【目的】1、建立EV71免疫磁珠富集技術(shù)與常規(guī)檢測相結(jié)合的方法,應(yīng)用于患兒周圍環(huán)境標(biāo)本檢測,從環(huán)境標(biāo)本中分離出EV71病毒,為闡析環(huán)境標(biāo)本在EV71傳播中的作用提供確切證據(jù)。2、通過分析分離自不同臨床癥狀的EV71毒株的基因組序列,尋找可能與重癥病例相關(guān)的毒力位點(diǎn)。3、構(gòu)建突變感染性克隆質(zhì)粒,拯救病毒,在細(xì)胞生物學(xué)水平和動(dòng)物水平上對拯救的突變病毒的毒力進(jìn)行驗(yàn)證,確定位點(diǎn)突變對病毒毒力的影響�！痉椒ā�1、制備特異性富集EV71病毒的免疫磁珠,建立對環(huán)境標(biāo)本中的EV71病毒富集和分離的方法,獲得的免疫磁珠-病毒復(fù)合物進(jìn)行RT-PCR、RT-q PCR檢測和病毒分離。陽性標(biāo)本進(jìn)行VP1全長擴(kuò)增及序列測定分析其同源性。2、對40株福建省EV71分離株的的基因組進(jìn)行擴(kuò)增,并從Genbank中下載48株具有明確臨床癥狀的中國其他省份獲得的EV71全基因組序列,對基因組進(jìn)行遺傳進(jìn)化分析;根據(jù)分離株病例的臨床癥狀將其分為重癥和輕癥毒株,比較重癥和輕癥分離株非編碼區(qū)的核苷酸序列及編碼區(qū)的氨基酸序列的變異情況。3、在EV71全長c DNA感染性克隆質(zhì)粒（Nero-pcr-XL-149-08）的基礎(chǔ)上,利用... 

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
主要英文縮寫詞表 中文摘要 英文摘要 前言 第一章
    免疫磁珠富集法對環(huán)境標(biāo)本中EV71檢測的應(yīng)用 引言 材料與方法 結(jié)果 討論 結(jié)論 第二章
    輕重癥患者EV71全基因組序列分析可能的毒力位點(diǎn) 引言 材料與方法 結(jié)果 討論 結(jié)論 第三章
    EV71毒力位點(diǎn)的驗(yàn)證 引言 材料與方法 結(jié)果 討論 結(jié)論 結(jié)語 參考文獻(xiàn) 課題綜述 參考文獻(xiàn) 致謝



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