發(fā)布時間：2021-09-01 13:57

　　大腸桿菌在自然界中分布廣泛,主要分為非致病及致病型大腸桿菌。典型的致病型大腸桿菌為Escherichia coli O157:H7,一旦感染了此菌,可對人們造成嚴重危害。傳統(tǒng)大腸桿菌檢測方法,存在檢測耗時長、所需儀器復雜、對檢測人員要求高,成本高。因此,建立大腸桿菌的新型快速、簡便的檢測方法具有重要意義。近年來,由于分子生物學的高速發(fā)展,帶動了新型病原菌檢測方法的革新,為其提供了更多方便快捷、靈敏特異的檢測手段。其中顯色及試紙條作為生物監(jiān)測領域常見的信號輸出方式,具有裸眼可視、方便讀取等諸多優(yōu)點。因此,本研究基于免疫層析試紙條及顯色反應,結(jié)合不同分子生物學檢測技術,成功建立了以下方法:（1）基于雙鏈特異性核酸酶及雜交鏈式反應結(jié)合免疫層析試紙條用于大腸桿菌的可視化檢測本研究基于雙鏈特異性核酸酶（Duplex Specific Nuclease,DSN）及雜交鏈式反應（Hybridization Chain Reaction,HCR）,成功建立了一種簡單、快速、靈敏特異的新型大腸桿菌檢測方法。檢測原理為,利用DSN酶的只切DNA-RNA雙鏈核酸中的DNA鏈,保留RNA鏈的特性,反復利用檢測... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

鏈置換反應結(jié)合電化學信號檢測方法原理圖

1-1 鏈置換反應結(jié)合電化學信號檢測方法原理圖gram of chain displacement reaction combined withdetection method光法的檢測方法n 等人運用鏈置換技術結(jié)合熒光法，成功檢測了特異性較好[38]。原理如圖 1-2 所示，a 作為檢測會成功的被靶標核酸打開，被打開的短鏈核酸會的探針結(jié)合，導致熒光基團的猝滅，發(fā)生信號的測靶標核酸。

1-3 鏈置換反應結(jié)合色度法的檢測原理圖[am of chain displacement reaction combined w的優(yōu)勢理為：利用人工設計的核酸引物間的競爭能酸片段被競爭能力相對較強的核酸片段被替酸反應相比，鏈置換反應可將 RNA 信號直程，達到信號傳遞的作用。同時，鏈置換反如此多的優(yōu)點，近年來，已被不同領域所應。ybridization Chain Reaction, HCR）技術的應bridization Chain Reaction，HCR）是 Dirks常溫即可進行，無需傳統(tǒng) PCR 的變溫過程

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Simultaneous Detection of 13 Key Bacterial Respiratory Pathogens by Combination of Multiplex PCR and Capillary Electrophoresis[J]. JIANG Lu Xi,REN Hong Yu,ZHOU Hai Jian,ZHAO Si Hong,HOU Bo Yan,YAN Jian Ping,QIN Tian,CHEN Yu.  Biomedical and Environmental Sciences. 2017(08)
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本文編號：3377103