目的:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種常見的慢性自身免疫性疾病,以滑膜關(guān)節(jié)慢性炎癥反應(yīng)和關(guān)節(jié)損傷為主要臨床表現(xiàn)。抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(ACPA)能在70%-80%的RA患者中檢出并且診斷特異性可達98%,ACPA可先于臨床表現(xiàn)10年出現(xiàn)并能夠預(yù)測臨床結(jié)果,為RA患者的診斷和治療提供依據(jù)。ACPA的檢測是基于抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng),所以,抗原的標準化對ACPA的檢測結(jié)果至關(guān)重要。蛋白質(zhì)抗原或多肽的瓜氨酸化是一種蛋白質(zhì)翻譯后修飾過程,并且與RA的發(fā)病過程及抗體的產(chǎn)生有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)瓜氨酸化EB病毒核抗原-1(EBNA-1)蛋白序列中存在能被ACPA識別的抗原表位。本研究首先建立一種自身抗體識別抗原表位的篩選方法,并應(yīng)用此篩選方法,通過對瓜氨酸化EBNA-1候選多肽與ACPA陽性血清和陰性血清的反應(yīng)性,篩選出與ACPA有最佳反應(yīng)的多肽或多肽組合,為ACPA檢測提供最佳的抗原。方法:1.抗原表位篩選方法的建立:制備BBS酶標微孔反應(yīng)板,作為通用酶標反應(yīng)板。將生物素化牛血清白蛋白包被聚苯乙烯酶標微孔反應(yīng)板,向微孔反應(yīng)板中加入鏈霉親和素,形成生物素化牛血清白蛋白-鏈霉親和素(Bio-BSA-SA,BBS)酶...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀
    研究目的
    研究方法
一、抗原表位篩選方法的建立
    1 材料和方法
        1.1 儀器設(shè)備
        1.2 實驗材料
        1.3 主要試劑
        1.4 商品試劑
        1.5 試劑配制
        1.6 實驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 BBS板包被濃度
        2.2 各組分最佳工作濃度
        2.3 最終反應(yīng)條件
        2.4 方法學(xué)性能評價
    3 小結(jié)
二、ACPA識別抗原表位篩選
    1 材料和方法
        1.1 儀器設(shè)備
        1.2 實驗材料
        1.3 主要試劑
        1.4 商品試劑盒
        1.5 試劑配制
        1.6 研究對象
        1.7 實驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 ACPA-IgG檢測結(jié)果
        2.2 ACPA-IgG表位譜篩選結(jié)果
    3 小結(jié)
三、討論
    1 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的實驗室診斷
    2 抗CCP抗體檢測方法
    3 表位譜研究結(jié)果及意義
結(jié)論
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的研究進展
    綜述參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：3835908