【摘要】：咪唑乙煙酸(Imazethapyr)是我國農(nóng)田中常用的除草劑之一,因咪唑乙煙酸除草效果好,價格低廉,被廣泛應用與推廣,特別是黑龍江省大豆田中使用量較大,但咪唑乙煙酸的長殘性使其長期殘留在土壤中,給農(nóng)作物輪作帶來了一定的困難,也給環(huán)境帶來了巨大壓力,因此找到咪唑乙煙酸降解機制,對解決咪唑乙煙酸的污染問題至關重要。為研究短密木霉(Trichodermta brevicompactum)發(fā)酵液對咪唑坐乙煙酸的降解能力,用富集培養(yǎng)基培養(yǎng)短密木霉,分別取3、5、7、9和11d的發(fā)酵液,同時用無機鹽培養(yǎng)基和含咪唑乙煙酸的無機鹽培養(yǎng)基分別培養(yǎng)短密木霉。將不同發(fā)酵液分別進行離心處理獲得發(fā)酵液上清,用0.22 μm和0.45 μm微孔混合濾膜抽濾獲得發(fā)酵液抽濾液。不同發(fā)酵液的降解率結(jié)果為:發(fā)酵液上清0.22 μm混合濾膜抽濾液,發(fā)酵液上清0.45 μm混合濾膜抽濾液,0.45 μm混合濾膜抽濾液和0.22 μm混合濾膜抽濾液無明顯區(qū)別;富集培養(yǎng)基發(fā)酵液中,第7 d降解率相對較高。為探究短密木霉降解咪唑乙煙酸的蛋白質(zhì)表達變化和相關代謝途徑并鑒定咪唑乙煙酸降解基因,進行了蛋白質(zhì)組測序,完成了蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)聯(lián)合分析。利用同重同位素相對與絕對定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRA Q)技術分析咪唑乙煙酸對短密木霉蛋白組的影響。蛋白質(zhì)組共鑒定到4003個蛋白質(zhì),差異表達蛋白有353個,184個蛋白上調(diào),169個蛋白下調(diào);在差異蛋白顯著富集的GO條目中,生物過程有195個差異表達的蛋白,富集在351條通路中,細胞組分中有129個差異表達蛋白,富集在62條通路中,分子功能中有220個差異表達的蛋白,富集在157條通路中;KEGG富集通路分析結(jié)果顯示,有258個差異蛋白富集在105條通路中。通過蛋白質(zhì)組分析,可有效找到短密木霉降解咪唑乙煙酸的相關蛋白,進而了解其代謝途徑,為降解咪唑乙煙酸提供蛋白質(zhì)水平和代謝水平的分子理論基礎。完成了蛋白質(zhì)組與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進行關聯(lián)分析。定量蛋白質(zhì)和基因的表達關聯(lián)系數(shù)為-0.0472,顯著差異蛋白質(zhì)和顯著差異基因表達關聯(lián)系數(shù)為-0.1420,表達變化趨勢相同蛋白質(zhì)和基因表達關聯(lián)系數(shù)為-0.7413,表達變化趨勢相反蛋白質(zhì)和基因表達關聯(lián)系數(shù)為-0.7916;關聯(lián)到24個差異表達基因與蛋白豐度相應變化,其中表達趨勢相同有12個基因,同時上調(diào)7個,同時下調(diào)5個;同時上調(diào)的7個基因NCBInr數(shù)據(jù)庫中功能已知的基因有2個,分別為TBU1425A和TBU3981A。經(jīng)Q-pcr驗證,表達變化趨勢與蛋白質(zhì)組和轉(zhuǎn)錄組一致,將TBU1425A和TBU3981A基因作為降解咪唑乙煙酸的候選基因。
【圖文】：

的雜草防治，多用于我國大豆產(chǎn)區(qū)防治雜草［１］。特別是在黑龍江省農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，咪唑乙逡逑煙酸作出了巨大的貢獻。逡逑咪唑乙煙酸化學結(jié)構(gòu)見圖１－１，化學名稱為（ＲＳ）邋－５－乙基－２－邋（４－異丙基－４－甲基－５－逡逑１Ｈ－２－咪挫啉－２－基）煙酸［２］，英文通用名ｉｍａｚａｐｙｒ，商品名有ａｒｓｅｎａｌ、ａｓｓａｕｌ、滅草煙和逡逑阿時拉等，具有殺草種類多、活性高、選擇性強等優(yōu)點。咪唑乙煙酸可以抑制乙酰乳酸逡逑合成酶（ＡｃｅｔｏｌａｃｔａｔｅＳｙｎｔｈａｓｅ，邋ＡＬＳ），阻礙蛋白質(zhì)合成，進而抑制植物的生長而死亡。逡逑在豆科植物在體內(nèi)，咪唑乙煙酸吸收后很快被分解，對大豆生長發(fā)育沒有影響，因此成逡逑為大豆田中優(yōu)良而常用的除草劑［３，４］。但因其殘留期較長，易對后茬作物產(chǎn)生藥害，并逡逑且咪唑乙煙酸使用量仍在逐年增加，對未來我國的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展也將產(chǎn)生重大威脅，，同逡逑時也將會帶來食品安全問題，因此解決咪唑乙煙酸的污染問題迫在眉睫。逡逑＿邋八邋ＣＯＯＨ逡逑圖１－１咪唑乙煙酸（咪草煙）化學結(jié)構(gòu)圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅｌ－１邋Ｃｈｅｍｉｃａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｉｍａｚａｐｙｒ逡逑１．１．１邐＿乙煙賊留的危害逡逑１９９０年我國開始批量進口咪唑乙煙酸并在黑龍江省應用

逡逑效液相圖，由圖２－１可知：咪唑乙煙酸的保留時間為６．２６９邋ｍｉｎ。逡逑１－８０：邐Ｉ邐｜逡逑｜逡逑１．６０－邐ｇ邐．逡逑１．４０．．逡逑１．２０邋ｊ逡逑１．００邋！逡逑？邋１逡逑０．８０邋ｊ逡逑０．６０－Ｊ逡逑①．邐ｉ逡逑０邋２０邋Ｊ邐Ｚ邋？邋ｓ邋！邐ｓ邋§逡逑ｊ邐ＳＩ邐＾邋ｉ邋＼逡逑ｎ邋ｎｎ邋１邐￡邐邐Ｉ邋．…Ｘ邐００、００邐逡逑Ｕ．ＵＵ邋■邐ｉｊ邐Ｔ：．邐￣邐？；邐Ｈｒ邋＼５邋Ｔ．逡逑１．００邐２．００邐３．００邐４．００邐５．００邐６．００邐７．００邐８．００邐９．００邐１０．００逡逑分鐘逡逑圖２－１咪唑乙煙酸水溶液液相色譜圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２－１邋Ｌｉｑｕｉｄ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋ａｑｕｅｏｕｓ邋ｓｏｌｕｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｉｍａｚａｐｙｒ逡逑２．２．２邋＿乙煙酸標準曲線逡逑咪唑乙煙酸標準品用超純水溶解，濃度為１００－１０００邋ｍｇ／ｋｇ，與色譜峰面積繪制標準逡逑曲線：ｙ＝８５０４ｘ＋２０３９３
【學位授予單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S481.8

【參考文獻】

相關期刊論文 前9條

1 韓慶莉;王軍民;韓禎;王棟;白志輝;;類球紅細菌對草莓敵敵畏殘留的降解效果[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2013年05期

2 李祖明;馮斯雯;季越;果月媛;溫妮;;類球紅細菌3757產(chǎn)輔酶Q10和SOD的提取與穩(wěn)定性研究[J];食品科技;2013年04期

3 盧向明;陳萍萍;;有機氯農(nóng)藥微生物降解技術研究進展[J];環(huán)境科學與技術;2012年06期

4 曾凡正;高陽;李進偉;金青哲;王興國;;花生油生物精煉法去除黃曲霉毒素的研究[J];中國油脂;2012年01期

5 陳玉潔;束長龍;劉新剛;梅向東;張浩;宋福平;張杰;;咪唑乙煙酸降解菌的分離、鑒定及降解特性研究[J];農(nóng)藥學學報;2011年04期

6 古麗·艾合買提;穆斯塔帕·克地爾;唐嫻;;產(chǎn)黃原膠降解酶放線菌篩選及發(fā)酵工藝研究[J];新疆農(nóng)業(yè)科學;2011年07期

7 靳穎華;;液相色譜法測定燕窩中唾液酸含量研究[J];中國醫(yī)藥導刊;2011年06期

8 曹知平;許景鋼;李淑芹;霍瑩;;黑曲霉LZ1降解咪唑乙煙酸的特性[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2010年07期

9 臧海蓮;熊明華;成小松;李艷春;潘俊波;李春艷;;一株咪唑乙煙酸降解菌的分離鑒定及其降解特性[J];作物雜志;2010年03期

相關碩士學位論文 前3條

1 趙靜;銅污染土壤的木霉強化海州香薷修復研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2009年

2 于雪云;土壤中多功能木霉菌的篩選鑒定及木霉多樣性分析[D];山東理工大學;2008年

3 楊靖華;咪草煙在大豆田土壤及植株中殘留動態(tài)及在土壤中吸附特性的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2005年

本文編號：2668499