煙草黑脛病是一種世界范圍內普遍發(fā)生且危害嚴重的根莖類病害,嚴重影響到煙葉的產(chǎn)量及質量。為提高田間綜合性狀表現(xiàn)優(yōu)良的鉀高效烤煙品系對煙草黑脛病的抗病能力,實現(xiàn)優(yōu)質鉀高效烤煙品系的推廣價值。本研究根據(jù)煙草黑脛病病原菌的生長特性,首先選擇5種適宜黑脛病菌生長的常規(guī)培養(yǎng)基,結合煙草根系分泌物的誘導作用,選出致病力較強的黑脛病菌發(fā)酵液;然后將黑脛病菌發(fā)酵液純化,獲得活性較好的致病因子組分（即黑脛病菌無菌發(fā)酵液活性成分）;最后以致病因子為選擇壓,對田間表現(xiàn)綜合性狀優(yōu)良的5種鉀高效烤煙品系的花藥進行抗黑脛病篩選。主要研究結果如下:1.誘導黑脛病菌致病力培養(yǎng)基的篩選。黑脛病菌在5種培養(yǎng)基（10%V8、胡蘿卜、燕麥、煙汁、馬鈴薯）中暗培養(yǎng),采用葉片離體注射法,觀察所收集的5種黑脛病菌發(fā)酵液的葉片注射區(qū)變化。結果表明,馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA）培養(yǎng)獲得的無菌發(fā)酵液注射效果最明顯,其煙葉的注射區(qū)在注射7d后出現(xiàn)明顯的過敏性壞死反應（hypersensitive resistance,HR）,且黑脛病菌培養(yǎng)7d后取得的發(fā)酵液注射效果最好,因此選擇馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA）為誘導黑脛病菌強致病力的最適培養(yǎng)基。采用葉片離... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 煙草鉀素營養(yǎng)
        1.1.1 鉀素對煙葉品質的影響
        1.1.2 鉀高效基因型烤煙鉀素營養(yǎng)特性
    1.2 煙草黑脛病
        1.2.1 病原菌的分類及形態(tài)特征
        1.2.2 黑脛病菌的生理特性
        1.2.3 黑脛病菌的培養(yǎng)特性
        1.2.4 黑脛病的致病機理
        1.2.5 黑脛病發(fā)病條件及癥狀
        1.2.6 黑脛病防治
        1.2.7 煙草黑脛病的抗性鑒定
    1.3 花藥培養(yǎng)
        1.3.1 花藥培養(yǎng)產(chǎn)生機理
        1.3.2 影響雄核發(fā)育和花藥培養(yǎng)的因素
        1.3.3 花培幼苗的倍性鑒定
        1.3.4 花培幼苗的加倍
        1.3.5 花培品種在生產(chǎn)中的應用
    1.4 抗病突變體研究現(xiàn)狀
    1.5 本論文的研究目的與意義
第2章 煙草黑脛病菌致病力的誘導
    2.1 材料
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 主要儀器設備
    2.2 方法
        2.2.1 黑脛病菌的培養(yǎng)
        2.2.2 黑脛病菌無菌發(fā)酵液的制備
        2.2.3 煙草根系分泌物的收集
        2.2.4 煙葉過敏性壞死反應（hypersensitiveresistance,HR）檢測
    2.3 結果與分析
        2.3.1 五種培養(yǎng)基誘導黑脛病菌致病力的比較分析
        2.3.2 添加煙草根系分泌物可增強黑脛病菌的致病力
    2.4 小結與討論
第3章 黑脛病菌致病因子的粗分離
    3.1 材料
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 主要儀器設備
    3.2 方法
        3.2.1 煙草根系分泌物的收集
        3.2.2 黑脛病菌無菌發(fā)酵液制備
        3.2.3 去除菌體及樣品組成的初步簡化
        3.2.4 致病因子的富集
        3.2.5 活性部位分析
        3.2.6 發(fā)酵液活性成分致病性測試
    3.3 結果與分析
        3.3.1 黑脛病菌發(fā)酵液活性成分致病性檢測結果
        3.3.2 活性組分檢測結果
    3.4 小結與討論
第4章 花藥抗黑脛病突變體的篩選
    4.1 材料
        4.1.1 供試煙草品種
        4.1.2 培養(yǎng)基
        4.1.3 化學試劑
        4.1.4 主要儀器設備
    4.2 方法
        4.2.1 煙草花藥消毒
        4.2.2 選擇壓濃度的確立
        4.2.3 單倍體幼苗的鑒定
        4.2.4 單倍體幼苗的加倍
        4.2.5 花培植株的黑脛病抗性鑒定
    4.3 結果與分析
        4.3.1 篩選抗黑脛病突變體的最適選擇壓的確立
        4.3.2 花培幼苗的倍性鑒定
        4.3.3 花培幼苗的加倍
        4.3.4 花培植株的黑脛病抗性鑒定
    4.4 小結與討論
第5章 全文總結
    5.1 總結
    5.2 本研究的后續(xù)計劃
參考文獻
致謝
作者簡介



本文編號：3154190