農業(yè)生產的重要因素之一,70%以上的植物病害是由真菌造成的。一方面,植物病原真菌感染植株后會導致作物減產,帶來經濟損失;另一方面,部分病原真菌還會分泌毒素,從而帶來食品安全問題,危及人類健康。真菌除了引起植物病害,有的還對人類有致病性。其中,由曲霉屬(Aspergillus)、念珠菌屬(Candida)和隱球菌屬(Cryptococcus)的條件致病菌引起的深部真菌感染對人類健康的危害極大。近年來,該類疾病發(fā)病率大幅上升且致死性極高,加上耐藥性菌株的不斷出現(xiàn),對目前臨床上有限的抗真菌藥物提出了挑戰(zhàn)。因此,尋找新型抗真菌藥物或先導化合物具有重要的現(xiàn)實意義。藥用植物內生菌可作為抗真菌物質的重要來源,本研究從石蒜屬藥用植物忽地笑、中國石蒜和紅花石蒜不同組織部位中分離篩選到30株具有拮抗病原真菌能力的內生細菌。其中分離自忽地笑的菌株HDXY-02具有較強的真菌抑制能力,且抑菌譜較廣。經16S r DNA和16-23S r DNA間隔區(qū)基因序列分析,結合伯克霍爾德氏菌的種特異性引物擴增和生理生化實驗結果,內生細菌HDXY-02被鑒定為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(Burkholderia ... 

【文章來源】:南京師范大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數】:133 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

藥用植物內生細菌HDXY-02抗真菌物質毒黃素的分離鑒定和合成調控機制


毒黃素化學式(SymyxDraw4.0軟件繪制)

核黃素,途徑,物質,文獻


第1章緒論9中物質2)合成物質3,RibD脫氨基還原物質3形成物質4,物質4脫磷酸合成物質5,再形成核黃素(圖1.2A中物質6)[111]。毒黃素合成由ToxB轉化物質2至物質3,ToxE脫氨基還原物質3形成物質4,物質4脫磷酸合成物質5,物質5經由一位置途徑由ToxC和/或ToxD轉化為物質10。最終由ToxA甲基化物質10合成毒黃素[112]。圖1.2核黃素和毒黃素生物合成途徑(引自文獻[112])(A)核黃素生物合成起始步驟。(B)推測的毒黃素合成途徑。(C)改進的毒黃素合成途徑。Figure1.2Biosyntheticpathwayfortheformationofriboflavinandtoxoflavin[112](A)Intialstepsinthebiosyntheticpathwayfortheformationofriboflavin.(B)Originalpathwayproposedfortheformationoftoxoflavin[110].(C)Revisedpathwayfortheformationoftoxoflavin.1.4.4.4毒黃素的合成受群體感應系統(tǒng)調控在B.glumae中,研究表明毒黃素的合成受群體感應(QuruomSensing,QS)調控[113](圖1.3)。QS通過LuxI家族蛋白TofI合成信號分子──辛;-L-高絲氨酸內酯(N-octanoyl-homoserinelactone,C8-HSL)并與它的同源受體──LuxR家族蛋白TofR

基因組,細菌,結構域,霉菌


第1章緒論13圖1.4五個主要細菌門代表種基因組中與c-di-GMP代謝相關的GGDEF、EAL和HD-GYP結構域的數量(引自文獻[159])Figure1.4Numberofthec-di-GMP-metabolizingGGDEF,EALandHD-GYPdomainsencodedbythegenomesofrepresentativespeciesfromfivemajorbacterialphyla[159]1.6.2c-di-GMP調控鏈霉菌抗生素的合成鏈霉菌(Streptomyces)中,c-di-GMP還參與了加納鏈霉菌(Streptomycesghanaensis)天然產物moenomycinA的合成調控[146]。轉錄因子BldD是天藍色鏈霉菌形態(tài)發(fā)育和抗生素合成所必需的[160,161]。BldD控制超過160個基因的轉錄,這些基因中有很多是與抗生素和纖維素合成相關的,其中3個基因(cdgA、cdgB和SCO5511)都編碼含有GGDEF或EAL結構域的蛋白。在天藍色鏈霉菌M600中過表達cdgA后,菌株會表現(xiàn)為無氣生菌絲表型,同時其藍色抗生素——放線菌紫素(actinorhodin)的合成量也有所下降[161]。cdgA基因編碼蛋白具有PAS-GGDEF-EAL結構域,PAS結構域是感知外界信號的結構域,可以調控C端GGDEF和EAL結構域的活性[162,163]。丟失DGC活力的突變可使無氣生菌絲表型消失和放線菌紫素合成的恢復,說明胞內c-di-GMP濃度可影響氣生菌絲構成和放線菌紫素合成。cdgB基因編碼蛋白具有PAS-GAF-GGDEF結構域,PAS結構域或和GAF結構域可感知外界信號,CdgB蛋白含有具有活力的GGDEF結構域并表現(xiàn)出DGC催化活性[160]。敲除或過表達cdgB抑制氣生菌絲形成,過表達cdgB抑制放線菌紫素合成。第3個基因SCO5511編碼一個膜定位蛋白且包含PAS、GGDEF和EAL結構域。SCO5511可能全局性或局部調控胞內c-di-GMP濃度,其是否參與次級代謝物合成調控并不清楚。委瑞內拉鏈霉菌(Streptomycesvenezuelae)的BldD的C端與c-di-GMP形成BldD-(c-di-GMP)-DNA復合物

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]忽地笑內生菌的分離及發(fā)酵產物抑菌活性研究[J]. 楊帥,南小航,魯耀邦,彭菲.  湖南中醫(yī)藥大學學報. 2010(09)
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博士論文
[1]變形三萜海蓬子皂苷甲抗乳腺癌作用及其機制研究[D]. 管福琴.南京農業(yè)大學 2016

碩士論文
[1]石蒜堿和小檗堿對植物病原真菌抑制作用及其抑菌生理指標分析[D]. 任偉.河南農業(yè)大學 2014
[2]番茄葉霉病菌拮抗細菌的篩選、鑒定及其發(fā)酵液活性的研究[D]. 孫楊.吉林農業(yè)大學 2012
[3]產加蘭他敏內生菌的選育及發(fā)酵條件的研究[D]. 楊帥.湖南中醫(yī)藥大學 2011
[4]忽地笑離體培養(yǎng)與內生菌分離產生加蘭他敏的研究[D]. 趙志敏.湖南中醫(yī)藥大學 2010



本文編號:3382963

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