趨磁細(xì)菌磁小體靶向輸送pHSP70-shPLK1/阿霉素復(fù)合物治療骨肉瘤
發(fā)布時(shí)間:2021-08-25 09:46
背景:在外加變化磁場作用下,磁小體可侵入腫瘤細(xì)胞,抑制其增殖。目的:研究趨磁細(xì)菌磁小體靶向輸送pHSP70-shPLK1/阿霉素復(fù)合物治療骨肉瘤的效果。方法:將人源骨肉瘤細(xì)胞株U2OS分4組培養(yǎng),A組加入趨磁細(xì)菌磁小體載pHSP70-shPLK1/阿霉素復(fù)合物系統(tǒng);B組加入趨磁細(xì)菌磁小體載pHSP-shNC/阿霉素復(fù)合物系統(tǒng);C組加入趨磁細(xì)菌磁小體載pHSP70-shPLK1/阿霉素復(fù)合物系統(tǒng),同時(shí)給予磁場干預(yù);D組加入趨磁細(xì)菌磁小體載pHSP-shNC/阿霉素復(fù)合物系統(tǒng),同時(shí)給予磁場干預(yù);pHSP-shNC為pHSP70-shPLK1的空白對照。培養(yǎng)12,24,48,72h,觀察骨肉瘤細(xì)胞對復(fù)合物的攝取率,流式細(xì)胞術(shù)觀察細(xì)胞周期,RT-PCR法和Westernblot法檢測細(xì)胞中PLK1mRNA和蛋白表達(dá)水平,MTT法檢測細(xì)胞增殖,黏附實(shí)驗(yàn)和Transwell小室檢測細(xì)胞黏附性和侵襲能力,凋亡試劑盒檢測細(xì)胞凋亡率。結(jié)果與結(jié)論:(1)培養(yǎng)12,24h,D組攝取率最高;培養(yǎng)48,72h,B組攝取率最高;(2)A組、C組和D組G2/M期比率逐漸降低,G0
【文章來源】:中國組織工程研究. 2017,21(18)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞周期
伲??庵鸞ゼ躒酰虎贐組:培養(yǎng)12h時(shí),細(xì)胞形態(tài)相對較完整,內(nèi)可見多個(gè)細(xì)胞核,核仁大明顯,微絨毛和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富,染色質(zhì)分布較均勻,凋亡相對較少,熒光較強(qiáng);培養(yǎng)24,48,72h時(shí),細(xì)胞形態(tài)較完整,熒光逐漸增強(qiáng);③D組:培養(yǎng)12,24h時(shí),細(xì)胞形態(tài)不完整,凋亡較多,熒光較強(qiáng);培養(yǎng)48,72h時(shí),細(xì)胞形態(tài)不完整,凋亡逐漸減少,熒光逐漸減弱。2.2各組細(xì)胞周期的比較A組、C組和D組G2/M期比率逐漸降低,G0/G1期比率逐漸增加;C組G2/M期比率各時(shí)間點(diǎn)最低,其次為D組,A組最高;B組G2/M期比率逐漸增加,見圖1。培養(yǎng)12h時(shí),G2/M期比率除了A組與D組、B組與D組比較無差異外,其余組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05);G0/G1期比率除了A組與D組比較無差異外,其余組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。培養(yǎng)24,48,72h時(shí),G2/M期、G0/G1期比率組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。2.3各組細(xì)胞中PLK1mRNA和蛋白表達(dá)水平的比較B組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)水平隨時(shí)間延長逐漸增加;D組24h達(dá)峰值,48h逐漸回落;A組和C組12h達(dá)峰值,24h逐漸回落。培養(yǎng)12h時(shí),B組、D組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于A組、C組(P<0.05),A組高于C組(P<0.05),B組與D組比較無差異。培養(yǎng)24h時(shí),B組、D組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于A組、C組(P<0.05),B組與D組比較無差異,A組高于C組(P<0.05)。培養(yǎng)48,72h時(shí),B組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于D組、A組、C組(P<0.05),D組高于A組、C組(P<0.05),A組高于C組(P<0.05),見表2。2.4各組細(xì)胞增殖的比較B組增殖隨時(shí)間延長逐漸增加;D組24h達(dá)峰值,48h逐漸回落;A組和C組12h達(dá)峰值,24h逐漸回落。培養(yǎng)12h時(shí),A組、B組、D組細(xì)胞增殖高于C組(P<0.05),A組、B組、D組間比較無差異。培養(yǎng)24,48
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)菌磁小體作為新型非病毒載體用于腫瘤基因治療的研究進(jìn)展[J]. 王熙,耿圓圓,侯薔,李智麗,王吉貴,姜偉,劉維全. 腫瘤學(xué)雜志. 2016(04)
[2]基于趨磁細(xì)菌磁小體的新型主動(dòng)靶向線粒體的MR雙功能探針制備[J]. 張薇薇,許乙凱,劉瑞源. 中華放射學(xué)雜志. 2014 (06)
[3]靶向磁性熱療對小鼠結(jié)腸癌皮下移植模型作用的觀察[J]. 尹燕鷹,顧寧,洪敏,高嫦娥,陳明清,董堅(jiān). 中華腫瘤防治雜志. 2013(04)
本文編號(hào):3361885
【文章來源】:中國組織工程研究. 2017,21(18)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞周期
伲??庵鸞ゼ躒酰虎贐組:培養(yǎng)12h時(shí),細(xì)胞形態(tài)相對較完整,內(nèi)可見多個(gè)細(xì)胞核,核仁大明顯,微絨毛和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富,染色質(zhì)分布較均勻,凋亡相對較少,熒光較強(qiáng);培養(yǎng)24,48,72h時(shí),細(xì)胞形態(tài)較完整,熒光逐漸增強(qiáng);③D組:培養(yǎng)12,24h時(shí),細(xì)胞形態(tài)不完整,凋亡較多,熒光較強(qiáng);培養(yǎng)48,72h時(shí),細(xì)胞形態(tài)不完整,凋亡逐漸減少,熒光逐漸減弱。2.2各組細(xì)胞周期的比較A組、C組和D組G2/M期比率逐漸降低,G0/G1期比率逐漸增加;C組G2/M期比率各時(shí)間點(diǎn)最低,其次為D組,A組最高;B組G2/M期比率逐漸增加,見圖1。培養(yǎng)12h時(shí),G2/M期比率除了A組與D組、B組與D組比較無差異外,其余組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05);G0/G1期比率除了A組與D組比較無差異外,其余組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。培養(yǎng)24,48,72h時(shí),G2/M期、G0/G1期比率組間兩兩比較差異均有顯著性意義(P<0.05)。2.3各組細(xì)胞中PLK1mRNA和蛋白表達(dá)水平的比較B組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)水平隨時(shí)間延長逐漸增加;D組24h達(dá)峰值,48h逐漸回落;A組和C組12h達(dá)峰值,24h逐漸回落。培養(yǎng)12h時(shí),B組、D組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于A組、C組(P<0.05),A組高于C組(P<0.05),B組與D組比較無差異。培養(yǎng)24h時(shí),B組、D組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于A組、C組(P<0.05),B組與D組比較無差異,A組高于C組(P<0.05)。培養(yǎng)48,72h時(shí),B組PLK1mRNA和蛋白表達(dá)高于D組、A組、C組(P<0.05),D組高于A組、C組(P<0.05),A組高于C組(P<0.05),見表2。2.4各組細(xì)胞增殖的比較B組增殖隨時(shí)間延長逐漸增加;D組24h達(dá)峰值,48h逐漸回落;A組和C組12h達(dá)峰值,24h逐漸回落。培養(yǎng)12h時(shí),A組、B組、D組細(xì)胞增殖高于C組(P<0.05),A組、B組、D組間比較無差異。培養(yǎng)24,48
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)菌磁小體作為新型非病毒載體用于腫瘤基因治療的研究進(jìn)展[J]. 王熙,耿圓圓,侯薔,李智麗,王吉貴,姜偉,劉維全. 腫瘤學(xué)雜志. 2016(04)
[2]基于趨磁細(xì)菌磁小體的新型主動(dòng)靶向線粒體的MR雙功能探針制備[J]. 張薇薇,許乙凱,劉瑞源. 中華放射學(xué)雜志. 2014 (06)
[3]靶向磁性熱療對小鼠結(jié)腸癌皮下移植模型作用的觀察[J]. 尹燕鷹,顧寧,洪敏,高嫦娥,陳明清,董堅(jiān). 中華腫瘤防治雜志. 2013(04)
本文編號(hào):3361885
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