【摘要】：本文以生產上危害嚴重的大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病為主要的防治對象,利用生防菌發(fā)酵液包衣處理大豆種子的方式,篩選出兼防大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病的生防菌株,并對篩選所獲得的高效菌株Snef66與實驗室前期篩選獲得的Sneb207巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)和Sneb253委內瑞拉鏈霉菌(Streptomyces venezuelae)按照一定的比例進行復配,同時添加助劑制成新型的多功能的生物種衣劑SN103,并進行大田試驗的驗證,旨在安全有效的方式解決大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病在生產上的防治問題。在其高效防治大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病的基礎上,對篩選出的有效菌株的分類地位,誘抗作用物質和作用機理進行了研究,其主要的研究成果如下:1.誘導大豆抗胞囊線蟲病和灰斑病的生防菌株的篩選以大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病菌為靶標,通過4600株菌株發(fā)酵液包衣大豆種子在大田進行初篩試驗,初步獲得8株有效菌株,其中真菌6株,細菌2株。第二年將初篩獲得的8株菌株進行溫室盆栽試驗和大田驗證試驗,最終篩選出的Snef66菌株不但能誘導大豆抗胞囊線蟲和灰斑病,同時又具有促進生長和增加產量的作用。2.誘導大豆抗胞囊線蟲病和灰斑病的生防菌株鑒定有效細菌菌株的鑒定:鑒定結果顯示,細菌Sneb13為芽孢菌屬,蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus);細菌Sneb16為沙雷氏菌屬,普城沙雷氏菌(Serratia plymuthica)。有效真菌菌株的鑒定:依靠傳統(tǒng)的形態(tài)學鑒定的方法,結合現(xiàn)代分子生物學技術,對篩選出的6株生防真菌進行鑒定。鑒定結果顯示,真菌SnefL7為鐮刀菌屬,尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum);真菌Snef66為青霉菌屬,草酸青霉菌(Penicillium oxalicum);3株真菌SnefX1、SnefX4、SnefX10均為木霉屬真菌,分別為綠色木霉(Trichoderma viride)、擬康氏木霉(T.pesudokoningii)、長孢木霉(T.longipile);真菌SnefW31為曲霉菌屬,黃曲霉(Aspergillus flavus)。利用高效液相色譜法(HPLC)檢測菌株內東莨菪素的含量,結果顯示,草酸青霉Snef66中含有東莨菪素,且含量較高。3.新型抗大豆胞囊線蟲病和灰斑病的生物種衣劑的研制利用實驗室前期篩選獲得的2株對大豆胞囊線蟲病有抗性的菌株與篩選獲得草酸青霉Snef66進行混配,通過線蟲觸殺試驗確定了最終的復配比例為Sneb207:Sneb253:Snef66=2×10~9:10~9:10~9=2:1:1。然后將復配制成的生物菌劑,添加助劑后進行一系列的室內試驗和大田試驗驗證了其防效的穩(wěn)定性,最終將其命名為SN103,SN103不僅對大豆胞囊線蟲病和灰斑病防效顯著,且對大豆發(fā)芽以及幼苗均有一定的促進作用。4.東莨菪素包衣種子誘導大豆抗灰斑病的研究經過檢測在篩選獲得的生防菌株Snef66草酸青霉菌的發(fā)酵液中含有東莨菪素,且與對照相比,東莨菪素含量較高。所以利用東莨菪素直接包衣處理大豆種子,通過平板對峙,種子萌發(fā),促生,盆栽和大田等試驗,證明了東莨菪素處理過的種子顯著提高了對大豆灰斑病的抗性,且同時還能促進生長和增加產量。
【圖文】：

圖 1-1 大豆灰斑病病斑A. 不同時期病斑 B.D..顯微圖片正面；C.E.顯微圖片背面Figure 1-1Soybean gray spot disease spotA. The lesions in different periods B.D..microscopic picture front;C.E.microscopic picture back斑病的病原菌及侵染菌屬大豆褐斑短胖孢菌，半知菌類尾孢屬。分生孢子梗不分枝，淡褐色狀，無色透明 ，基部鈍圓 ，頂端尖細，具 1~9 個隔 ，（19~80）μm×（邵波，2012；丁俊杰，2009；丁俊杰等，2012；馬淑梅，2011；顧鑫等黃桂潮，1984）。圖 1-2 大豆灰斑病菌形態(tài)特征

圖 1-1 大豆灰斑病病斑A. 不同時期病斑 B.D..顯微圖片正面；C.E.顯微圖片背面Figure 1-1Soybean gray spot disease spotA. The lesions in different periods B.D..microscopic picture front;C.E.microscopic picture back1.2.2 大豆灰斑病的病原菌及侵染大豆灰斑病菌屬大豆褐斑短胖孢菌，半知菌類尾孢屬。分生孢子梗不分枝，淡褐色。分生孢子圓柱形或倒棍棒狀，無色透明 ，基部鈍圓 ，頂端尖細，具 1~9 個隔 ，，（19~80）μm×（3.5~8.0）μm，無色透明（邵波，2012；丁俊杰，2009；丁俊杰等，2012；馬淑梅，2011；顧鑫等，2010；曹越平等，2003；黃桂潮，1984）。
【學位授予單位】：沈陽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S435.651

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本文編號：2690352