雙氧木脂素A是透骨草(Phryma leptostachya L.)中的主要?dú)⑾x活性成分。前期研究發(fā)現(xiàn),雙氧木脂素A可延遲果蠅幼蟲神經(jīng)-肌肉誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(EJP)的衰減率,增加果蠅神經(jīng)肌肉自發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(mEJP)的頻率,改變電壓門控鈉通道失活的電壓,推測(cè)雙氧木脂素A可能作用于昆蟲鈉離子通道。已有研究表明,昆蟲中存在的二價(jià)陽離子通道譬如果蠅中的DSC1通道對(duì)電壓門控鈉通道可能具有協(xié)同調(diào)節(jié)作用。因此,本論文以四種果蠅品系w~(1118)(野生型品系)、DSC1~(-/-)(敲除DSC1通道的突變體)、para~(ts1)(對(duì)擬除蟲菊酯殺蟲劑有抗性的突變體)和para~(ts1);DSC1~(-/-)(敲除DSC1通道的para~(ts1)品系雙突變體)為供試?yán)ハx,測(cè)定了雙氧木脂素A對(duì)其成蟲和幼蟲的毒力;利用細(xì)胞內(nèi)微電極記錄技術(shù)比較了雙氧木脂素A對(duì)果蠅幼蟲神經(jīng)-肌肉接點(diǎn)電位的影響。主要結(jié)果如下:1、雙氧木脂素A對(duì)四種果蠅品系成蟲和幼蟲的毒力測(cè)定表明,para~(ts1)品系成蟲和幼蟲對(duì)雙氧木脂素A的抗性分別是w~(1118)品系的-1.2倍和-1.8倍,而para~(ts1)品系成蟲和幼蟲對(duì)對(duì)照藥劑氯菊酯的抗性分別是w~(1118)品系的2.1倍和11.2倍,說明雙氧木脂素A和氯菊酯不僅沒有交互抗性,可能還存在一定的負(fù)交互抗性。四種果蠅品系成蟲對(duì)雙氧木脂素A的敏感性依次為para~(ts1);DSC1~(-/-)para~(ts1)w~(1118)DSC1~(-/-);幼蟲對(duì)雙氧木脂素A的敏感性依次為para~(ts1)para~(ts1);DSC1~(-/-)w~(1118)DSC1~(-/-)。其中,與w~(1118)相比,敲除DSC1通道后的DSC1~(-/-)成蟲和幼蟲對(duì)雙氧木脂素A均不敏感,para~(ts1)品系幼蟲敲除DSC1通道后,比para~(ts1)幼蟲對(duì)雙氧木脂素A不敏感,而para~(ts1)品系成蟲敲除DSC1通道后,比para~(ts1)成蟲對(duì)雙氧木脂素A更敏感,表明雙氧木脂素A作用昆蟲鈉通道時(shí),DSC1通道在成蟲和幼蟲中發(fā)揮不同的調(diào)節(jié)作用。2、直接用雙氧木脂素A處理四種果蠅品系幼蟲2 h后,利用細(xì)胞內(nèi)微電極技術(shù)記錄神經(jīng)肌肉接點(diǎn)電位的變化,結(jié)果表明四個(gè)品系幼蟲的自發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(mEJP)的幅值和頻率以及誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(EJP)的幅值都有明顯變化,特別是誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位的幅值順序與雙氧木脂素A對(duì)四種果蠅品系幼蟲毒力測(cè)定結(jié)果的敏感性順序一致。進(jìn)一步用雙氧木脂素A處理四種果蠅品系神經(jīng)肌肉離體標(biāo)本60 min,發(fā)現(xiàn)除了para~(ts1);DSC1~(-/-)品系,雙氧木脂素A可以顯著增加誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(EJP)的幅值,延遲興奮性的衰減,并提高了自發(fā)興奮性接點(diǎn)電位(mEJP)的發(fā)放頻率。以上結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)雙氧木脂素A影響神經(jīng)-肌肉的突觸傳遞,提高突觸的興奮性。另外,基于雙氧木脂素A有可能作用于昆蟲鈉離子通道,并結(jié)合本論文的研究結(jié)果,推測(cè)雙氧木脂素A可能在鈉通道上有一個(gè)獨(dú)特的與擬除蟲菊酯類殺蟲劑結(jié)合位點(diǎn)別構(gòu)耦聯(lián)的結(jié)合位點(diǎn),DSC1通道可能協(xié)同調(diào)節(jié)昆蟲鈉通道,進(jìn)而維持昆蟲體內(nèi)突觸的穩(wěn)定性和興奮性,而且還可能作用于DSC1通道。至于雙氧木脂素A如何作用于鈉通道和DSC1通道,還需要下一步的研究。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：TQ453
【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 透骨草及雙氧木脂素A的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 透骨草
        1.1.2 透骨草的主要化學(xué)成分
        1.1.3 雙氧木脂素A作用機(jī)理的研究進(jìn)展
    1.2 植物源殺蟲劑的作用機(jī)理
        1.2.1 影響昆蟲激素的代謝
        1.2.2 影響昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)
        1.2.3 影響昆蟲的呼吸系統(tǒng)
        1.2.4 影響昆蟲的消化系統(tǒng)
    1.3 電生理技術(shù)在農(nóng)藥毒理學(xué)上的應(yīng)用
        1.3.1 電生理技術(shù)的研究與進(jìn)展
        1.3.2 應(yīng)用于殺蟲劑作用機(jī)理研究
        1.3.3 應(yīng)用于害蟲抗藥性研究
    1.4 果蠅鈉通道和DSC1通道
        1.4.1 果蠅鈉通道和DSC1通道的結(jié)構(gòu)和功能
        1.4.2 para和DSC1在果蠅體內(nèi)的分布
    1.5 論文設(shè)計(jì)思路
第二章 材料與方法
    2.1 材料、溶液和儀器
        2.1.1 供試藥劑
        2.1.2 供試?yán)ハx
        2.1.3 生理溶液
        2.1.4 主要儀器
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 生測(cè)方法
        2.2.2 電生理試驗(yàn)方法和記錄
    2.3 數(shù)據(jù)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 雙氧木脂素A對(duì)四種果蠅品系成蟲和幼蟲的毒力
        3.1.1 對(duì)四種果蠅品系成蟲的影響
        3.1.2 對(duì)四種果蠅品系幼蟲的影響
    3.2 雙氧木脂素A直接點(diǎn)滴處理四種果蠅品系幼蟲后神經(jīng)肌肉接點(diǎn)電位的變化
        3.2.1 對(duì)誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位（EJP）的影響
        3.2.2 對(duì)自發(fā)興奮性接點(diǎn)電位（mEJP）的影響
    3.3 雙氧木脂素A對(duì)四種果蠅品系幼蟲離體解剖神經(jīng)肌肉標(biāo)本電位的影響
        3.3.1 對(duì)誘發(fā)興奮性接點(diǎn)電位（EJP）的影響
        3.3.2 對(duì)自發(fā)興奮性接點(diǎn)電位（mEJP）的影響
第四章 討論
    4.1 HA與擬除蟲菊酯類殺蟲劑沒有交互抗性,可能存在一定的負(fù)交互抗性
    4.2 HA作用于昆蟲電壓門控鈉通道的作用位點(diǎn)可能不同于擬除蟲菊酯類殺蟲劑,DSC1通道可能調(diào)節(jié)HA對(duì)昆蟲鈉通道的影響
    4.3 HA不僅作用于昆蟲鈉通道,還作用于DSC1通道
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2879906