目的:N-甲基-D-天冬氨酸型谷氨酸受體（NMDARs）在突觸前和突觸后膜中均有分布。已有證據(jù)表明,脊髓背角中的NMDA受體GluN2A亞基能夠結(jié)合一種蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatases,PTPs）---SHP1;這種分子間的結(jié)合參與了炎性疼痛的形成。然而,在背根神經(jīng)節(jié)（dorsal root ganglion,DRG）神經(jīng)元中,GluN2A與SHP1的相互作用及其意義尚不清楚。方法:本研究合成一段多肽鏈（簡(jiǎn)稱TAT-pep-GluN2A）,以特異性地阻斷GluN2A/SHP1的分子結(jié)合,探討GluN2A/SHP1在痛覺傳遞和維持過程中的作用;免疫組織化學(xué)法觀察SHP1在DRG神經(jīng)元中的分布;免疫印跡和免疫共沉淀法觀察TAT-pep-GluN2A對(duì)GluN2A/SHP1的結(jié)合能力及對(duì)GluN2A蛋白酪氨酸磷酸化的影響;全細(xì)胞電生理學(xué)技術(shù)記錄脊髓組織片AMPARs-mEPSCs的變化,觀察外周給予TAT-pep-GluN2A對(duì)突觸前興奮性谷氨酸神經(jīng)遞質(zhì)釋放的調(diào)節(jié)作用;動(dòng)物行為學(xué)檢測(cè)TAT-pep-GluN2A對(duì)角叉菜膠（carrageenan）、... 

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞
第一章 前言
    1.1 NMDA受體的生物學(xué)特征
    1.2 NMDA受體的功能及調(diào)節(jié)
    1.3 NMDA受體與疼痛
    1.4 AMPA受體的結(jié)構(gòu)、功能及對(duì)痛覺的調(diào)控
    1.5 蛋白酪氨酸磷酸酶
        1.5.1 蛋白酪氨酸磷酸酶的分類
        1.5.2 SHP1 的結(jié)構(gòu)特征
        1.5.3 SHP1 的功能及其與疾病的關(guān)系
    1.6 假設(shè)
第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與器材
        2.1.3 抗體與多肽
        2.1.4 溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 炎性疼痛模型的建立
        2.2.2 選擇性神經(jīng)損傷模型(SNI)的建立
        2.2.3 背根神經(jīng)節(jié)(DRG)的分離
        2.2.4 免疫組織化學(xué)
        2.2.5 免疫共沉淀與免疫印跡
        2.2.6 電生理記錄
        2.2.7 行為學(xué)測(cè)試
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 SHP1在DRG神經(jīng)元中的分布
    3.2 外周炎性損傷對(duì)SHP1 活性的影響
    3.3 TAT-pep-GluN2A對(duì) DRG神經(jīng)元中GluN2A的調(diào)節(jié)作用
        3.3.1 DRG神經(jīng)元中GluN2A與 SHP1 的相互作用
        3.3.2 TAT-pep-GluN2A對(duì) DRG神經(jīng)元中GluN2A/SHP1 相互作用的影響
        3.3.3 TAT-pep-GluN2A對(duì) GluN2A的酪氨酸磷酸化的影響
    3.4 TAT-pep-GluN2A對(duì)突觸前膜谷氨酸遞質(zhì)釋放的影響
    3.5 TAT-pep-GluN2A對(duì)病理性疼痛的抑制作用
        3.5.1 TAT-pep-GluN2A對(duì)角叉菜膠誘發(fā)的炎性疼痛的影響
        3.5.2 TAT-pep-GluN2A對(duì)完全弗氏佐劑誘發(fā)的炎性疼痛的影響
        3.5.3 TAT-pep-GluN2A對(duì)福爾馬林誘發(fā)的炎性疼痛的影響
        3.5.4 TAT-pep-GluN2A對(duì) SNI誘發(fā)的神經(jīng)病理性疼痛的影響
第四章 討論
    4.1 SHP1 對(duì)痛覺的調(diào)控作用
    4.2 突觸前NMDA受體對(duì)痛覺的調(diào)控作用
    4.3 背根神經(jīng)節(jié)(DRG)在痛覺調(diào)控中的作用
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
在校期間的研究成果
    一、發(fā)表論文
    二、參與課題
致謝



本文編號(hào)：3674371