三七總皂苷在昆明小鼠急性炎性內(nèi)臟痛中的作用及機(jī)制研究
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【摘要】:目的:探討三七總皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS)在乙酸所致小鼠急性炎性內(nèi)臟痛中的鎮(zhèn)痛作用及其與脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞激活的關(guān)系。方法:本實(shí)驗(yàn)以雄性昆明小鼠為研究對(duì)象,按以下方式進(jìn)行分組:(1)乙酸所致內(nèi)臟痛模型組(Acetic Acid,AA)腹腔注射1%乙酸0.25ml、生理鹽水對(duì)照組(Normal saline,NS)腹腔注射等體積生理鹽水、空白對(duì)照組不做處理;(2)PNS預(yù)處理組(Pre-treatment):在內(nèi)臟痛模型建立前1h,動(dòng)物腹腔分別注射50mg/kg(50mg/kg Pre-PNS+AA)、100mg/kg(100mg/kg Pre-PNS+AA)、200mg/kg PNS(200mg/kg Pre-PNS+AA)或者等體積生理鹽水(Pre-NS+AA);(3)PNS治療組(Co-treatment):動(dòng)物在注射注射200mg/kg PNS(C-PNS)或者等體積生理鹽水(C-NS)后即刻注射1%乙酸。注射乙酸或者生理鹽水后,觀察1小時(shí)內(nèi)小鼠的內(nèi)臟痛覺表現(xiàn)(腹壁收縮),疼痛行為觀察結(jié)束后,處死動(dòng)物取材,采用免疫組織化學(xué)法和Western-blot觀察脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物GFAP及GS的表達(dá)情況。另一部分正常小鼠在注射200mg/kg PNS(PNS組)或者等體積生理鹽水(NS組)后1h,采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)對(duì)其活動(dòng)度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:1.與生理鹽水對(duì)照組相比,動(dòng)物注射乙酸后出現(xiàn)明顯的內(nèi)臟痛反應(yīng);2.PNS預(yù)處理劑量依賴的降低乙酸所致內(nèi)臟痛反應(yīng),與Pre-NS+AA組相比,100mg/kg Pre-PNS+AA組、200mg/kg Pre-PNS+AA組腹壁收縮次數(shù)減少,差異具有顯著性(P0.001);3.與C-NS組相比,C-PNS組對(duì)乙酸所致內(nèi)臟痛反應(yīng)無影響(P0.05);4.曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)表明,與NS組相比,PNS組總的穿越格子數(shù)、中央格停留的時(shí)間及中央格穿越次數(shù)差異無顯著性(P0.05);5.免疫組織化學(xué)法與Western-blot結(jié)果表明,與NS組相比,Pre-NS+AA、200mg/kg Pre-PNS+AA組小鼠脊髓GFAP及GS表達(dá)上調(diào),差異具有顯著性(P0.001);與Pre-NS+AA組相比,200mg/kg Pre-PNS+AA組GFAP及GS表達(dá)下調(diào),差異具有顯著性(P0.01)。結(jié)論:PNS預(yù)處理能緩解乙酸所致昆明小鼠的急性炎性內(nèi)臟痛,其機(jī)制可能與PNS預(yù)處理抑制脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞活化及GS表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:昆明小鼠 急性炎性內(nèi)臟痛 三七總皂苷 星形膠質(zhì)細(xì)胞 谷氨酰胺合成酶
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R402
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 主要英文縮略語索引11-12
- 第1章 緒論12-16
- 第2章 實(shí)驗(yàn)材料及方法16-24
- 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑16-17
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器16-17
- 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與耗材17
- 2.2 藥品和試劑配制17-19
- 2.3 實(shí)驗(yàn)方法19-24
- 2.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及其分組19
- 2.3.2 急性炎性內(nèi)臟痛模型制備19-20
- 2.3.3 行為學(xué)檢測(cè)20
- 2.3.4 組織制備20-21
- 2.3.5 免疫組織化學(xué)檢測(cè)(漂片法)21-22
- 2.3.6 Western Blot檢測(cè)22-23
- 2.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法23-24
- 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-34
- 3.1 行為學(xué)結(jié)果24-29
- 3.1.1 小鼠炎性內(nèi)臟痛模型建立24-25
- 3.1.2 PNS預(yù)處理對(duì)急性炎性內(nèi)臟痛影響25-26
- 3.1.3 PNS與乙酸同時(shí)注射對(duì)小鼠炎性內(nèi)臟痛的影響26-27
- 3.1.4 腹腔注射 200mg/kg PNS對(duì)正常昆明小鼠的影響27-29
- 3.2 免疫組化檢測(cè)GFAP的表達(dá)變化29-31
- 3.3 western blotting檢測(cè)GFAP表達(dá)變化31-32
- 3.4 western blotting檢測(cè)小鼠腰骶膨大段脊髓GS表達(dá)變化32-34
- 第4章 討論34-38
- 第5章 結(jié)論38-40
- 參考文獻(xiàn)40-44
- 文獻(xiàn)綜述 受體在內(nèi)臟痛中的作用44-58
- 參考文獻(xiàn)53-58
- 攻讀學(xué)位期間的科研成果58-60
- 參與的課題60-62
- 致謝62
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,本文編號(hào):636664
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