目的建立人類白細胞抗原B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品。方法采集HLAB5801/5701/1502陽性和陰性志愿者的新鮮外周血,經(jīng)EB病毒轉化,培養(yǎng)建立永生化細胞系。細胞擴增培養(yǎng),提取基因組DNA,制備成國家參考品并經(jīng)高通量測序驗證。4家協(xié)作標定單位采用熒光PCR法、高通量測序（NGS）、基因測序分型（SBT測序法）對國家參考品進行定值,并進行國家參考品的復溶（在-20℃and 20～25℃之間反復凍融3次）穩(wěn)定性和均勻性研究。結果 HLA-B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品成功制備,包含5例HLA-B5801陽性、3例HLA-B5701陽性、3例HLA-B1502陽性和9例陰性樣本。該參考品定值準確,均勻性結果一致,參考品復溶3次后仍然穩(wěn)定。結論人類白細胞抗原B5801/5701/1502核酸檢測國家參考品的各項指標均符合要求,可用于HLA-B5801核酸檢測試劑盒、HLA-B5701核酸檢測試劑盒、HLA-B1502核酸檢測試劑盒的性能評價。 

【文章來源】：分子診斷與治療雜志. 2020年09期 第1137-1141頁

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 試劑
        1.1.2 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 樣本收集
        1.2.2 細胞系基因組DNA提取、質檢及定量
        1.2.3 國家參考品的制備與驗證
        1.2.4 國家參考品的協(xié)作標定
        1.2.5 國家參考品穩(wěn)定性和均勻性驗證
2 結果
    2.1 國家參考品的制備及驗證
    2.2 國家參考品的協(xié)作標定
    2.3 國家參考品的穩(wěn)定性和均勻性驗證
3 討論



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