Noduler基因最早在印度柞蠶（Antheraeamylitta）中被發(fā)現(xiàn)和命名。研究表明這一基因參與昆蟲(chóng)結(jié)節(jié)反應(yīng)的調(diào)控。后來(lái)在家蠶（Bombyx mori）中的研究還發(fā)現(xiàn)該基因參與昆蟲(chóng)酚氧化酶原激活反應(yīng)的調(diào)控。本研究中我們克隆了斜紋夜蛾Noduler基因,體外原核表達(dá)并純化出Noduler重組蛋白,制備了多克隆抗體,并進(jìn)行一系列的免疫相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。最后又利用RNA干擾的方法研究了No uler基因在斜紋夜蛾體內(nèi)的免疫功能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.Noduler基因的序列分析:Noduler基因具有一個(gè)501bp的開(kāi)放閱讀框,編碼一個(gè)具有166個(gè)氨基酸的Noduler蛋白。軟件預(yù)測(cè)表明該蛋白的等電點(diǎn)為9.33,分子量為17.35KDa。將斜紋夜蛾的Noduler基因的氨基酸序列與其他幾種鱗翅目昆蟲(chóng)Noduler基因的氨基酸序列進(jìn)行多重序列比對(duì),結(jié)果顯示該基因與鱗翅目美國(guó)白蛾Noduler的序列相似性最高,為83%。2.組織特異性分析:RT-PCR和熒光定量PCR分析表明Noduler基因在斜紋夜蛾的血細(xì)胞、脂肪體、中腸、表皮、馬氏管五個(gè)組織中都有表達(dá),在血細(xì)胞中的表達(dá)量最高。3.免疫刺激后N... 

【文章來(lái)源】：華中師范大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＰＣＲ擴(kuò)增斜紋夜蛾ＭＷｗ／ｅｒ基因電泳圖??Ｆｉｇ?１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｎｏｄｕｌｅｒ?ｉｎ?Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ?ｌｉｔｕｒａ??

圖２斜紋夜蛾基因的核酸序列和氨基酸序列??注釋：虛線顯示的是信號(hào)肽序列，下劃線顯示的是Ｒｅｅｌｅｒ結(jié)構(gòu)域??Ｆｉｇ?２?Ｔｈｅ?ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｎｄ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｏｆ?Ｎｏｄｕｌｅｒ??Ｔｈｅ?ｄａｓｈｅｄ?ｌｉｎｅ?ｓｈｏｗｓ?ｔｈｅ?ｓｉｇｎａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ，?Ｔｈｅ?ｕｎｄｅｒｌｉｎｅ?ｓｈｏｗｓ?ｔｈｅ?Ｒｅｅｌｅｒ?ｄｏｍａｉｎ??３．１．２．２多重序列比對(duì)??將斜紋夜蛾Ｎｏｄｕｌｅｒ的氨基酸序列與其他幾種鱗翅目昆蟲(chóng)Ｎｏｄｕｌｅｒ的氨基酸序??列進(jìn)行同源性分析（圖３）。結(jié)果顯示斜紋夜蛾Ｎｏｄｕｌｅｒ與鱗翅目其他幾種昆蟲(chóng)的??Ｎｏｄｕｌｅｒ序列相似性較高，其中與美國(guó)白蛾的Ｈｄｄｌｌ基因序列相似性最高，達(dá)８３％。??Ｓｌｉｔ－Ｎｏｄａｌｅｒ?邐，５９??ａｓｉ〇ｒ－ｉｉａｍｉｉｉｉｅ－ｒｅｌａｔｅｄ＿ｐｒａｔ：ｅｉＥ＿２＿ｐｒｅｃｕｒａＧｒ?５９??Ｏｆｕｒ－ｉｎｉｍｉｍｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ＿ｐｒａｔｅｉｎ?．ＨＫＭ＇Ｙ?５９??Ｈｃｕｎ－Ｂｄｄｌｌ?ＭＨ￡ｎ｜Ｖ＆Ｖ纖繼暑｛頓噸６０??Ｐｐｏｉ－Ｂｄｄｉｉｅｏ??Ａｔｒａ－Ｈｄｄｉｉ?．鯽?４?胡聊５９??Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ?ｂ?ｙｓ?ｇａｐ?ｃ?ｄｍ?ｐ?ｈｐｖ?ｑ?ｐｙ?ｉ＂ｔｔ?ｔ?ｇ??．Ｓｌｉｔ－Ｎｏｄｕｌｅｒ?賴偏ｆｉｎ畫(huà)匾．，愈－遽邏１１１９??Ｂｍａｒ－ｉｉａｎｒｕｒｉｅ－ｒｅｌａｗｅｃｉ＿ｐｒｏｃｅｉｉｉ＿２＿ｐｒｅｃｉｉｒｓＧｒ?Ｆ�。樱�，＾Ｂ｜ｊ／ｌＦＬ＞＇＇＇?ｊＰ＾ＳＢ１?丄９??Ｏｆｕｒ－ｉｎｎＥｉｎｅ－ｉｎｃｉｕｃｅｄ＿ｐｒａ

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]家蠶抗菌肽[J]. 林立鵬,藍(lán)希鉗.  蠶學(xué)通訊. 2007(03)



本文編號(hào)：3373366