目的:探討攜生物素化的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2并標(biāo)記紅色熒光的重組腺病毒-微泡復(fù)合體(PAd-RFP/BMP2-Mbs)利用超聲靶向爆破微泡定位釋放技術(shù)(UTMD)體外轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),通過BMP2過表達(dá)促進(jìn)BMSCs向心肌細(xì)胞定向分化的可行性。方法:提取、分離、純化大鼠BMSCs,取P3代BMSCs隨機(jī)分為5組:Ⅰ組:單純BMSCs組(對照組);Ⅱ組:超聲+微泡+BMSCs組(BMSCs+UTMD);Ⅲ組:超聲+BMSCs組(BMSCs+U);Ⅳ組:微泡+BMSCs組(BMSCs+M);Ⅴ組:超聲+微泡+BMSCs+PAd-RFP/BMP2組(BMSCs+UTMD+BMP2);超聲輻照體外轉(zhuǎn)染并培養(yǎng)誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化,于轉(zhuǎn)染后24h、48h、72h觀察BMP2表達(dá)情況,轉(zhuǎn)染72h后檢測PAd-RFP/BMP2在BMSCs中的轉(zhuǎn)染率,CCK8法檢測BMSCs的活性,轉(zhuǎn)染后72h通過RT-PCR及Western blot檢測PAd-RFP/BMP2的m RNA含量及蛋白在BMSCs中的表達(dá),轉(zhuǎn)染后第14天通過Western blot檢測心肌特異性蛋白cTnT、Cx...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
研究內(nèi)容與方法
    1. 材料
        1.1 試驗動物與試劑
        1.2 實驗儀器
    2.方法
        2.1 BMSCs 體外培養(yǎng)及鑒定
        2.2 BMSCs 表面分子鑒定
        2.3 UTMD 介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染體外實驗
        2.4 BMP2 基因轉(zhuǎn)染率檢測
        2.5 RT-PCR 檢測各組 BMSCs 中 BMP2m RNA 表達(dá)
        2.6 Western blot 法檢測各組 BMSCs 中 BMP2 蛋白含量
        2.7 轉(zhuǎn)染后各組 BMSCs 活性檢測
        2.8 BMP2 促進(jìn) BMSCs 向心肌細(xì)胞分化的基因蛋白表達(dá)
    3 統(tǒng)計方法
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
導(dǎo)師評閱表



本文編號：3813924