目的:建立一種改進(jìn)的高分辨熔解曲線(High resolution melting curve,HRM)并探索其亞甲基四氫葉酸還原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T多態(tài)性(rs1801133)檢測(cè)應(yīng)用。方法:針對(duì)MTHFR C677T設(shè)計(jì)一對(duì)帶有M13接頭的通用引物,通過改進(jìn)HRM反應(yīng)體系,提高HRM的分析性能;并利用M13接頭作為測(cè)序引物直接對(duì)HRM產(chǎn)物進(jìn)行Sanger測(cè)序驗(yàn)證。收集2016.06至2017.10來自本院體檢中心的外周血樣本1030例,應(yīng)用改進(jìn)的高分辨熔解曲線檢測(cè)其MTHFR C677T單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果:成功建立了一種改進(jìn)的高分辨熔解曲線并成功應(yīng)用于臨床樣本MTHFR C677T多態(tài)性檢測(cè)。1030例脫氧核糖核酸(Deoxynucleic acid,DNA)中,CC基因型占39.13%,CT基因型占48.16%,TT基因型占12.71%。結(jié)論:通過改進(jìn)HRM成功建立了一種檢測(cè)MTHFR C677T的基因分型方法,該方法具有簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)、快速準(zhǔn)確和高通量的特點(diǎn),適用于臨床大規(guī)模檢測(cè)。

【文章頁數(shù)】：35 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述：高分辨熔解曲線分析技術(shù)及其臨床基因檢測(cè)應(yīng)用進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與參加的重要學(xué)術(shù)會(huì)議目錄



本文編號(hào)：3815752