星天牛高致病力綠僵菌菌株篩
發(fā)布時間:2021-05-06 22:34
星天牛Anoplophora chinensis(Forster)是東南沿海木麻黃防護林的主要蛀干害蟲,屬全國林業(yè)危險性有害生物。其寄主廣泛,以幼蟲蛀食近地的主干或主根,破壞樹體養(yǎng)分和水分的運輸,導(dǎo)致樹勢衰弱,重者整株枯死。該蟲在福建木麻黃沿海防護林中大面積發(fā)生,一般林分有蟲株率為2030%,危害嚴重的高達80%以上,大大削弱了防護林的防護效能。以往星天牛的防治主要是化學(xué)藥劑防治為主,由于天牛成蟲的羽化期較長、幼蟲危害隱蔽,化學(xué)藥劑難以長時間控制,防治效果不甚理想。綠僵菌Metarhizium spp.是應(yīng)用最為廣泛的殺蟲真菌之一,由于具有良好的傳播效果、較長的林間宿存能力、不易導(dǎo)致害蟲抗性以及容易生產(chǎn)等優(yōu)點,在農(nóng)林害蟲的防治中發(fā)揮了重要作用。本文通過星天牛幼蟲人工飼養(yǎng)、星天牛高致病力菌株篩選及評價、綠僵菌培養(yǎng)及林間應(yīng)用等方面的系統(tǒng)研究,為利用綠僵菌防治木麻黃沿海防護林星天牛危害提供技術(shù)依據(jù),同時應(yīng)用RNA-Seq技術(shù)對星天牛幼蟲感染綠僵菌后的免疫響應(yīng)相關(guān)基因進行了分析。本文主要結(jié)果如下:1、通過3年、4種不同配方人工飼料星天牛連續(xù)繼代飼養(yǎng),比較人工飼料配方和溫度...
【文章來源】:南京林業(yè)大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:121 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1.1 星天牛研究概況
1.1.1 星天牛的分類、分布、寄主
1.1.2 星天牛的危害性
1.1.3 星天牛防治技術(shù)研究概況
1.2 綠僵菌在農(nóng)林害蟲生物防治中的應(yīng)用
1.2.1 高致病力菌株篩選
1.2.2 綠僵菌的生產(chǎn)工藝、制劑開發(fā)與應(yīng)用技術(shù)
1.2.3 真菌在天牛類蛀干害蟲防治中的應(yīng)用
1.3 昆蟲真菌病的侵染過程
1.4 昆蟲對病原真菌入侵的防御
1.4.1 體壁阻抑
1.4.2 先天免疫防御
1.5 轉(zhuǎn)錄組測序(RNA-Seq)技術(shù)及其在昆蟲抗性生理研究中的應(yīng)用
1.5.1 轉(zhuǎn)錄組及轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
1.5.2 RNA-Seq在昆蟲抗性生理研究中的應(yīng)用
1.6 本研究的目的、意義及技術(shù)路線
1.6.1 項目來源
1.6.2 目的意義
1.6.3 技術(shù)路線
第二章 星天牛人工飼養(yǎng)技術(shù)研究
2.1 材料與方法
2.1.1 人工飼料制作
2.1.2 飼養(yǎng)過程
2.1.3 不同人工飼料飼養(yǎng)效果比較
2.1.4 不同溫度條件下星天牛生長發(fā)育情況
2.1.5 星天牛幼蟲體重變化測定
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 不同人工飼料上星天牛飼養(yǎng)效果比較
2.2.2 不同溫度條件下星天牛生長發(fā)育情況
2.2.3 星天牛幼蟲的體重變化情況
2.3 討論
第三章 星天牛高致病力綠僵菌菌株篩選
3.1 材料與方法
3.1.1 供試昆蟲
3.1.2 供試菌株
3.1.3 不同菌株生長速度及產(chǎn)孢量測定
3.1.4 不同菌株對星天牛幼蟲致病力測定
3.1.5 數(shù)據(jù)處理
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 不同菌株的生長速度與產(chǎn)孢量
3.2.2 不同菌株對星天牛幼蟲的感染過程與致病力
3.3 結(jié)論與討論
第四章 綠僵菌MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲的致病力分析
4.1 材料和方法
4.1.1 供試蟲源
4.1.2 孢子懸浮液配制
4.1.3 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致病力測定
4.1.4 數(shù)據(jù)分析
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 孢子懸浮液濃度與星天牛幼蟲累積死亡率的關(guān)系
4.2.2 時間-劑量-死亡率模型分析
4.2.3 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致死作用的劑量效應(yīng)
4.2.4 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致死作用的時間效應(yīng)
4.2.5 MaZPTR-01菌株對不同齡期星天牛幼蟲的致病力
4.3 討論
第五章 綠僵菌MaZPTR-01菌株生產(chǎn)和應(yīng)用技術(shù)研究
5.1 材料與方法
5.1.1 綠僵菌MaZPTR-01菌株固體發(fā)酵條件的研究
5.1.2 綠僵菌菌條在林間對星天牛成蟲的感染效果
5.1.3 綠僵菌MaZPTR-01孢子懸浮液對星天牛幼蟲的防治效果
5.1.4 不同防治措施對星天牛林間防治效果比較
5.2 結(jié)果與分析
5.2.1 綠僵菌MaZPTR-01菌株固體發(fā)酵條件
5.2.2 綠僵菌菌條在林間對星天牛成蟲的感染效果
5.2.3 綠僵菌MaZPTR-01菌株孢子懸浮液對星天牛幼蟲的防治效果
5.2.4 林間不同防治方法效果比較
5.3 結(jié)論與討論
第六章 星天牛幼蟲對綠僵菌侵染免疫響應(yīng)的轉(zhuǎn)錄組分析
6.1 材料與方法
6.1.1 試蟲接種
6.1.2 星天牛幼蟲總RNA的提取
6.1.3 樣品質(zhì)量檢測及測序
6.1.4 Illumina測序結(jié)果分析
6.2 結(jié)果與分析
6.2.1 RNA的提取
6.2.2 Illumina測序結(jié)果分析
6.2.3 差異表達基因統(tǒng)計及分析
6.2.4 綠僵菌侵染星天牛幼蟲不同時段差異表達基因GO功能注釋
6.2.5 綠僵菌侵染星天牛幼蟲不同時段差異表達基因pathway顯著富集分析
6.2.6 與星天牛幼蟲免疫相關(guān)的基因
6.3 結(jié)論與討論
第七章 全文總結(jié)
7.1 主要結(jié)論
7.1.1 星天牛幼蟲人工飼養(yǎng)
7.1.2 星天牛高致病力綠僵菌菌株篩選
7.1.3 綠僵菌MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲的致病力分析
7.1.4 高致病力菌株生產(chǎn)與應(yīng)用技術(shù)
7.1.5 星天牛幼蟲對綠僵菌侵染的免疫響應(yīng)的轉(zhuǎn)錄組分析
7.2 主要創(chuàng)新點
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
參考文獻
附圖和附表
附圖1 每個測序樣品中不同類型的標簽在測序reads中的分布
附圖2 Clean reads的測序飽和度分析
附圖3 星天牛幼蟲各樣品在參考基因上的分布均勻性統(tǒng)計
附圖4 各樣品基因測序覆蓋度
附表1 Ma12樣品中GO顯著富集分析
附表2 Ma24樣品中GO顯著富集分析
附表3 Ma36樣品中GO顯著富集分析
附表4 不同時段差異表達基因的Pathway顯著富集分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]感染油茶象幼蟲的高致病力金龜子綠僵菌菌株篩選[J]. 何學(xué)友,蔡守平,杜月飛,陳德蘭,黃金水,李孔泉. 林業(yè)科學(xué). 2015(08)
[2]不同來源金龜子綠僵菌菌株生物學(xué)特性[J]. 蘇文晶. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2015(02)
[3]泛素-蛋白酶體系統(tǒng)在昆蟲先天免疫中的調(diào)控作用[J]. 楊洋,李明,羅開珺,葉輝. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2015(03)
[4]整合素介導(dǎo)的信號通路及在昆蟲領(lǐng)域的研究進展[J]. 張維博,周其明,張奎,楊麗群,向仲懷,崔紅娟. 蠶業(yè)科學(xué). 2015(01)
[5]感染茶假眼小綠葉蟬的金龜子綠僵菌菌株篩選[J]. 李萬里,包亞星,童應(yīng)華. 福建林學(xué)院學(xué)報. 2014(04)
[6]48個木麻黃無性系對星天牛的抗性鑒定[J]. 曾麗瓊,黃金水,蔡守平,柯玉鑄,何學(xué)友,林秀琴,李秀明,吳惠忠. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(05)
[7]白僵菌與綠僵菌對甜菜夜蛾幼蟲的致病力[J]. 童應(yīng)華,馬淑娟,李萬里,童浩. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(04)
[8]衢州柑桔星天牛發(fā)生原因及防治技術(shù)[J]. 徐三勤,陳時偉,王海富. 現(xiàn)代園藝. 2014(11)
[9]甜菜夜蛾不同齡期幼蟲對藥劑的敏感性及其與酶活力的關(guān)系[J]. 王澤華,石寶才,康總江,朱亮,金桂華,魏書軍,宮亞軍. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2014(01)
[10]基于新一代測序技術(shù)的昆蟲轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進展[J]. 張棋麟,袁明龍. 昆蟲學(xué)報. 2013(12)
博士論文
[1]家蠶與白僵菌互作機制的研究[D]. 耿濤.江蘇科技大學(xué) 2016
[2]柞蠶微孢子蟲檢測及感染柞蠶中腸轉(zhuǎn)錄組及蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 姜義仁.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]感染蕭氏松莖象綠僵菌菌株篩選及其致病機理研究[D]. 童應(yīng)華.福建農(nóng)林大學(xué) 2009
碩士論文
[1]煙粉虱與球孢白僵菌的互作及轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 王登杰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[2]綠僵菌和白僵菌不同菌株對煙粉虱若蟲的致病力及應(yīng)用研究[D]. 王慧.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]中華稻蝗若蟲和成蟲轉(zhuǎn)錄組的比較研究及線粒體轉(zhuǎn)錄組作圖[D]. 呂紅娟.陜西師范大學(xué) 2012
[4]重慶煙草赤星病菌的致病力分化及遺傳差異性研究[D]. 張世才.西南大學(xué) 2009
本文編號:3172732
【文章來源】:南京林業(yè)大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:121 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
致謝
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
1.1 星天牛研究概況
1.1.1 星天牛的分類、分布、寄主
1.1.2 星天牛的危害性
1.1.3 星天牛防治技術(shù)研究概況
1.2 綠僵菌在農(nóng)林害蟲生物防治中的應(yīng)用
1.2.1 高致病力菌株篩選
1.2.2 綠僵菌的生產(chǎn)工藝、制劑開發(fā)與應(yīng)用技術(shù)
1.2.3 真菌在天牛類蛀干害蟲防治中的應(yīng)用
1.3 昆蟲真菌病的侵染過程
1.4 昆蟲對病原真菌入侵的防御
1.4.1 體壁阻抑
1.4.2 先天免疫防御
1.5 轉(zhuǎn)錄組測序(RNA-Seq)技術(shù)及其在昆蟲抗性生理研究中的應(yīng)用
1.5.1 轉(zhuǎn)錄組及轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)
1.5.2 RNA-Seq在昆蟲抗性生理研究中的應(yīng)用
1.6 本研究的目的、意義及技術(shù)路線
1.6.1 項目來源
1.6.2 目的意義
1.6.3 技術(shù)路線
第二章 星天牛人工飼養(yǎng)技術(shù)研究
2.1 材料與方法
2.1.1 人工飼料制作
2.1.2 飼養(yǎng)過程
2.1.3 不同人工飼料飼養(yǎng)效果比較
2.1.4 不同溫度條件下星天牛生長發(fā)育情況
2.1.5 星天牛幼蟲體重變化測定
2.2 結(jié)果與分析
2.2.1 不同人工飼料上星天牛飼養(yǎng)效果比較
2.2.2 不同溫度條件下星天牛生長發(fā)育情況
2.2.3 星天牛幼蟲的體重變化情況
2.3 討論
第三章 星天牛高致病力綠僵菌菌株篩選
3.1 材料與方法
3.1.1 供試昆蟲
3.1.2 供試菌株
3.1.3 不同菌株生長速度及產(chǎn)孢量測定
3.1.4 不同菌株對星天牛幼蟲致病力測定
3.1.5 數(shù)據(jù)處理
3.2 結(jié)果與分析
3.2.1 不同菌株的生長速度與產(chǎn)孢量
3.2.2 不同菌株對星天牛幼蟲的感染過程與致病力
3.3 結(jié)論與討論
第四章 綠僵菌MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲的致病力分析
4.1 材料和方法
4.1.1 供試蟲源
4.1.2 孢子懸浮液配制
4.1.3 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致病力測定
4.1.4 數(shù)據(jù)分析
4.2 結(jié)果與分析
4.2.1 孢子懸浮液濃度與星天牛幼蟲累積死亡率的關(guān)系
4.2.2 時間-劑量-死亡率模型分析
4.2.3 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致死作用的劑量效應(yīng)
4.2.4 MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲致死作用的時間效應(yīng)
4.2.5 MaZPTR-01菌株對不同齡期星天牛幼蟲的致病力
4.3 討論
第五章 綠僵菌MaZPTR-01菌株生產(chǎn)和應(yīng)用技術(shù)研究
5.1 材料與方法
5.1.1 綠僵菌MaZPTR-01菌株固體發(fā)酵條件的研究
5.1.2 綠僵菌菌條在林間對星天牛成蟲的感染效果
5.1.3 綠僵菌MaZPTR-01孢子懸浮液對星天牛幼蟲的防治效果
5.1.4 不同防治措施對星天牛林間防治效果比較
5.2 結(jié)果與分析
5.2.1 綠僵菌MaZPTR-01菌株固體發(fā)酵條件
5.2.2 綠僵菌菌條在林間對星天牛成蟲的感染效果
5.2.3 綠僵菌MaZPTR-01菌株孢子懸浮液對星天牛幼蟲的防治效果
5.2.4 林間不同防治方法效果比較
5.3 結(jié)論與討論
第六章 星天牛幼蟲對綠僵菌侵染免疫響應(yīng)的轉(zhuǎn)錄組分析
6.1 材料與方法
6.1.1 試蟲接種
6.1.2 星天牛幼蟲總RNA的提取
6.1.3 樣品質(zhì)量檢測及測序
6.1.4 Illumina測序結(jié)果分析
6.2 結(jié)果與分析
6.2.1 RNA的提取
6.2.2 Illumina測序結(jié)果分析
6.2.3 差異表達基因統(tǒng)計及分析
6.2.4 綠僵菌侵染星天牛幼蟲不同時段差異表達基因GO功能注釋
6.2.5 綠僵菌侵染星天牛幼蟲不同時段差異表達基因pathway顯著富集分析
6.2.6 與星天牛幼蟲免疫相關(guān)的基因
6.3 結(jié)論與討論
第七章 全文總結(jié)
7.1 主要結(jié)論
7.1.1 星天牛幼蟲人工飼養(yǎng)
7.1.2 星天牛高致病力綠僵菌菌株篩選
7.1.3 綠僵菌MaZPTR-01菌株對星天牛幼蟲的致病力分析
7.1.4 高致病力菌株生產(chǎn)與應(yīng)用技術(shù)
7.1.5 星天牛幼蟲對綠僵菌侵染的免疫響應(yīng)的轉(zhuǎn)錄組分析
7.2 主要創(chuàng)新點
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
參考文獻
附圖和附表
附圖1 每個測序樣品中不同類型的標簽在測序reads中的分布
附圖2 Clean reads的測序飽和度分析
附圖3 星天牛幼蟲各樣品在參考基因上的分布均勻性統(tǒng)計
附圖4 各樣品基因測序覆蓋度
附表1 Ma12樣品中GO顯著富集分析
附表2 Ma24樣品中GO顯著富集分析
附表3 Ma36樣品中GO顯著富集分析
附表4 不同時段差異表達基因的Pathway顯著富集分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]感染油茶象幼蟲的高致病力金龜子綠僵菌菌株篩選[J]. 何學(xué)友,蔡守平,杜月飛,陳德蘭,黃金水,李孔泉. 林業(yè)科學(xué). 2015(08)
[2]不同來源金龜子綠僵菌菌株生物學(xué)特性[J]. 蘇文晶. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2015(02)
[3]泛素-蛋白酶體系統(tǒng)在昆蟲先天免疫中的調(diào)控作用[J]. 楊洋,李明,羅開珺,葉輝. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2015(03)
[4]整合素介導(dǎo)的信號通路及在昆蟲領(lǐng)域的研究進展[J]. 張維博,周其明,張奎,楊麗群,向仲懷,崔紅娟. 蠶業(yè)科學(xué). 2015(01)
[5]感染茶假眼小綠葉蟬的金龜子綠僵菌菌株篩選[J]. 李萬里,包亞星,童應(yīng)華. 福建林學(xué)院學(xué)報. 2014(04)
[6]48個木麻黃無性系對星天牛的抗性鑒定[J]. 曾麗瓊,黃金水,蔡守平,柯玉鑄,何學(xué)友,林秀琴,李秀明,吳惠忠. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(05)
[7]白僵菌與綠僵菌對甜菜夜蛾幼蟲的致病力[J]. 童應(yīng)華,馬淑娟,李萬里,童浩. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(04)
[8]衢州柑桔星天牛發(fā)生原因及防治技術(shù)[J]. 徐三勤,陳時偉,王海富. 現(xiàn)代園藝. 2014(11)
[9]甜菜夜蛾不同齡期幼蟲對藥劑的敏感性及其與酶活力的關(guān)系[J]. 王澤華,石寶才,康總江,朱亮,金桂華,魏書軍,宮亞軍. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2014(01)
[10]基于新一代測序技術(shù)的昆蟲轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進展[J]. 張棋麟,袁明龍. 昆蟲學(xué)報. 2013(12)
博士論文
[1]家蠶與白僵菌互作機制的研究[D]. 耿濤.江蘇科技大學(xué) 2016
[2]柞蠶微孢子蟲檢測及感染柞蠶中腸轉(zhuǎn)錄組及蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 姜義仁.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]感染蕭氏松莖象綠僵菌菌株篩選及其致病機理研究[D]. 童應(yīng)華.福建農(nóng)林大學(xué) 2009
碩士論文
[1]煙粉虱與球孢白僵菌的互作及轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 王登杰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[2]綠僵菌和白僵菌不同菌株對煙粉虱若蟲的致病力及應(yīng)用研究[D]. 王慧.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]中華稻蝗若蟲和成蟲轉(zhuǎn)錄組的比較研究及線粒體轉(zhuǎn)錄組作圖[D]. 呂紅娟.陜西師范大學(xué) 2012
[4]重慶煙草赤星病菌的致病力分化及遺傳差異性研究[D]. 張世才.西南大學(xué) 2009
本文編號:3172732
本文鏈接:http://www.sikaile.net/nykjlw/dzwbhlw/3172732.html
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