【摘要】：水稻作為我國主要糧食作物與人民生活息息相關,全國種植水稻的地區(qū)分布廣泛。東北地區(qū)土地肥沃,夏季溫度適宜,光照充足,近年來一直作為我國優(yōu)質(zhì)水稻的主要產(chǎn)區(qū)。水稻種植生產(chǎn)中往往伴隨有多種病蟲害的發(fā)生,水稻產(chǎn)量不可避免受到一定影響。針對常見水稻病害,培育和推廣種植水稻抗病品種是病害綜合防治的主要手段,但這樣可能會引發(fā)一些新型病害。近年來國外有多個地區(qū)發(fā)現(xiàn)泛菌屬細菌引起的水稻病害,國內(nèi)也有泛菌屬細菌引起水稻穗部病害的報道。本文于2016和2017年在遼寧丹東和吉林公主嶺、拉溪地區(qū)發(fā)現(xiàn)一種水稻葉部病害,田間初步觀察其病狀與由Xoo引起的水稻白葉枯病癥狀相似,病斑沿葉邊緣擴展,失水干枯。通過對采集的發(fā)病葉片進行病原物分離和鑒定、以及致病性測定試驗,確定了該病害是由一種由菠蘿泛菌引起的水稻葉部病害。此外,本研究對引起該病的菠蘿泛菌的生物學特性進行分析,并初步探究該細菌侵染與水稻的互作關系,具體研究結(jié)果如下:1.本文從水稻田間采集代表性發(fā)病葉片,采用稀釋分離法從發(fā)病葉片上共分離獲得到43個代表性菌株。通過對細菌分離物的生理生化試驗、16S rDNA和gyrB基因的序列分析,28株細菌鑒定為泛菌屬,其中菠蘿泛菌19株,該細菌在每個地區(qū)的水稻病葉中都能分離到。將分離的43株細菌分離物接種煙草葉片,結(jié)果表明,所有菠蘿泛菌和成團泛菌都能造成煙草過敏反應。選取來源于不同地區(qū)的6株菠蘿泛菌和4株成團泛菌,采用剪葉法將其接種水稻葉片,其中4株菠蘿泛菌能夠引起水稻葉片枯萎癥狀,從人工接種的發(fā)病稻葉上仍能分離獲得菠蘿泛菌,完成柯赫氏法則驗證,確定菠蘿泛菌為該水稻葉部病害的致病因子,這是國內(nèi)首次報道由菠蘿泛菌引起的水稻葉部病害。2.菠蘿泛菌能夠侵染水稻、玉米等多種寄主植物,但有關菠蘿泛菌的生物學特性尚無具體研究,本文測試了不同條件包括溫度、pH、鹽濃度對菠蘿泛菌生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),菠蘿泛菌的最適溫度為28-32℃,溫度過高或過低都會減緩細菌的生長速度,53℃為該細菌的致死溫度;該細菌適宜在pH值為5.7-7.4的中性及弱酸性條件下生長,pH高于8.2的弱堿性條件下生長速度遲緩,強酸強堿條件下無法生長;該細菌在鹽濃度為1-3%的環(huán)境下生長速度較快,鹽濃度越高生長速度越低,在鹽濃度高于9%環(huán)境下無法生長。在Kan、Amp、Gm、Cep常用抗生素平板上都無法生長。3.為探究菠蘿泛菌侵染與水稻的互作關系,采用剪葉法將該細菌接種水稻植株葉片,接種后分別在0、12、24、48、72h采集水稻葉片,使用Trizol法提取RNA,通過qRT-PCR檢測不同采集時間點防衛(wèi)基因(RR1b和RR5)的相對表達量。結(jié)果表明,接種24 h后,RR1b和RR5基因的相對表達量逐漸升高;接種72 h時,RR1b基因表達量上調(diào)18倍,RR5基因表達量上調(diào)23倍,PAL基因變化趨勢不明朗。這表明該細菌侵染水稻葉片后能誘導調(diào)控防衛(wèi)基因的表達。
【學位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S435.11
【圖文】：

4.1 病原菌分離鑒定4.1.1 菌株分離結(jié)果實驗依據(jù)病樣采集的不同時間與地區(qū)以及平板稀釋后細菌單菌落生長性狀對菌株進行初步分類，共分離保存了 43 個菌株。其中，2016 年在遼寧丹東采集的病樣中，分離保存了12個菌株；在吉林公主嶺采集的病樣中分離到12個菌株。2017 年在遼寧丹東采集的病樣中，分離保存了 11 個菌株；在吉林拉溪采集的病樣中分離到 10 個菌株。從兩年菌株分離整體來看，菌株顏色分為黃、白和介于二者之間的顏色三種，保種命名時用 Y（Yellow）、W（White）和 M（Middle）來標注，M 菌株在每個地區(qū)分離的菌株中都是優(yōu)勢種，數(shù)量極大而且生長速度較快。白色菌株從形態(tài)上可分為兩種，一種是白色半透明，菌落形狀不固定，邊緣不光滑，成擴散狀，另一種為乳白色，菌落成圓形，體積較小，表面光滑，長期培養(yǎng)會逐漸變黃色。A B C

表 4-4 生化反應結(jié)果Table 4-4 Biochemical reaction result17 18 22 25 27 28 29吲哚實驗 - - - - - - -硝酸鹽實驗 + - + + + + +吲哚產(chǎn)生 + -檸檬酸鹽利用 + +β-半乳糖苷酶 + +產(chǎn)酸:甘油 - -D-阿拉伯糖 + +山梨醇 - -纖維二糖 + +乳糖 - -麥芽糖 + +七葉靈水解+ + +運動性 + +丙二酸鹽利用 - -苯丙氨酸脫氨酶 - -

吉林拉溪 Enterobacter sp.吉林拉溪 Pantoea ananatis 遼寧丹東王家坨子 Pantoea ananatis吉林拉溪 Pantoea ananatis2 淺黃 遼寧丹東 Microbacterium par2 橘黃 遼寧丹東 Microbacterium arb 吉林拉溪 Microbacterium arb遼寧丹東小甸子 Pseudomonas putid應結(jié)果natis 和 Pantoea agglomerans 實驗結(jié)果為陽性且這兩可能是該病害的致病菌。Erwinia aphidicola、Pseudom 實驗結(jié)果為陰性，并且只在少數(shù)葉片上分離獲得，可

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李淑菊;王惠哲;;黃瓜褐斑病的發(fā)生、識別及防治[J];天津農(nóng)業(yè)科學;2007年02期

2 張賀;張欣;漆艷香;蒲金基;呂延超;謝藝賢;;一種由角斑梨孢菌引起的香蕉葉斑病[J];熱帶生物學報;2010年02期

3 姜景魁;張紹升;廖廷武;;獼猴桃黃腐病的研究[J];中國果樹;2007年06期

4 林惠梅;江紹琳;蔣軍喜;;苦瓜炭疽病病原菌鑒定[J];江西植保;2007年04期

5 樓兵干,樓曉明,楊合同;郁金香種球腐爛病的病原鑒定[J];浙江農(nóng)業(yè)學報;2003年05期

6 陳德芬,趙國防,肖菲,張小琨,史鵬,劉嶧,楊煥婷;晚香玉葉斑病病原物鑒定[J];天津農(nóng)學院學報;2005年03期

7 段春芳;黃貴修;郭容琦;沈紹斌;張林輝;婁予強;劉光華;;云南胡椒炭疽病病原鑒定[J];江西農(nóng)業(yè)學報;2012年11期

8 于舒怡;傅俊范;周如軍;劉博;嚴雪瑞;;遼寧省白頭翁葉斑病發(fā)生初報[J];植物保護;2008年02期

9 蔡學清;黃月英;楊建珍;陳軍;蔡國隆;胡方平;;福建省西瓜細菌性果斑病的病原鑒定[J];福建農(nóng)業(yè)大學學報;2005年04期

10 譚道朝;王凱學;王華生;袁高慶;王忠文;;廣西番茄細菌性斑疹病病原鑒定及其癥狀識別[J];中國植保導刊;2013年12期

相關會議論文 前10條

1 李淑菊;王惠哲;;黃瓜褐斑病的發(fā)生、識別及防治[A];紀念天津科潤黃瓜研究所建所二十五周年論文摘要集（2001—2010）[C];2010年

2 番華彩;楊佩文;郭志祥;曾莉;;一種由多主棒孢引起的香蕉葉斑病[A];中國植物病理學會2011年學術(shù)年會論文集[C];2011年

3 張夢雅;張林;閆紅飛;劉大群;;麻山藥上一種新病害病原初探[A];中國植物病理學會2016年學術(shù)年會論文集[C];2016年

4 劉隨存;劉賢謙;高潔;;棗縮果病病原菌的分離與鑒定[A];第二屆中國林業(yè)學術(shù)大會——S5 森林病害及其防治論文集[C];2009年

5 王曉麗;夏花;朱宏建;高必達;;朝鮮薊上一種萎蔫病的病原分離與鑒定[A];糧食安全與植�？萍紕�(chuàng)新[C];2009年

6 馬元偉;馬康;王守現(xiàn);趙爽;王蘭青;劉宇;許峰;;一株刺芹側(cè)耳軟腐病致病菌新種的分離與鑒定[A];第十屆全國食用菌學術(shù)研討會論文匯編[C];2014年

7 龍月娟;毛忠順;朱書生;陳中堅;魏富剛;楊敏;朱有勇;何霞紅;;三七頂枯病的病原菌[A];中國植物病理學會2015年學術(shù)年會論文集[C];2015年

8 李伶俐;韓正敏;呂明亮;應國華;;蘇北地區(qū)楊樹枯萎病病原菌的鑒定[A];江蘇省植物病理學會第十一次會員代表大會暨學術(shù)研討會論文集[C];2008年

9 霍鵬升;紀兆林;強靜雅;王晨冰;童蘊慧;王發(fā)林;徐敬友;;桃紅黑點病病原初步鑒定及其藥劑篩選[A];2014年中國植物保護學會學術(shù)年會論文集[C];2014年

10 席中剛;劉浩;鄭露;黃俊斌;;黃連葉斑病病原鑒定及其生物學特性[A];中國植物病理學會2016年學術(shù)年會論文集[C];2016年

相關重要報紙文章 前1條

1 劉沛國　譚強;較 量[N];中國國門時報;2010年

相關碩士學位論文 前4條

1 王琦;水稻新致病菌Pantoea ananatis的分離鑒定[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2018年

2 曾璐;湘蓮腐敗病病原菌分離鑒定及其防治研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2013年

3 張海穎;我國北方馬鈴薯瘡痂病菌組成分析與致病菌株分子檢測[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2014年

4 劉伯;馬鈴薯瘡痂病新致病種的鑒定及其毒素合成基因分析[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2010年

本文編號：2792345