電壓門控鈉離子通道在神經(jīng)和其它可興奮性細胞動作電位的產(chǎn)生和傳遞中起重要作用。鈉離子通道是很多天然神經(jīng)毒素和化學合成殺蟲劑的主要作用靶標,其中包括擬除蟲菊酯類殺蟲劑。擬除蟲菊酯殺蟲劑因其對昆蟲高毒性、對哺乳動物低毒性,而被廣泛用于控制農(nóng)業(yè)害蟲和傳染性疾病媒介害蟲。然而,擬除蟲菊酯的大量使用,導致許多害蟲對其產(chǎn)生了抗性。由鈉離子通道靶標部位敏感度降低而引起的對DDT和擬除蟲菊酯的抗性稱為擊倒抗性。目前,已經(jīng)在抗性物種中發(fā)現(xiàn)了 50多個和抗性相關的kdr突變。許多kdr突變位點經(jīng)爪蟾卵母細胞表達體系驗證,發(fā)現(xiàn)確實和擬除蟲菊酯抗性相關。kdr位點功能的鑒定,不僅為物種抗性等位基因頻率的評估提供精準的分子標記,而且能更好地從分子水平闡明擬除蟲菊酯和鈉離子通道的相互作用機制。本文結合定點突變、爪蟾卵母細胞表達體系、雙電極電壓鉗技術和計算機模擬,研究若干個非擬除蟲菊酯結合位點的kdr突變位點在擬除蟲菊酯抗性中的功能。研究發(fā)現(xiàn),從溫度敏感的麻痹果蠅突變體鈉離子通道中鑒定的突變位點A3k10V和A3p47V改變鈉通道的門控,且對Ⅰ型和Ⅱ型擬除蟲菊酯的作用顯著不同,兩者減小了 Ⅰ型擬除蟲菊酯誘導的尾電流的... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

電壓門控鈉離子通道的結構m

圖ｕ電壓門控鈉離子通道的結構…｜??Ｆｉｇ．ｌ．ｌ?Ｔｈｅ?ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ?ｓｏｄｉｕｍ?ｃｈａｎｎｅｌ??子通道的門控實質(zhì)上是指由電壓引起的鈉離子通道孔開啟和關象的改變。鈉離子通道的開啟和關閉是由電刺激控制的，通常道有三種狀態(tài)：靜息態(tài)（關閉），此時通道無傳遞作用；激活態(tài)（過通道產(chǎn)生一股內(nèi)流的鈉電流，使細胞膜去極化最終產(chǎn)生一種可

斥外顯子在很多物種中都具有保守性，但是對應于果蠅中的外顯子ｃ／ｄ，德國小??蠊中卻只有外顯子ｃ，而沒有外顯子ｄ［７９］。此外，對應果蠅中位于結構域ＩＩＩ的外顯??子１／ｋ，德國小蠊中則是三個突變的外顯子，稱為Ｇｌ、Ｇ２和Ｇ３（見圖１．３）。外顯子??Ｇ１和外顯子Ｇ２序列有６５％的相似性，分別對應于果蠅中的外顯子１和外顯子ｋ，外??顯子Ｇ３卻和Ｇｌ、Ｇ２都沒有序列相似性，并且Ｇ３序列中間包含一個終止密碼子，??產(chǎn)生只含有前兩個結構域的截短蛋白［７６］。在哺乳動物中也存在類似于德國小蠊外??顯子Ｇ３的外顯子，包含終止子，只能產(chǎn)生含前兩個結構域的截短蛋白。昆蟲和??哺乳動物中都有產(chǎn)生截短蛋白的外顯子，在進化過程中，該特征被保留下來，說??明該外顯子及其編碼的截短蛋白也許在生物體的興奮傳遞中起重要作用。??序列比對顯示鈉離子通道基因的選擇性外顯子在物種之間具有保守性，現(xiàn)已??發(fā)現(xiàn)在果蠅中存在的選擇性剪切位點在家蠅Ｖｓｓｃ?１基因、德國小蠊ＢｇＮａｖ基因??［７６］、蜂螨的ＶｍＮａｖ基因［８３］、埃及伊蚊的ＡａＮａｖ基因＿、煙蚜夜蛾的ｈｐａｒａ基因［８５】、??家蠶的ＢｍＮａｖ基因＠１、赤擬谷盜小菜蛾、按蚊、金小蜂和蜜蜂庫蚊中都具有保??守性。雖然不同的物種中有相同的選擇性外顯子，但選擇性外顯子在不同物種中??１２??

【參考文獻】：
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博士論文
[1]電壓門控鈉離子通道離子選擇性機理研究[D]. 夏夢蝶.清華大學 2015



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