蘋(píng)果黑腐皮殼屬真菌(Valsa mali)侵染引起的蘋(píng)果樹(shù)腐爛病是一種毀滅性的枝干病害,嚴(yán)重威脅著我國(guó)蘋(píng)果產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。由于病菌侵染途徑多,潛伏性強(qiáng),且致病機(jī)理復(fù)雜,導(dǎo)致該病防治非常困難。目前生產(chǎn)上主要采用化學(xué)藥劑來(lái)防治腐爛病。然而,化學(xué)藥劑的大量重復(fù)使用,會(huì)導(dǎo)致病原菌抗藥性的產(chǎn)生,同時(shí)也造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染問(wèn)題。因此,評(píng)估化學(xué)藥劑的抗藥性風(fēng)險(xiǎn),尋找高效低毒低殘留的替代生物源殺菌劑,對(duì)于制定和實(shí)施蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的防控措施及生產(chǎn)上科學(xué)用藥具有重要意義。本研究通過(guò)測(cè)定蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌對(duì)一種高效、低毒、廣譜的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)的敏感性,室內(nèi)誘導(dǎo)獲得吡唑醚菌酯的抗性菌株,分析抗性菌株的生物適合度及交互抗藥性,系統(tǒng)評(píng)估了蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌對(duì)吡唑醚菌酯的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),通過(guò)測(cè)定不同生物源殺菌劑對(duì)腐爛病菌的毒力及其對(duì)接種腐爛病菌離體枝條的保護(hù)作用,評(píng)價(jià)了6種生物源殺菌劑的室內(nèi)活性,為生產(chǎn)上合理用藥及蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的安全防治提供了科學(xué)依據(jù),取得以下主要結(jié)果:1.測(cè)定了采自于遼寧、山東、甘肅、山西、陜西、新疆6個(gè)省份的120株蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性。結(jié)果表明,所有供試菌株對(duì)吡唑醚菌酯均有極高的敏感性,EC_(50)值分布范圍在0.00137-0.0240μg/mL之間,平均EC_(50)值為0.00909±0.00552μg/mL,可作為蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性基線。不同菌株間EC_(50)值差異較小,最不敏感菌株的EC_(50)值是最敏感菌株的17.5倍。不同地區(qū)間的菌株對(duì)吡唑醚菌酯的敏感性存在一定的差異,最敏感的是新疆菌株,最不敏感的是遼寧菌株,未出現(xiàn)敏感性下降的腐爛病菌亞群體。2.隨機(jī)選取14株蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌野生菌株,在含吡唑醚菌酯的培養(yǎng)基上馴化誘導(dǎo),獲得了3株能夠穩(wěn)定遺傳的吡唑醚菌酯抗性菌株,其抗性倍數(shù)分別是野生親本菌株的41.0,56.8和22.0倍。生物適合度分析結(jié)果顯示,抗性菌株產(chǎn)繁殖體數(shù)量與野生親本菌株相比無(wú)明顯差異,但菌落生長(zhǎng)直徑、菌絲干重和致病力顯著降低。與親本菌株相比,吡唑醚菌酯抗性菌株對(duì)水楊肟酸(SHAM)和NaCl更敏感。交互抗藥性結(jié)果顯示,吡唑醚菌酯與戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、抑霉唑和甲基硫菌靈之間不存在交互抗藥性。以上結(jié)果表明,蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌對(duì)吡唑醚菌酯存在中低水平的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。3.評(píng)價(jià)了6種生物源殺菌劑對(duì)腐爛病菌的室內(nèi)活性。結(jié)果顯示,6種供試藥劑對(duì)腐爛病菌均有一定的抑制效果,除3%中生菌素WP外,其它5種藥劑對(duì)分生孢子萌發(fā)的抑制效果均優(yōu)于對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果。其中,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP的室內(nèi)毒力最強(qiáng),對(duì)菌絲生長(zhǎng)的EC_(50)分別為0.69μg/mL和0.89μg/mL,對(duì)分生孢子萌發(fā)的EC_(50)分別為0.19μg/mL和0.039μg/mL。其次為3%中生菌素WP、0.5%小檗堿AS和0.4%蛇床子素SL 3種藥劑,對(duì)菌絲生長(zhǎng)的EC_(50)為26.06-290.7μg/mL,分生孢子萌發(fā)的EC_(50)為8.29-65.22μg/mL。而2%農(nóng)抗120 AS對(duì)菌絲生長(zhǎng)的EC_(50)高于5000μg/mL,毒力最差。離體枝條保護(hù)試驗(yàn)結(jié)果顯示,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP對(duì)離體枝條保護(hù)作用最強(qiáng),其室內(nèi)防效分別為92.7%和86.7%,而2%農(nóng)抗120 AS保護(hù)作用最差,這與室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果相一致。以上結(jié)果表明,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP可作為防治蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的替代生物源殺菌劑。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S436.611.11
【部分圖文】：

圖 1-1 蘋(píng)果樹(shù)腐爛病的主要癥狀Fig. 1-1 The main symptoms of the apple Valsa canker潰瘍型主要在蘋(píng)果樹(shù)的主干和大枝上發(fā)生。在發(fā)病初期，發(fā)病部位的樹(shù)皮微隆起，呈現(xiàn)紅褐色，病斑邊緣具有水漬狀，其內(nèi)部組織松軟腐爛變褐。在發(fā)病中期，有黃褐色汁液從病部流出，腐爛的樹(shù)皮極容易剝離，剝開(kāi)后呈濕腐狀，聞起來(lái)有酒糟味。在發(fā)病后期，腐爛樹(shù)皮逐漸失水干縮，變?yōu)楹诤稚�，表面產(chǎn)生黑色的分生孢子器。當(dāng)空氣濕度達(dá)到一定條件時(shí)，黑色的分生孢子器中會(huì)溢出黃色的分生孢子角（王金友等 1988；王金友等 1989）。枝枯型主要在小枝、果苔和干枯的枝桿上發(fā)生。在發(fā)病初期，病部呈現(xiàn)紅褐色，并伴有腫脹潮濕的現(xiàn)象，但病健交界處不明顯，發(fā)病部位逐漸變干枯死。在發(fā)病后期，腐爛樹(shù)皮表面長(zhǎng)出大量分生孢子器，當(dāng)樹(shù)皮壞死一圈時(shí)，會(huì)使小枝枯死，并且病斑向下方的大枝不斷延伸，使大枝發(fā)�。◤埳平� 1993；張王斌等 2006）。此外，有研究表明，腐爛病菌也會(huì)侵染蘋(píng)果果實(shí)，表現(xiàn)出紅褐色與黃褐色相間的波紋狀病斑，病健交界清晰，果實(shí)腐爛，有酒糟味。

劑產(chǎn)生抗性不太可能與旁路氧化途徑有關(guān)會(huì)起到支配的作用，而且植物能夠產(chǎn)生（止，還未有明確的機(jī)制能夠證明旁路氧化抗性。田間發(fā)現(xiàn)小麥葉銹病菌（Puccinia recona）以及大豆銹病菌（Phakopsora pachyrhi量研究發(fā)現(xiàn)，原因可能與在 Cytb 基因的若 Cytb 基因 143 位氨基酸之后直接存在ytb 基因表達(dá)錯(cuò)誤，從而導(dǎo)致病原菌的死亡ki et al. 2007）。狀lostrobin）又稱為唑菌胺酯，純品為白色或點(diǎn)為 200℃，易溶于丙酮、甲醇等有（圖 1-1）：

289 山西萬(wàn)榮 0.0167 0.983 Y=1.051X+6.868888 甘肅天水 0.0170 0.9832 Y=0.9144X+6.617980 山東煙臺(tái) 0.0176 0.986 Y=0.744X+6.305315 山西運(yùn)城 0.0183 0.968 Y=1.275X+7.217876 甘肅天水 0.0183 0.999 Y=0.861X+6.496976 山東牟平 0.0185 0.99 Y=0.717X+6.243955 河南三門(mén)峽 0.0188 0.952 Y=0.605X+6.044561 陜西咸陽(yáng) 0.0201 0.9668 Y=0.7214X+6.223422 遼寧 0.0215 0.9561 Y=0.684X+6.1409899 河南三門(mén)峽 0.0223 0.964 Y=1.277X+7.109967 河南三門(mén)峽 0.0227 0.963 Y=0.607X+5.998659 陜西渭南 0.0232 0.973 Y=0.706X+6.154426 遼寧 0.0234 0.9462 Y=1.0385X+6.692984 山東煙臺(tái) 0.0240 0.965 Y=1.284X+7.078按照 EC50值從小到大進(jìn)行排序。e：The arrangement is according to the EC50value from small to large.

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2820528