【摘要】：螺蟲乙酯(spirotetramat)是拜耳公司于2007年推出的具有雙向內(nèi)吸性的新型季酮酸類殺蟲劑,高效廣譜,可有效防治各種刺吸式口器害蟲,通過抑制昆蟲脂類合成,達(dá)到殺蟲效果。目前螺蟲乙酯對環(huán)境毒性影響特別是對水生生物的影響研究較少。本實(shí)驗(yàn)以斑馬魚胚胎為研究對象,研究主要內(nèi)容有:(1)螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育的致畸效應(yīng);(2)螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育過程中賴氨酰氧化酶的影響;(3)螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育過程中氧化應(yīng)激系統(tǒng)的影響;(4)螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育過程中脂質(zhì)合成途徑的影響;(5)螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育過程中能量代謝的影響。通過以上內(nèi)容,分析螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育的影響。螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎發(fā)育的致畸實(shí)驗(yàn)得出以下結(jié)果:(1)螺蟲乙酯會導(dǎo)致斑馬魚胚胎發(fā)育延緩,并隨著濃度的增加,畸形率升高,造成胚胎出現(xiàn)卵黃囊水腫、脊索彎曲、心包水腫、尾部彎曲的畸形類型;(2)螺蟲乙酯抑制胚胎前48hpf階段賴氨酰氧化酶基因的表達(dá);(3)螺蟲乙酯明顯抑制了胚胎前72hpf的超氧化物歧化酶活性及表達(dá);刺激了胚胎24hpf階段谷胱甘肽過氧化物酶的表達(dá)量,在48hpf階段其表達(dá)又被顯著抑制;抑制了48、72hpf階段過氧化氫酶表達(dá)量;丙二醛濃度僅在72hpf階段2mg/L出現(xiàn)顯著下降的現(xiàn)象,其他時(shí)間及處理組均無明顯變化;(4)螺蟲乙酯處理后顯著抑制了其靶標(biāo)乙酰輔酶A羧化酶活性及表達(dá),同時(shí)抑制脂肪酸合成酶和甾醇調(diào)控元件結(jié)合蛋白基因的表達(dá);(5)螺蟲乙酯抑制了前24hpf腺苷酸激活蛋白激酶的表達(dá),24hpf階段農(nóng)藥處理組AMP/ATP比值上調(diào),刺激腺苷酸激活蛋白激酶活性上升,但在48hpf就恢復(fù)正常,同時(shí)抑制了前24hpfATP酶的基因表達(dá)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:螺蟲乙酯處理會導(dǎo)致胚胎發(fā)育遲緩,組織畸形;螺蟲乙酯處理后,導(dǎo)致胚胎發(fā)育遲緩,組織發(fā)育異常,與斑馬魚胚胎發(fā)育過程中的脂質(zhì)合成和能量代謝途徑受農(nóng)藥影響有關(guān);引起斑馬魚胚胎發(fā)生氧化應(yīng)激,但沒有造成氧化損傷;斑馬魚胚胎發(fā)育過程中脊索發(fā)育畸形是由于螺蟲乙酯處理后導(dǎo)致賴氨酰氧化酶表達(dá)量下降引起的。
【圖文】：

圖 2.2 螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎孵化率的影響Figure 2.2 The effect of spirotetramat on the hatching rate of zebrafish embryos2.2.2 螺蟲乙酯對斑馬魚胚胎的影響不同濃度螺蟲乙酯處理下的斑馬魚胚胎，出現(xiàn)了不同程度的畸形（圖 2.3），如卵黃囊水腫、脊索彎曲、心包水腫、尾部彎曲等（畸形分類根據(jù)斑馬魚致畸性等級體系評價(jià)表）[76]。由圖 2.4-2.5 可知，，對照組未出現(xiàn)畸形，螺蟲乙酯處理后，0.04、0.2、1、2mg/L，2mg/L 濃度處理組胚胎的平均畸形率分別為 25%、45%、60%、70%，斑馬魚胚胎畸形率隨濃度的升高而增加，出現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。其中，以脊索彎曲最為明顯，2mg/L 濃度組的胚胎脊索彎曲率高達(dá) 60%。0.00.224 48 72 96發(fā)育時(shí)間hdevelopment time hCK 0.04mg/l 0.2mg/l 1mg/l 2mg/l

圖 4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure 4.1 Standard curvey = 2E+07x - 342185R2 = 0.99710200000040000006000000800000010000000120000001400000016000000180000000 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2面積峰e(cuò)akprea濃度concentration mg/mL
【學(xué)位授予單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S481

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本文編號：2708147