目的:為更好的評價冠心病的發(fā)病風險,選取系統(tǒng)炎癥和氧化應激標志物髓過氧化物酶（myelopexoxidase,MPO）作為研究對象,建立人血中MPO的熒光免疫層析定量檢測方法,為臨床早期篩查及輔助診斷冠心病提供一種靈敏度高,特異性好,操作簡便的快速檢測方法。方法:1.利用生物信息學技術分析MPO蛋白B細胞表位,篩選兩條特異性的MPO多肽序列（A、B）,合成該多肽,采用碳二亞胺法分別與BSA、OVA偶聯(lián)制備多肽偶聯(lián)物,透析后對多肽偶聯(lián)物進行紫外光譜掃描法及SDS-PAGE鑒定。2.利用上述制備的MPO（A）-BSA和MPO（B）-BSA多肽偶聯(lián)物分別免疫小鼠,經(jīng)細胞融合、克隆化、亞型鑒定、小鼠腹腔誘生及蛋白純化等過程制備MPO單克隆抗體。3.利用熒光免疫層析技術,對原材料及工藝條件進行優(yōu)化研究,對線性范圍、靈敏度、精密性等功能性指標進行評價研究,初步建立MPO熒光免疫層析定量檢測方法。結果:1.成功制備了MPO（A）-BSA、MPO（B）-BSA和MPO（A）-OVA、MPO（B）-OVA多肽偶聯(lián)物。2.篩選出6株IgG1亞型的陽性細胞株,并制備6株單克隆抗體,其編號分別為:2A1,3C... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

EDC偶聯(lián)原理

試紙條判斷結果

MPO多肽-BSA和BSA的紫外光譜圖

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3406099