煙草野火病是由煙草野火病菌Pseudomonas syringae pv.tabaci引起的流行性細(xì)菌病害,對(duì)煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)均有顯著負(fù)影響。由于其在氣候條件適宜情況下可迅速發(fā)展導(dǎo)致大流行,同時(shí)此病菌具備生理分化特征,以及在防治病害的過(guò)程中使用的防治方法過(guò)于單一,尤其是某一些化學(xué)藥劑的長(zhǎng)期使用,使整個(gè)病原菌群體的致病性和抗藥性等特性發(fā)生改變。對(duì)此,本文分離獲得來(lái)自我國(guó)重慶等5個(gè)省市的煙草野火病菌,對(duì)其致病性、分子檢測(cè)展開(kāi)系統(tǒng)研究,篩選獲得適用于煙草野火病菌MLST分析的7個(gè)管家基因,同時(shí)還探討了MLST所表現(xiàn)出的群體遺傳多樣性特征,以及主要致病類群的不同致病力菌株的碳氮源利用情況,旨在基于各層面充分掌握各群體病菌群體遺傳多樣性表現(xiàn),為綜合防治該病和優(yōu)選抗病品質(zhì)工作以幫助及支撐。1.本研究在2016²018年間從重慶、四川、湖南、黑龍江、吉林和山東6個(gè)產(chǎn)煙省市的煙草生產(chǎn)區(qū)采集典型的煙草野火病病樣125份,共分離出疑似煙草野火菌株160株。隨后對(duì)這160株菌株進(jìn)行柯赫式法則檢測(cè),確定了5省市的144個(gè)菌株是引起煙草野火病的病原菌;采用細(xì)菌16s-rDNA通用引物27F/... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MLST流程

列運(yùn)用 DNA Star 中的 Seq Man 軟件進(jìn)行雙向拼接，并進(jìn)行人工校對(duì)，將 16s-rDNA 序 列 提 交 到 NCBI 的 BLAST 工 具h(yuǎn)ttps://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）實(shí)施序列比對(duì)處理。結(jié)果與分析 煙草野火病的發(fā)病癥狀及病樣采集2016 ~ 2018 年調(diào)查并采集了重慶等 6 個(gè)省市的煙草主要生產(chǎn)區(qū)中煙草野發(fā)病情況及發(fā)病癥狀。此病菌在煙草中的發(fā)病通常集中于幼苗階段與大田階片是其危害主體，但對(duì)種子、幼莖等同樣具備感染性，當(dāng)剛發(fā)病時(shí)，水漬點(diǎn)見(jiàn)于葉片上，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間，此斑點(diǎn)面積增大且呈褐色，同時(shí)有因野火致的黃色暈圈見(jiàn)于此斑點(diǎn)外緣，當(dāng)處于濕度、溫度皆高的環(huán)境中，病斑高，轉(zhuǎn)變成為無(wú)規(guī)則形狀的褐色輪紋樣，在各病斑不斷擴(kuò)大下，互相間會(huì)相狀，慢慢成為類似圓狀或無(wú)規(guī)則性的黃色大型病斑；待經(jīng)過(guò)夏季強(qiáng)光照、用，褐色病斑可發(fā)生穿孔破裂現(xiàn)象。病害侵襲植株后，可導(dǎo)致煙草出現(xiàn)規(guī)亡或腐爛現(xiàn)象，仿佛火灼燒狀（圖 2-1 和 2-2）。

圖 2-2 不同發(fā)病時(shí)期的煙草野火病癥狀Fig. 2-2 The symptoms of tobacco wildfire at different incidence time注：A 發(fā)病早期表現(xiàn)；B 發(fā)病末期表現(xiàn)；C 植株整體發(fā)病表現(xiàn)；D 田間發(fā)病表現(xiàn)。Note: A: In the early stage; B: In the later stage; C: Whole disease symptoms; D: Daejeon symptoms.2.2 分離到煙草野火菌株2016~2018 年共獲得 125 份病樣，包括四川（27 份）、重慶（13 份）、湖南（33 份）、吉林（25 份）、黑龍江（14 份）和山東（13 份），通過(guò)組織分離，選擇經(jīng)過(guò) 1 天后 NA 培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)菌落為透明狀，且稍顯凸起、具備整齊光滑的邊界，48 h 后變?yōu)榛野咨蛘叩S色菌株純化保存，最后共獲得 160 個(gè)菌株。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3106072