不動(dòng)桿菌屬分子生物學(xué)菌種鑒定技術(shù)及其臨床應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間：2021-01-23 11:04
目的:探索建立可對(duì)不動(dòng)桿菌屬臨床分離株進(jìn)行準(zhǔn)確菌種鑒定的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù),揭示非鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株的種屬分布狀態(tài)、臨床流行情況和耐藥性,為開展不動(dòng)桿菌屬的臨床防治和流行病學(xué)研究提供可靠的檢測(cè)手段。方法:收集2017年1月至2017年12月深圳地區(qū)醫(yī)院住院患者各類標(biāo)本通過理化方法分離出的不動(dòng)桿菌共268株,采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)（Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-time Of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS）和bla OXA-51-like基因片段擴(kuò)增篩查鮑曼不動(dòng)桿菌、多重PCR擴(kuò)增gyr B基因鑒定鮑曼不動(dòng)桿菌復(fù)合體、PCR擴(kuò)增rpo B、gyr B相關(guān)基因片段及其測(cè)序分析鑒定非鮑曼不動(dòng)桿菌種屬,結(jié)合臨床病例資料揭示非鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株的種屬分布特征、季節(jié)流行狀態(tài)和耐藥性。結(jié)果:1、采用MALDI-TOF MS和bla OXA-51-like基因兩種方法鑒定268株不動(dòng)桿菌,98.89%（265/268）的鑒定結(jié)果一致;其中228株為鮑曼不動(dòng)桿菌,37株為...
【文章來源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
深圳市地區(qū)各臨床科室不動(dòng)桿菌分布圖
深圳市地區(qū)不動(dòng)桿菌分離標(biāo)本及所占比例
圖 2.4 編號(hào) A36 標(biāo)本復(fù)蘇DI-TOF MS 自動(dòng)鑒定菌種-TOF MS 自動(dòng)鑒定菌種的原理為：由于不同病原體的核糖異性，將其解離后可產(chǎn)生不同片段大小物質(zhì)，在磁場(chǎng)作用，通過信號(hào)輸出產(chǎn)生特異性峰譜，將其特異性峰譜與數(shù)據(jù)從而進(jìn)行鑒定，圖譜最相近所得分值最高者為最終鑒定菌：號(hào)與其在 MALDI 靶位上相應(yīng)的樣本位置確認(rèn)并記錄。菌接種環(huán)，用其尖端沾取血平板中單個(gè)菌落的少量菌種，LDI 靶板上。樣本的 MALDI 靶位與所有樣本跟蹤方案相對(duì)應(yīng)。D HCCA 基質(zhì)溶液仔細(xì)涂敷在每個(gè)樣本上（注意：樣本晾
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2005-2014年CHINET中國(guó)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)5種重要臨床分離菌的耐藥性變遷[J]. 胡付品,F.-P.Hu,Y.Guo,D.-M.Zhu,F.Wang,X.-F.Jiang,Y.-C.Xu,X.-J.Zhang,C.-X.Zhang,P.Ji,Y.Xie,M.Kang,C.-Q.Wang,A.-M.Wang,Y.-H.Xu,J.-L.Shen,Z.-Y.Sun,Z.-J.Chen,Y.-X.Ni,J.-Y.Sun,Y.-Z.Chu,S.-F.Tian,Z.-D.Hu,J.-Li,Y.-S.Yu,J.Lin,B.Shan,Y.Du,Y.Han,S.Guo,L.-H.Wei,L.Wu,H.Zhang,J.Kong,Y.-J.Hu,X.-M.Ai,C.Zhuo,D.-H.Su,Q.Yang,B.Jia,W.Huang. 中國(guó)感染與化療雜志. 2017(01)
[2]鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多黏菌素產(chǎn)生耐藥的多樣性[J]. 陳佳容,邵雷,張駿梁,陳代杰. 中國(guó)抗生素雜志. 2016(12)
[3]鮑曼不動(dòng)桿菌外膜蛋白與亞胺培南耐藥性的研究進(jìn)展[J]. 楊杰,多麗波. 中國(guó)抗生素雜志. 2016(12)
[4]基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)臨床常見細(xì)菌和酵母菌的鑒定能力評(píng)價(jià)[J]. 嚴(yán)立,徐繡宇,張莉萍. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2015(02)
[5]16S rRNA基因序列分析法鑒定病原細(xì)菌[J]. 朱飛舟,陳利玉,陳漢春. 中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(10)
[6]促旋酶（gyrase）B亞單位基因gyrB在鑒別細(xì)菌近緣種中的應(yīng)用[J]. 李獻(xiàn)梅,王小芬,楊洪巖,高秀芝,崔宗均. 微生物學(xué)報(bào). 2008(05)
碩士論文
[1]碳青霉烯耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多粘菌素B耐藥機(jī)制研究[D]. 蔣顏.浙江大學(xué) 2010
本文編號(hào)：2995107
【文章來源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁數(shù)】：73 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
深圳市地區(qū)各臨床科室不動(dòng)桿菌分布圖
深圳市地區(qū)不動(dòng)桿菌分離標(biāo)本及所占比例
圖 2.4 編號(hào) A36 標(biāo)本復(fù)蘇DI-TOF MS 自動(dòng)鑒定菌種-TOF MS 自動(dòng)鑒定菌種的原理為：由于不同病原體的核糖異性，將其解離后可產(chǎn)生不同片段大小物質(zhì)，在磁場(chǎng)作用，通過信號(hào)輸出產(chǎn)生特異性峰譜，將其特異性峰譜與數(shù)據(jù)從而進(jìn)行鑒定，圖譜最相近所得分值最高者為最終鑒定菌：號(hào)與其在 MALDI 靶位上相應(yīng)的樣本位置確認(rèn)并記錄。菌接種環(huán)，用其尖端沾取血平板中單個(gè)菌落的少量菌種，LDI 靶板上。樣本的 MALDI 靶位與所有樣本跟蹤方案相對(duì)應(yīng)。D HCCA 基質(zhì)溶液仔細(xì)涂敷在每個(gè)樣本上（注意：樣本晾
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2005-2014年CHINET中國(guó)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)5種重要臨床分離菌的耐藥性變遷[J]. 胡付品,F.-P.Hu,Y.Guo,D.-M.Zhu,F.Wang,X.-F.Jiang,Y.-C.Xu,X.-J.Zhang,C.-X.Zhang,P.Ji,Y.Xie,M.Kang,C.-Q.Wang,A.-M.Wang,Y.-H.Xu,J.-L.Shen,Z.-Y.Sun,Z.-J.Chen,Y.-X.Ni,J.-Y.Sun,Y.-Z.Chu,S.-F.Tian,Z.-D.Hu,J.-Li,Y.-S.Yu,J.Lin,B.Shan,Y.Du,Y.Han,S.Guo,L.-H.Wei,L.Wu,H.Zhang,J.Kong,Y.-J.Hu,X.-M.Ai,C.Zhuo,D.-H.Su,Q.Yang,B.Jia,W.Huang. 中國(guó)感染與化療雜志. 2017(01)
[2]鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多黏菌素產(chǎn)生耐藥的多樣性[J]. 陳佳容,邵雷,張駿梁,陳代杰. 中國(guó)抗生素雜志. 2016(12)
[3]鮑曼不動(dòng)桿菌外膜蛋白與亞胺培南耐藥性的研究進(jìn)展[J]. 楊杰,多麗波. 中國(guó)抗生素雜志. 2016(12)
[4]基質(zhì)輔助激光解析/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)臨床常見細(xì)菌和酵母菌的鑒定能力評(píng)價(jià)[J]. 嚴(yán)立,徐繡宇,張莉萍. 生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2015(02)
[5]16S rRNA基因序列分析法鑒定病原細(xì)菌[J]. 朱飛舟,陳利玉,陳漢春. 中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(10)
[6]促旋酶（gyrase）B亞單位基因gyrB在鑒別細(xì)菌近緣種中的應(yīng)用[J]. 李獻(xiàn)梅,王小芬,楊洪巖,高秀芝,崔宗均. 微生物學(xué)報(bào). 2008(05)
碩士論文
[1]碳青霉烯耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多粘菌素B耐藥機(jī)制研究[D]. 蔣顏.浙江大學(xué) 2010
本文編號(hào)：2995107
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