【摘要】：黃瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌黃瓜專化型(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum,FOC)引起的世界范圍內(nèi)的土傳病害,危害嚴(yán)重。生物防治是該病害的重要防治手段,本研究旨在尋找防治黃瓜枯萎病并促進(jìn)植物生長的多功能生防放線菌。放線菌的分離和拮抗測定。本研究采用梯度稀釋法,從包括21份蔬菜地土樣、6份堆肥樣品、5份蔬菜樣品和7份藥用植物樣品共39份樣品中分離到493株放線菌。通過平板對峙和揮發(fā)性物質(zhì)抑菌實驗,獲得拮抗帶大于18mm的拮抗菌株27株,其中菌株HNMH-3-1、HNSG-4-2和HS57對FOC菌落擴(kuò)展的抑制率分別為79.2%,67.6%和52.4%。初步將該三株菌分別鑒定為S.parvus,S.nigrescens或S.lydicus和S.nigrescens或S.lydicus。拮抗放線菌的防病促生效果評價。溫室實驗表明,孢子濃度為1×10~7 CFU/mL的菌株HNSG-4-2、1×10~6 CFU/mL的菌株HNMH-3-1和1×10~7 CFU/mL的菌株HS57對黃瓜枯萎病防病效果較好,分別為97.9%、63.3%和51.0%。菌株HNSG-4-2和HNMH-3-1在孢子濃度為10~7CFU/mL時對苗的促生作用最好;與對照相比,菌株HNSG-4-2在孢子濃度為10~7 CFU/mL時使黃瓜莖粗、苗干重、根干重分別增加93.1%、102.0%、166.7%;菌株HNMH-3-1使黃瓜株高、苗干重和根干重分別增加了71.5%、41.8%和100.0%。拮抗放線菌HS57的發(fā)酵工藝研究。為實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)目的,對菌株HS57液體發(fā)酵產(chǎn)孢培養(yǎng)基和發(fā)酵工藝進(jìn)行研究。最適有機(jī)氮源、碳源、無機(jī)鹽分別為豆粕粉、可溶性淀粉和MgSO_4?7H_2O。發(fā)酵液物料的粗細(xì)影響菌株HS57菌絲生長和產(chǎn)孢,850?m的細(xì)物料更有利于產(chǎn)孢。發(fā)酵結(jié)束時pH大于7.8,調(diào)酸后不能提高孢子存活能力;但發(fā)酵液離心后重懸于無菌水中,孢子存活量可達(dá)初始水平。將HS57發(fā)酵液離心重懸后,與硅藻土或硅藻土與稻殼粉混和物(體積比為2:1)吸附制成的固體菌劑對孢子存活無不利影響,孢子量為10~9 CFU/g。菌劑的干燥溫度顯著影響孢子存活,室溫(20-24℃)干燥比40℃干燥處理的孢子存活量高。菌劑在4℃、室溫(10-20℃)和26℃下貯存6個月的孢子存活量表明,4℃低溫或室溫更有利于孢子存活,6個月后活孢子量分別下降3倍和22倍,而26℃下保存的活孢子量下降52倍。綜上所述,菌株HS57是一株具枯萎病菌拮抗性能、促生能力、適于大規(guī)模生產(chǎn)的高潛力生防菌株。
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S436.421.13;S476
【圖文】：

圖 2.2 不同放線菌所產(chǎn)揮發(fā)性物質(zhì)的抑菌作用Fig. 2.2 Antifungal activity of volatile compounds produced by actinomycetes表 2.4 不同放線菌產(chǎn)揮發(fā)性物質(zhì)對病原菌菌絲生長的抑制作用Table 2.4 Suppression of volatile compound produced by different actinomycetes on FOC mycelial growth不同放線菌 菌落直徑（mm） 抑制率（%） 不同放線菌 菌落直徑（mm） 抑制率（%）

圖 2.3 菌株 JCG-3-5ACC 脫氨酶基因序列驗證Fig. 2.3 Agarose gel electrophoresis of the strain JCG-3-5 acdS sequence為 acdS 條帶，CK 為無模板對照lane 16 was gene acdS of strain JCG-3-5, CK was double distilled water used as template.

圖 2.4 不同放線菌菌株在剛果紅培養(yǎng)基上產(chǎn)生的水解圈Fig. 2.4 Hydrolysis zone of cellulose by different actinomycetes strains on Congo red medium表 2.5 不同放線菌菌株產(chǎn)生的纖維素水解圈直徑Table 2.5 The diameter of cellulose hydrolyzed zones by different actinomycetes strains菌株編號 水解圈直徑(cm) D/d 值 菌株編號 水解圈直徑(cm) D/d 值

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