發(fā)布時間：2020-06-11 07:59

【摘要】：麻紋蝽平腹小蜂Anastatus fulloi隸屬于膜翅目旋小蜂科(Hymenoptera:Eupelmidae),是果園害蟲荔枝蝽Tessaratoma papillosa(半翅目荔蝽科,Hemiptera:Tessaratomidae)重要的天敵寄生蜂。我國自上世紀60年代起就開始研究人工繁育和釋放平腹小蜂的技術。通過人工繁育釋放平腹小蜂,在荔枝和龍眼果園取得了很好的防治效果,其中放蜂果園荔蝽卵的寄生率可達85~90%,基本控制住了荔枝蝽的為害,為綠色和無公害荔枝、龍眼的生產提供了必要保障。寄生蜂體內存在著大量的共生菌,包括Wolbachia、Rickettsia、Cardinium、Spiroplasma等,這些共生菌不僅調控宿主昆蟲的營養(yǎng)代謝和生殖代謝,還能協(xié)助寄生蜂抵御生物、非生物脅迫,提高寄生蜂對化學農藥的抗性及對寄生害蟲的適應性等。而目前尚未見有針對麻紋蝽平腹小蜂共生菌的研究,研究麻紋蝽平腹小蜂體內共生菌的多樣性、種類、分布等,可以促進對平腹小蜂的寄生、生殖等特性更深入的了解,更好的推動利用利用平腹小蜂防治農林害蟲。本論文以麻紋蝽平腹小蜂為研究對象,首先通過內部解剖,明確其生殖系統(tǒng)的內部構造;再通過高通量測序和16S rDNA克隆擴增技術檢測其體內共生菌的多樣性,明確共生菌的種類及相對豐度;最后通過熒光原位雜交(FISH)技術確定次生共生菌Rickettsia在麻紋蝽平腹小蜂體內的分布位置,進而推測和探討其功能。本論文主要研究結果如下:1.在體式顯微鏡下分別對麻紋蝽平腹小蜂的雌、雄成蟲進行解剖,發(fā)現(xiàn)雌性生殖系統(tǒng)由中輸卵管、附腺、受精囊和1對卵巢、1對側輸卵管等組成;毒器官由1個無色透明并充滿油狀物質的毒囊、1條白色卷曲的毒腺以及1個呈囊狀富含油性物質的杜氏腺組成。雄性生殖系統(tǒng)由射精管和1對睪丸、1對附腺、1對輸精管等組成。2.基于細菌的通用引物16S rDNA測序分析麻紋蝽平腹小蜂廣東實驗室種群和福清野外種群體內共生菌的多樣性,發(fā)現(xiàn)在野外種群檢測到6大類共生菌,分別為沃爾巴克氏體Wolbachia、立克次氏體Rickettsia、不動桿菌屬Acinetobacter、醋酸菌科Acetobacteraceae、螺原體Spiroplasma以及葡萄糖酸桿菌屬Gluconobacter;而實驗室種群只檢測到醋酸菌科Acetobacteraceae和螺原體Spiroplasma。3.利用高通量測序技術完成了福清野外種群體內共生菌的檢測,發(fā)現(xiàn)在綱級階元優(yōu)勢菌為疣微菌綱Verrucomicrobiae和螺旋體綱Spirochaetes;在目級分類階元其優(yōu)勢菌為疣微菌目Verrucomicrobiales、螺旋體目Spirochaetales和腸桿菌目Enterobacteriales;在科級分類階元其優(yōu)勢菌為螺旋體科Spirochaetaceae、普雷沃氏菌科Prevotellaceae、腸桿菌科Enterobacteriaceae和毛螺菌科Lachnospiraceae;具體到屬級分類單元,其優(yōu)勢菌為密螺旋體屬Treponema、擬桿菌屬Bacteroides和埃希氏桿菌屬Escherichia。4.利用熒光原位雜交技術(FISH)對野外種群的麻紋蝽平腹小蜂生殖系統(tǒng)內的立克次氏體Rickettsia進行了檢測,發(fā)現(xiàn)立克次氏體Rickettsia在麻紋蝽平腹小蜂體內存在于菌胞外部,即在雌蟲腹部已成熟的卵內和未成熟的卵母細胞內,并集中分布在卵泡細胞周圍,同樣在卵柄和卵梗位置也檢測到立克次氏體;并且在小蜂的雄性個體的精巢附腺中也能檢測到立克次氏體的熒光信號。綜上所述,本論文對麻紋蝽平腹小蜂的生殖系統(tǒng)結構有了較為清楚的認識,并且利用16S rDNA克隆測序和高通量技術測定小蜂體內共生菌的種類豐度,然后利用熒光原位雜交技術在麻紋蝽平腹小蜂雌成蟲卵巢內的已成熟的卵、卵柄、卵梗位置以及未成熟的卵母細胞和卵巢附腺中檢測到熒光信號,證明該菌在小蜂體內是經卵垂直傳播,并且在雄成蟲精巢附腺中也發(fā)現(xiàn)立克次氏體的存在。所得結論為提高寄生蜂繁育效率和揭示次生內共生菌在宿主種群間的傳播方式提供依據。
【圖文】：

3 結果與分析3.1 麻紋蝽平腹小蜂內部器官結構解剖3.1.1 麻紋蝽平腹小蜂雌性生殖系統(tǒng)的基本構造對麻紋蝽平腹小蜂雌性生殖系統(tǒng)的內部解剖結果顯示，雌蜂的生殖系統(tǒng)由中輸卵管、附腺、受精囊和 1 對卵巢、1 對側輸卵管等組成（圖 3-1A）。雌蜂的一對卵巢呈乳白色，左右對稱，且每側卵巢由 3 個卵巢管組成，卵巢管的基部管狀，由基部到端部逐漸變細，兩側卵巢管端部延伸成的端絲集結在一起形成中懸?guī)�，懸附于脂肪體上。卵母細胞在卵巢管內發(fā)育至成熟，且每側卵巢管內都含有發(fā)育成熟的卵，呈乳白色的長卵形（圖 3-1B）。側輸卵管分布在左右卵巢的下方，呈略透明的乳白色，側輸卵管的基部膨大形成輸卵管萼，兩個側輸卵管交匯形成中輸卵管。

小蜂的毒器官與雌蜂的生殖道相連，它由毒囊和毒腺兩部分組成，杜氏腺附著于毒囊末端，，但不屬于毒器官（圖3-2A）。毒腺呈乳白色的粗絲狀，游離在腹腔中的一端封閉，另一端與水滴狀的A B
【學位授予單位】：福建農林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S476.3

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本文編號：2707616