結(jié)球甘藍(lán)（Brassica oleracea var.capitata L.）是世界范圍內(nèi)廣泛栽培的一種重要的十字花科蔬菜作物。甘藍(lán)枯萎病是一種典型的土傳病害,嚴(yán)重影響著甘藍(lán)的產(chǎn)量和品質(zhì),并難以通過(guò)藥劑等措施來(lái)防治,培育抗病品種是應(yīng)對(duì)甘藍(lán)枯萎病最為行之有效的方法。本研究采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的方法將甘藍(lán)抗枯萎病基因FOC1導(dǎo)入高感枯萎病的甘藍(lán)自交系材料,以期轉(zhuǎn)化后的感病材料獲得枯萎病抗性,驗(yàn)證FOC1基因的抗病功能;利用亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)明確FOC1編碼蛋白的性質(zhì),并利用生物信息學(xué)軟件對(duì)目的蛋白的組成、結(jié)構(gòu)及可能的生物學(xué)功能和參與的生物學(xué)途徑進(jìn)行預(yù)測(cè)分析,為探明抗病基因的抗病機(jī)理提供理論依據(jù);綜合運(yùn)用小孢子培養(yǎng)、全基因組背景選擇和抗性特異分子標(biāo)記輔助選擇對(duì)骨干親本01-20進(jìn)行枯萎病抗性轉(zhuǎn)育,以期快速獲得優(yōu)良抗病育種材料。主要研究結(jié)果如下:1、通過(guò)對(duì)本課題11份高感枯萎病甘藍(lán)自交系材料的篩選,其中由XW自交系獲得的外植體材料褐化程度最低,分化出芽率最高,是用于遺傳轉(zhuǎn)化的優(yōu)良受體材料。將抗枯萎病基因FOC1通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)入甘藍(lán)自交系材料XW,共獲得6株陽(yáng)性植株,對(duì)陽(yáng)性植株進(jìn)行PCR檢測(cè),有4... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證序列無(wú)誤后轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌菌株EHA105

2103962.5 50 203828225 30 254SiLiuSheng30 20 355Minicole82.5 82.5 06XiaJie97.5 60 107LvQiu92.5 37.5 258CB20137.5 75 5987-53465 25 32.5002-1295 87.5 01XW90 10 45綜合種子芽率、外植體褐化情況和外植體分化出芽情況我們發(fā)現(xiàn) 11 份材料中，XW 品種藍(lán)材料在播種后 5d 種子出芽整齊且芽率較高，達(dá)到 90%；外植體褐化程度低，只有 10%；成苗能力最強(qiáng)，達(dá)到 45%。因此，本研究選用 XW 品種的甘藍(lán)自交系材料作為抗枯萎病基C1 轉(zhuǎn)化的受體材料。3.2 轉(zhuǎn)抗枯萎病基因甘藍(lán)植株的獲得本研究以高感枯萎病的甘藍(lán)自交系材料 XW 為轉(zhuǎn)化受體通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的方法，共獲潮霉素抗性的轉(zhuǎn)基因植株，轉(zhuǎn)化各階段情況如圖 2-2 所示

圖 2-3 轉(zhuǎn)化植株的 PCR 檢測(cè)。左圖：引物 FOC1-P 擴(kuò)增結(jié)果；右圖：引物 HYG 擴(kuò)增結(jié)果；CK：載體對(duì)照；A：轉(zhuǎn)基因植株 A；B：轉(zhuǎn)基因植株 B；C：轉(zhuǎn)基因植株 C；D：轉(zhuǎn)基因植株 D；E：轉(zhuǎn)基因植株 E；F：轉(zhuǎn)基因植


本文編號(hào)：3361041