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誘導小麥抗葉銹病生防菌的篩選鑒定及作用機理初步研究

發(fā)布時間:2020-06-02 00:19
【摘要】:小麥葉銹病(Puccinia triticina)是小麥生產上的重要病害之一,該病害在我國主要麥區(qū)均有分布,近年來有逐漸加重趨勢。本文通過田間和室內盆栽篩選,獲得了對小麥葉銹病具有誘導抗性的菌株,對其分類地位、防控效果和誘抗機理等方面進行了系統(tǒng)研究,初步研究了部分菌株的誘導抗性作用機制,研究進展如下:1.誘導小麥抗葉銹病生防菌株的篩選:將本研究室保存的4600株菌株發(fā)酵液對小麥種子進行包衣處理,通過田間試驗進行初步篩選、盆栽試驗復篩和田間防效驗證試驗。結果表明,得到的4株高效菌株Sneb1462、Sneb1586、Snef384和Snef570均有誘導小麥抗葉銹菌的侵染的良好防效,并且還具有對小麥植株生長的促進作用。2.誘導小麥抗葉銹病生防菌株的鑒定:通過形態(tài)學觀察、生理生化反應測定和分子生物學序列比對分析方法對篩選出的生防菌進行鑒定。結果表明,細菌Sneb1462為類芽孢桿菌屬(Paenibacillus),多粘類芽孢桿菌(Paenibacillus polymyxa);細菌Sneb1586為芽孢桿菌屬(Bacillus),蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)。2株真菌均為木霉屬(Trichoderma)菌株,真菌Sneb384為深綠木霉(Trichoderma atroviride),真菌Sneb570為綠色木霉(Trichoderma viride)。3.細菌Sneb1462誘導小麥抗葉銹病的活性氧變化研究:利用多粘類芽孢桿菌Sneb1462發(fā)酵液包衣處理小麥種子,待麥苗長至一葉一心期接種小麥葉銹菌,對接種后不同時間點小麥葉片中活性氧含量進行測定。結果表明,多粘類芽孢桿菌Sneb1462誘導+接葉銹菌處理前48 h內O2-和H2O2的含量明顯升高,在其12 h和24 h峰值時分別是空白對照處理的1.49和1.62倍,說明多粘類芽孢桿菌Sneb1462在葉銹病侵染初期能夠誘導小麥ROS的產生和積累,參與小麥獲得系統(tǒng)抗性防御反應。4.細菌Sneb1462誘導小麥抗葉銹病相關防衛(wèi)基因的表達分析:利用實時熒光定量PCR技術分析了對接種葉銹菌后不同時間點小麥葉片中相關防衛(wèi)基因表達情況。結果顯示,多粘類芽孢桿菌Sneb1462誘導+接葉銹菌處理后早期,Ta POD和Ta SOD防御酶基因顯著表達,峰值時是空白對照的3.11倍和7.50倍。Ta PR-1、Ta PR-2和Ta PR-5病程相關蛋白基因在12 h時表達顯著上調,分別是空白對照的2.83倍、7.50倍和9.89倍,說明多粘類芽孢桿菌Sneb1462在葉銹菌侵染初期參與誘導小麥相關防衛(wèi)基因的表達,增強植株的抗病性。
【圖文】:

抗葉銹,病菌,小麥,葉片


第二章 小麥種子處理誘導小麥抗葉銹病菌生防菌的篩選間調查種 15 d 后,每個處理隨機取 5 株小麥植株,測定其病害嚴重度,麥株高和單穗重。病害嚴重度參照李振岐(2002)依據(jù)病葉上銹積與葉片總面積的百分比來確定病級,用分級法表示,設 1%、60%、80%和 100%八級,葉片未發(fā)病,記為“0”。調查時目測病嚴重度,計算公式如下:重度=∑(各嚴重度級別 各級病葉數(shù))/調查葉片總數(shù);(%)=(發(fā)病的葉片數(shù)/調查的葉片總數(shù)) 100。

小麥葉銹病,包衣種子,菌株,抗葉銹


第二章 小麥種子處理誘導小麥抗葉銹病菌生防菌的篩選結果與分析 誘導小麥抗葉銹病生防菌株的田間篩選通過生防菌田間初篩試驗,從 4600 株菌株中篩選出 5 株細菌菌株 Sneb11285、Sneb1289、Sneb1462、Sneb1586 和 3 株真菌菌株 Snef384、Snef570、S夠增強小麥抗葉銹病侵染。由試驗結果可知(圖 2-2),細菌 Sneb1285 和真菌 S后,,小麥葉銹病的嚴重度并無顯著差異;而 4 株細菌 Sneb1197、Sneb1289、Sneb1586 和 2 株真菌 Snef384、Snef570 處理后,小麥葉銹病的嚴重度顯著降低。 4 株細菌及 2 株真菌菌株進行室內盆栽試驗。
【學位授予單位】:沈陽農業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:S435.121.43;S476.1

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