華北大黑鰓金龜（Holotrichia oblita Faldermann）是一種嚴(yán)重危害我國(guó)北方地區(qū)農(nóng)作物的地下害蟲(chóng)。該昆蟲(chóng)具有分布范圍廣、食性雜、為害嚴(yán)重等特點(diǎn),長(zhǎng)期以來(lái),使用農(nóng)藥等傳統(tǒng)方法對(duì)其進(jìn)行防控的效果不佳,同時(shí)造成了土壤環(huán)境破壞、天敵死亡等多種潛在威脅。因此,尋找一種對(duì)華北大黑鰓金龜?shù)木G色高效防控手段已經(jīng)迫在眉睫。近年來(lái),越來(lái)越多的研究者從逆向化學(xué)生態(tài)學(xué)入手,通過(guò)研究昆蟲(chóng)對(duì)寄主植物揮發(fā)物的外周嗅覺(jué)識(shí)別機(jī)制來(lái)開(kāi)發(fā)昆蟲(chóng)的行為調(diào)控劑。本文以華北大黑鰓金龜成蟲(chóng)為研究對(duì)象,首先確定其寄主植物揮發(fā)物的種類,并通過(guò)觸角電位和Y管行為學(xué)實(shí)驗(yàn)初步篩選對(duì)華北大黑鰓金龜行為有顯著吸引的化合物,為開(kāi)發(fā)有效的行為調(diào)控劑提供候選化合物;隨后探究氣味受體（OR）和感受神經(jīng)元膜蛋白（SNMP）在華北大黑鰓金龜識(shí)別功能性化合物過(guò)程中發(fā)揮的作用,從而明確華北大黑鰓金龜對(duì)功能性寄主植物揮發(fā)物的外周嗅覺(jué)感受機(jī)制,為華北大黑鰓金龜?shù)姆乐魏烷_(kāi)發(fā)有效的行為調(diào)控劑具有指導(dǎo)意義。主要結(jié)果如下:（1）對(duì)華北大黑鰓金龜25種寄主植物的150種揮發(fā)物進(jìn)行成蟲(chóng)觸角電位反應(yīng)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,華北大黑鰓金龜?shù)某上x(chóng)觸角在化合物濃度為1μg... 

【文章來(lái)源】：東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物-昆蟲(chóng)之間的信息交流[18]

東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文4圖1-2氣味的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程[67]Fig1-2Odortransportprocess1.3氣味受體(OR)昆蟲(chóng)是研究嗅覺(jué)系統(tǒng)的理想生物模型，因?yàn)槔ハx(chóng)在神經(jīng)系統(tǒng)的控制下顯示出的嗅覺(jué)驅(qū)動(dòng)行為要比哺乳動(dòng)物簡(jiǎn)單得多[34]。例如，在瘧疾蚊子——岡比亞按蚊（Anophelesgambiae）中，通過(guò)檢測(cè)人類皮膚中多種化學(xué)信號(hào)（包括乳酸、氨以及呼出氣體中的二氧化碳），從而進(jìn)行宿主定位。在煙草天蛾（Manducasexta）中，性信息素可以誘使幾英里以外的雄性個(gè)體開(kāi)始刻板的飛行，以追求其潛在的伴侶[30]。昆蟲(chóng)嗅覺(jué)系統(tǒng)的解剖學(xué)和生理學(xué)特性已在蝗蟲(chóng)[31]、蟑螂、飛蛾和蜜蜂[32]等多個(gè)物種中得到了深入的研究[33][35]。氣味受體（OR）是昆蟲(chóng)中重要的化學(xué)感覺(jué)受體家族成員之一，負(fù)責(zé)感受外界環(huán)境中的多種揮發(fā)性氣體分子[36]。1999年，昆蟲(chóng)的首個(gè)OR基因在果蠅中發(fā)現(xiàn)[37][39]。隨著學(xué)者對(duì)果蠅，岡比亞按蚊和家蠶（Bombyxmori）等昆蟲(chóng)嗅覺(jué)的研究，昆蟲(chóng)的ORs及其同源配體的蛋白質(zhì)序列的可用數(shù)據(jù)在不斷增長(zhǎng)，這為更好的解釋昆蟲(chóng)嗅覺(jué)得分子識(shí)別問(wèn)題提供了必要理論基礎(chǔ)[38][40]。從線蟲(chóng)到脊椎動(dòng)物，OR大多是有七個(gè)跨膜區(qū)的G蛋白偶聯(lián)受體（GProtein-CoupledReceptors，GPCR），能通過(guò)與特異性氣味分子的結(jié)合而被激活[41]。合適的配體與經(jīng)典GPCR的結(jié)合被認(rèn)為可誘導(dǎo)GPCR構(gòu)象變化，從而觸發(fā)G蛋白活化和第二信使的生成。有研究表明，在果蠅中，沒(méi)有遵循經(jīng)典的GPCR途徑，當(dāng)

東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文13合物刺激，每種化合物刺激三次，每次刺激之間間隔2min。按順序依次進(jìn)行化合物刺激，在進(jìn)行10種化合物刺激后，重復(fù)測(cè)試石蠟油對(duì)照，測(cè)試觸角的敏感度。（6）選取觸角電位反應(yīng)排名前六的化合物，進(jìn)行濃度梯度測(cè)試。圖2-1EAG各部件連接示意圖A.微動(dòng)操縱儀B.DC/AC放大器C.刺激氣體控制裝置D.顯示器及打印機(jī)E.雙目實(shí)體顯微鏡F.巴斯德管G.觸角H.腳踏板Fig2-1EAGcomponentsconnectiondiagramA.Micro-motionmanipulatorB.DC/ACPreamplifierC.StimulationgascontroldeviceD.MonitorsandprintersE.BinocularsolidmicroscopeF.PasteurtubeG.antennaH.Footpedal2.1.3.2Y管行為學(xué)實(shí)驗(yàn)操作選取EAG相對(duì)反應(yīng)值排名前三的化合物進(jìn)行嗅覺(jué)選擇行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。操作如下：取一個(gè)直徑為2cm主臂長(zhǎng)7cm雙臂長(zhǎng)6cm的Y型管，洗凈隨后放入烘箱內(nèi)60℃熱風(fēng)烘30min去除Y管內(nèi)殘留的其他化合物。將Y型管的兩臂與純凈空氣相通，在兩臂的端部分別放置一條濾紙條，一端的濾紙條加入20μL的石蠟油作為對(duì)照，另外一端的濾紙條加入20μL的待測(cè)化合物，將待測(cè)蟲(chóng)子放置在Y型管的中間通道，在紅光燈照射的條件下，待昆蟲(chóng)穩(wěn)定后，開(kāi)始計(jì)時(shí)，當(dāng)昆蟲(chóng)到達(dá)Y型管的任意一臂的中間位置，并停留時(shí)長(zhǎng)達(dá)到1min，記為有效選擇，若昆蟲(chóng)5min內(nèi)未進(jìn)行選擇，則記為未選擇。每種待測(cè)化合物需要用70頭華北大黑鰓金龜成蟲(chóng)（雌雄各半）進(jìn)行測(cè)試，為了避免誤差，每測(cè)試3-4頭成蟲(chóng)，需要變換對(duì)照和化合物的方向。實(shí)驗(yàn)完成后，需要用酒精將兩臂擦干凈，在自

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]華北大黑鰓金龜植物源引誘劑配方篩選及引誘效果[J]. 李曉峰,曹雅忠,尹姣,張帥,李金橋,李克斌.  植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2020(01)
[2]昆蟲(chóng)外周嗅覺(jué)系統(tǒng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 杜立嘯,劉楊,王桂榮.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2016(05)
[3]河南部分地區(qū)花生田地下害蟲(chóng)發(fā)生情況調(diào)查[J]. 羅宗秀,李克斌,曹雅忠,尹姣,張杰,張靜濤,尚光強(qiáng).  植物保護(hù). 2009(02)
[4]昆蟲(chóng)觸角感器的種類及其生理生態(tài)學(xué)意義[J]. 那杰,于維熙,李玉萍,董鑫,焦嬌.  沈陽(yáng)師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(02)
[5]京郊草坪蠐螬的種類和為害特點(diǎn)[J]. 羅晨,郭曉軍,張芝利.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2008(01)
[6]蓖麻葉對(duì)華北大黑鰓金龜引誘作用的研究[J]. 張艷玲,袁螢華,原國(guó)輝,郭線茹,羅梅浩.  河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(01)
[7]蔗扁蛾觸角掃描電鏡觀察[J]. 沈杰,樓兵干,沈幼蓮,高其康.  浙江林業(yè)科技. 2005(06)
[8]銅綠麗金龜成蟲(chóng)防治方法[J]. 蘭杰,秦河,康小龍,李華清,穆素華.  四川林業(yè)科技. 2001(03)
[9]花生田金龜防治技術(shù)研究[J]. 宋協(xié)松,宋文武,張吉民,劉元文,葛寶明.  華東昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 1996(01)



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