DNA（脫氧核糖核酸）,是生物體遺傳信息的攜帶者。近年的研究發(fā)現(xiàn),帶有遺傳信息的DNA片段的異常表達(dá)與疾病和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。傳統(tǒng)方法檢測(cè)DNA具有操作復(fù)雜、成本高、耗時(shí)長(zhǎng)等局限性。因此,建立一種簡(jiǎn)便、靈敏和特異的DNA定量檢測(cè)新方法具有十分重要的意義。本課題整合莖環(huán)自組裝擴(kuò)增技術(shù)和酶催化信號(hào)放大策略,構(gòu)建了一種簡(jiǎn)單的、等溫的電化學(xué)生物傳感器,實(shí)現(xiàn)了DNA的高靈敏和高特異檢測(cè):首先,靶DNA通過(guò)堿基互補(bǔ)與生物素標(biāo)記的莖環(huán)H1雜交,打開(kāi)H1的莖環(huán)結(jié)構(gòu);隨后,打開(kāi)的莖環(huán)H1與莖環(huán)H2雜交,將靶DNA置換下來(lái),生成H1-H2復(fù)合物;被置換下來(lái)的靶DNA促發(fā)下一輪莖環(huán)自組裝擴(kuò)增反應(yīng),生成大量的H1-H2復(fù)合物;最后,金電極表面固定的捕獲探針與H1-H2復(fù)合物特異性雜交,形成捕獲探針-H1-H2復(fù)合物。金電極表面形成的捕獲探針-H1-H2復(fù)合物上的生物素與鏈霉親和素標(biāo)記的堿性磷酸酶結(jié)合,催化底物α-萘磷酸鈉鹽產(chǎn)生電化學(xué)信號(hào)。為減少莖環(huán)之間的非特異性雜交反應(yīng),本研究在莖環(huán)的呼吸位點(diǎn)處引入錯(cuò)配堿基,降低了背景信號(hào)。在最優(yōu)條件下,所構(gòu)建的電化學(xué)生物傳感器在25 p M-25 n M范圍內(nèi)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 實(shí)驗(yàn)部分
2 結(jié)果與討論
3 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間撰寫(xiě)的文章



本文編號(hào)：3677680