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EGFR通過激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路PERK-eIF2α-GRP94及IRE1α-XBP1-GRP78介導(dǎo)人口咽癌放射抗拒性

發(fā)布時間:2023-04-12 03:09
  目的:表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)在很多惡性腫瘤中過表達(dá),且其過表達(dá)與惡性腫瘤放射抗拒性的產(chǎn)生密切相關(guān)。我們前期研究中發(fā)現(xiàn)放療可以損壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum,ER)穩(wěn)態(tài),誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum,ERS),介導(dǎo)人口咽癌放射抗拒性。但EGFR是否通過ERS通路調(diào)控放療敏感性尚未見報道。方法:本研究采用轉(zhuǎn)染siRNA沉默EGFR,及表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)激活EGFR處理口咽癌原始細(xì)胞系(FaduP,Detroit 562P),及其抗拒細(xì)胞系(FaduR,Detroit562R),克隆形成實驗檢測沉默EGFR及激活EGFR對口咽癌細(xì)胞放療敏感性的調(diào)控。Western blot方法檢測沉默EGFR及激活EGFR與射線聯(lián)合應(yīng)用在口咽癌細(xì)胞中對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路的活化。免疫熒光及Western blot方法檢測沉默EGFR聯(lián)合放療對自噬、DNA雙鏈斷裂修復(fù)、凋亡相關(guān)蛋白的活化。免疫組化檢測80例人口咽癌患者EGFR及PERK表達(dá)...

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、所需試劑、及放射抗拒OSCC細(xì)胞的建立
    2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    2.3 Western blot實驗
    2.4 實時定量PCR
    2.5 克隆形成實驗
    2.6 流式細(xì)胞儀
    2.7 免疫熒光
    2.8 CCK-8 細(xì)胞增殖檢測
    2.9 免疫組化
    2.10 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 放射抗拒OSCC細(xì)胞系放療后EGFR活化差異
    3.2 EGFR增加口咽癌細(xì)胞的放射抗拒性
    3.3 OSCC細(xì)胞系接受放療后EGF-EGFR激活ERS通路
    3.4 EGFR-ERS信號可通過激活DNA雙鏈斷裂(DNA double‐strand break,DSB)修復(fù)和自噬,抑制凋亡而介導(dǎo)OSCC細(xì)胞放射抗拒
    3.5 EGF-EGFR通過激活ERK/AKT和 ERS信號增加放療誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖
    3.6 EGFR和 PERK在人HPV(-)-OSCC患者腫瘤組織的表達(dá)
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
本研究創(chuàng)新性的自我評價
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號:3790306

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