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MicroRNA-210對鼻咽癌細胞放射敏感性的影響

發(fā)布時間:2017-08-24 19:14

  本文關鍵詞:MicroRNA-210對鼻咽癌細胞放射敏感性的影響


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【摘要】:第一部分構建放射抗拒鼻咽癌細胞系目的:建立鼻咽癌放射抗拒細胞系CNE-2R,檢測其與原細胞系(CNE-2)表達差異的mi RNAs,為進一步研究mi RNAs與鼻咽癌放療敏感性的關系奠定基礎。方法:用劑量梯度法建立鼻咽癌放射抗拒細胞系CNE-2R。然后,應用細胞周期實驗、細胞增殖實驗、克隆形成實驗分析誘導的放射抗拒細胞系與原細胞系存在放射敏感性差異。最后,用micro RNA基因芯片檢測CNE-2和CNE-2R細胞表達差異的mi RNAs。結果:與原親代細胞CNE-2相比,放射抗拒細胞CNE-2R阻滯于G2/M期的比例明顯減少(P0.05)。經過0、4、8和12Gy的照射后,CNE-2細胞的存活率較CNE-2R細胞降低(P0.05)。經過0、4、8和12Gy劑量照射后,CNE-2R細胞的放射敏感性較CNE-2細胞降低。micro RNA基因芯片顯示誘導成功的CNE-2R與CNE-2細胞比較,有92個表達差異2倍的mi RNAs,并用RT-PCR驗證mi R-210的相對表達量(P0.05)。結論:CNE-2細胞與放射抵抗的CNE-2R細胞的mi RNAs表達存在差異,其中mi RNA-210的表達差異倍數最大。第二部分Micro RNA-210負性調節(jié)鼻咽癌細胞放射敏感性目的:研究mi R-210對鼻咽癌細胞的放射敏感性的影響,為治療鼻咽癌放射抵抗提供新的靶點。方法:用LV-hsa-mi R-210慢病毒感染CNE-2細胞,用LV-hsa-mi R-210-inhibition慢病毒感染CNE-2R細胞,RT-PCR檢測mi R-210在CNE-2-mi R-210和CNE-2R-mi R-210-inhibition細胞中的相對表達量。用細胞周期和凋亡實驗、細胞增殖實驗、克隆形成實驗檢測CNE-2,CNE-2R,CNE-2-mi R-210和CNE-2R-mi R-210-inhibition細胞的周期、凋亡、存活率和放射敏感性的差異。結果:CNE-2和CNE-2R-mi R-210-inhibition細胞處于G2/M期的比例明顯高于CNE-2-mi R-210和CNE-2R細胞(P0.05),而它們處于S期的比例明顯低于CNE-2-mi R-210和CNE-2R細胞(P0.05)。經過4Gy的照射后,CNE-2和CNE-2R-mi R-210-inhibition細胞的凋亡率較CNE-2-mi R-210和CNE-2R細胞高(P0.05)。經過4、8和12Gy的照射后,CNE-2和CNE-2R-mi R-210-inhibition細胞的存活率和存活分數較CNE-2-mi R-210和CNE-2R細胞降低(P0.05)。結論:Mi R-210負性調節(jié)鼻咽癌細胞的放射敏感性,其可能作為治療鼻咽癌放射抵抗的新靶點。
【關鍵詞】:鼻咽癌 micro RNA 放療 放射抗拒性 鼻咽癌 mi R-210 放射敏感性
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R739.63;R730.55
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-11
  • 前言11-12
  • 第一部分 構建放射抗拒鼻咽癌細胞系12-19
  • 1.材料12-13
  • 2.實驗方法13-14
  • 3.實驗結果14-18
  • 4.討論18-19
  • 第二部分Micro RNA-210 負性調節(jié)鼻咽癌細胞放射敏感性19-28
  • 1. 材料19-20
  • 2. 實驗方法20-21
  • 3.實驗結果21-26
  • 4.討論26-28
  • 全文總結28-29
  • 參考文獻29-33
  • 文獻綜述:Micro RNAs與放射敏感性的關系33-39
  • 參考文獻36-39
  • 致謝39-40
  • 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文40

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