目的:探討前列腺素E2特異性受體激動(dòng)劑4（EP4A）促進(jìn)人CD34⁺細(xì)胞體外增殖的可能信號(hào)途徑。方法:收集中山一院血液科20例健康供者經(jīng)G-CSF動(dòng)員后的外周血造血干細(xì)胞采集物。應(yīng)用免疫磁珠法分選出人CD34⁺細(xì)胞,應(yīng)用CCK8法明確EP4A促進(jìn)人CD34⁺細(xì)胞體外增殖的最佳條件（最佳濃度和最佳作用時(shí)間）;在此條件下EP4A作用于人CD34⁺細(xì)胞后,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測(cè)β-catenin mRNA水平的變化、Western blot檢測(cè)β-catenin和P-GSK-3β蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:EP4A 10μmol/L、在培養(yǎng)72 h能明顯促進(jìn)人CD34⁺細(xì)胞體外增殖,增殖率為對(duì)照組的1.36倍（P=0.002）。最佳條件EP4A作用于人CD34⁺細(xì)胞后,β-catenin mRNA及其蛋白的表達(dá)增高,GSK-3β蛋白的磷酸化增加,而這些作用均可被相應(yīng)的抑制劑（EP4AA）所拮抗。結(jié)論:EP4A可通過(guò)激活Wnt/β-catenin信號(hào)途... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2017,25(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    試劑與儀器
    人CD34+細(xì)胞磁珠分選
    人CD34+細(xì)胞PGE2四個(gè)亞受體表達(dá)的qRT-PCR檢測(cè)
    人CD34+細(xì)胞的藥物處理方法
    EP4A作用后人CD34+細(xì)胞β-catenin和p-GSK-3β蛋白表達(dá)的Western blot檢測(cè)
    統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    人CD34+細(xì)胞的分選與鑒定
    人CD34+細(xì)胞主要表達(dá)EP2和EP4受體
    EP4A促進(jìn)人CD34+細(xì)胞增殖的最佳濃度和最佳時(shí)間
    EP4A提高人CD34+細(xì)胞β-catenin mRNA和蛋白的表達(dá)及增加GSK-3β的磷酸化
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]前列腺素E2體外主要通過(guò)活化受體EP4促進(jìn)人CD34+細(xì)胞增殖[J]. 唐晶,蘇暢,賴淑萍,戚永磊,馮春,鄒外一,陳惠珍,王荷花,許多榮.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2015(06)
[2]前列腺素E2體外可促進(jìn)人CD34+細(xì)胞增殖[J]. 賴淑萍,戚永磊,許多榮.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2013(01)
[3]Wnt3a基因修飾減輕阿糖胞苷誘導(dǎo)的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞損傷的體外研究[J]. 魯光,李振宇,牟偉偉,何徐彭,潘秀英,徐開(kāi)林.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2011(04)



本文編號(hào)：3326086