沙門氏菌作為一種常見的人畜共患的革蘭氏陰性致病菌,高頻率地在全世界多個地區(qū)爆發(fā)。鼠傷寒沙門氏菌作為致病率最高的病原菌之一,常通過飲食進入體內(nèi),與胃腸道中的微生物菌落競爭營養(yǎng)以及生活空間,從而打破土著微生物穩(wěn)定的生存模式,引起一系列的沙門氏菌中毒癥狀。為了降低鼠傷寒沙門氏菌感染病的爆發(fā)率,減少各國的經(jīng)濟損失,本試驗以鼠傷寒沙門氏菌的16S r DNA/r RNA為研究對象,結合核酸修飾技術和核酸檢測試紙條（Nucleic Acid Strip,NAS）實現(xiàn)鼠傷寒沙門氏菌的便攜式和可視化檢測。研究內(nèi)容如下:PCR核酸修飾技術結合核酸檢測試紙條對鼠傷寒沙門氏菌16S r DNA的可視化檢測。生物素-d UTP（Biotin-d UTP）將“Natural d NTP”轉(zhuǎn)換為“Biotin d NTP”,以沙門氏菌16S r DNA為模板,將生物素-三磷酸堿基脫氧核苷酸（Biotin d NTP）摻入DNA鏈中,使每個雙鏈DNA分子攜帶多個生物素分子。除此之外,上游引物的5’修飾了羧基熒光素（FAM）,因此,產(chǎn)生的每條雙鏈DNA都攜帶一個分子的FAM且雙鏈上攜帶多個生物素分子,使用NAS進行可... 

【文章來源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學黑龍江省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

LAMP原理圖（引用）

圖 1-1 LAMP 原理圖（引用）Fig1-1 Schematic illustration of LAMP (Reference)增（hybridization chain reactions，HCR）是一種核酸74]首次提出并設計了一對具有頸環(huán)結構的探針 Hairpin 異性啟動發(fā)夾結構探針 Hairpin 1 和 Hairpin 2，并不斷組g Chen 等[76]利用雜交鏈式等溫擴增技術與電化學方法 pM。

科學研究的進步，專家根據(jù)酶與脫氧核苷三磷酸的相互作用，將研究需要官能團直接引入核酸中，省去了商業(yè)化核酸修飾的時間和費用，使核酸修種簡單、方便的生物學工具而應用于現(xiàn)代生物分子學研究中[78]。官能團或者生物受體的 dNTP 借助酶促聚合作用，將修飾物引入雙鏈 DN的修飾物有氨基、巰基[80]、疊氮基團[81]和生物素[82]等。2015 年 Dajie Lin生物素的 dATP 與納米磁珠聯(lián)用，對待檢測蛋白進行信號放大，借助電化學大的核酸產(chǎn)物進行檢測，經(jīng)過驗證發(fā)現(xiàn)此技術對甲胎蛋白的檢測限為 2016 年 Xiaomei Ren 等人[84]利用外切酶的消化和鏈霉親和素磁珠的分了 N3-dUTP 和 BCN 染料對 DNA 的雙色熒光標記，此方法作為一種簡色法，在生物研究領域存在潛在的發(fā)展前景。2017 年，Mayreli Ortiz 等[85氧酸鹽（Deoxynucleotide Triphosphates, POM）的 dNTP 對耶爾森氏菌ia pestis）特異性 DNA 進行信號擴增，并結合電化學生物器完成生物檢測，OM 是一種熱穩(wěn)定、靈敏和酶兼容的氧化還原分子。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[2]高特異性碳納米生物傳感器快速檢測沙門氏菌的研究[D]. 寧毅.湖南師范大學 2014

碩士論文
[1]基于納米金標記的沙門氏菌檢測方法研究[D]. 宋靚婧.江南大學 2014



本文編號：3366893