甘蔗黃葉病毒（Sugarcane yellow leaf virus,ScYLV）屬于黃癥病毒科（Luteoviridae）、馬鈴薯卷葉病毒屬（Polerovirus）,主要由蚜蟲(chóng)傳播,能夠侵染甘蔗、玉米等多種作物,引發(fā)嚴(yán)重的植物病害。本研究將編碼ScYLV運(yùn)動(dòng)蛋白（Movement protein,MP）的基因連接到pDB-His-MBP原核表達(dá)載體上,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌菌株Rosetta中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),表達(dá)分子量大小約為70 kDa的融合蛋白,將純化后的融合蛋白制備多克隆抗血清。利用western blot檢測(cè)抗血清的效價(jià)為1∶128 000,靈敏度為1∶256,抗血清不與馬鈴薯卷葉病毒屬（Polerovirus）的其它病毒以及黃癥病毒屬（Luteovirus）病毒發(fā)生交叉反應(yīng),具有很好的特異性。本文制備的ScYLV MP抗血清可以用于ScYLV的檢測(cè),并為深入研究ScYLV與寄主的相互作用等問(wèn)題提供材料基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：植物病理學(xué)報(bào). 2020,50(06)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 ScYLV MP原核表達(dá)載體的構(gòu)建
        1.2.2 ScYLV MP原核表達(dá)和純化
        1.2.3 多克隆抗血清的制備
        1.2.4 pMDC32-MPScYLV農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和浸潤(rùn)接種
        1.2.5 植物組織總蛋白提取
        1.2.6 抗血清效價(jià)檢測(cè)
        1.2.7 抗血清靈敏度檢測(cè)
        1.2.8 抗血清特異性檢測(cè)
        1.2.9 抗血清田間應(yīng)用
2 結(jié)果與分析
    2.1 構(gòu)建獲得ScYLV MP重組原核表達(dá)載體
    2.2 利用表達(dá)純化融合蛋白制備ScYLV MP抗血清
    2.3 明確ScYLV MP抗血清的效價(jià)
    2.4 明確ScYLV MP抗血清的靈敏度
    2.5 明確ScYLV MP抗血清的特異性
    2.6 模擬天然寄主甘蔗感染ScYLV的抗血清檢測(cè)
3 討論與展望


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]甘蔗黃葉病毒外殼蛋白基因原核表達(dá)研究[J]. 黃振瑞,孟巖,高三基,許莉萍,郭晉隆.  植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2007(01)



本文編號(hào)：3303674