本文關(guān)鍵詞：過(guò)氧亞硝基陰離子在膿毒癥心肌細(xì)胞促炎癥轉(zhuǎn)變中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討過(guò)氧亞硝基陰離子(Peroxynitrite,ONOO-)在膿毒癥(Sepsis)心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榇傺装Y狀態(tài)中的作用。方法動(dòng)物研究實(shí)驗(yàn)中取12只SD大鼠(3~4月齡,200~250g,雌雄不拘),隨機(jī)分為3組(n=4)。以3mg/g的劑量向大鼠腹腔注射大鼠盲腸內(nèi)容物(180mg/ml)誘導(dǎo)大鼠腹膜炎(Feces Induced Peritonitis,FIP)作為膿毒癥大鼠模型作為FIP組;對(duì)照組大鼠注射同等體積的生理鹽水;接受過(guò)氧亞硝基陰離子的分解劑(Fe-TPPS,10mg/kg,ip)預(yù)處理1h后再經(jīng)腹腔注射相應(yīng)劑量的盲腸內(nèi)容物作為Fe-TPPS+FIP組。6小時(shí)后取各組大鼠心室游離壁制作病理切片,并在Olympus顯微鏡下觀察心肌間質(zhì)中心粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度;同時(shí)取各組心尖組織采用ELISA技術(shù)檢測(cè)心肌組織髓過(guò)氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)的活性;并收集對(duì)照組、FIP組大鼠血漿用于刺激心肌細(xì)胞。細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)中采用健康的SD乳鼠(日齡1~3d,雌雄不拘)心臟分離培養(yǎng)心肌細(xì)胞,分別經(jīng)對(duì)照組、FIP組大鼠血漿刺激心肌細(xì)胞,使用ELISA、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞內(nèi)ONOO-生成的標(biāo)志物硝基酪氨酸(3-Nitrotyrosine,3-NT)、脂多糖誘導(dǎo)趨化因子(LPS-induced CXC Chemkine,LIX)及角質(zhì)細(xì)胞起源趨化因子(Keratinocyte-derived Chemkine,KC)的表達(dá)情況。結(jié)果膿毒癥大鼠心肌組織較對(duì)照組MPO活性升高,且心肌組織間隙炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)增加;膿毒癥血漿刺激心肌細(xì)胞導(dǎo)致其ONOO-產(chǎn)生增加,心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榇傺装Y狀態(tài),趨化因子LIX、KC表達(dá)增加;用過(guò)氧亞硝基陰離子分解劑(Fe-TPPS,5,10,15,20-四磺酸基苯基-鐵卟啉)預(yù)處理后,心肌組織較FIP組MPO活性顯著降低、心肌組織間隙炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減輕;心肌細(xì)胞內(nèi)ONOO-減少,趨化因子LIX、KC表達(dá)降低。結(jié)論過(guò)氧亞硝基陰離子在膿毒癥心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)中起重要作用。
【關(guān)鍵詞】：膿毒癥 過(guò)氧亞硝基陰離子 促炎癥狀態(tài) 心肌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R459.7
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 英文縮寫(xiě)10-11
• 第一章 緒論11-18
• 1.1 膿毒癥概述11-16
• 1.1.1 膿毒癥概念11
• 1.1.2 膿毒癥致心肌損傷的發(fā)病機(jī)制11-14
• 1.1.3 膿毒癥致心肌損傷的診斷與治療14-16
• 1.2 過(guò)氧亞硝酸鹽在膿毒癥心肌損傷中的研究現(xiàn)狀16
• 1.2.1 一氧化氮16
• 1.2.2 氧自由基16
• 1.2.3 過(guò)氧亞硝酸鹽16
• 1.2.4 小結(jié)16
• 1.3 Fe-TPPS的性質(zhì)及作用16-17
• 1.4 研究目的、內(nèi)容17-18
• 1.4.1 研究目的17
• 1.4.2 研究?jī)?nèi)容17-18
• 第二章 SD新生鼠CM的原代培養(yǎng)18-23
• 2.1 材料18-19
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑18
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器18-19
• 2.1.4 溶液配制19
• 2.2 方法19-20
• 2.2.1 心肌細(xì)胞的分離、培養(yǎng)19-20
• 2.2.2 心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察20
• 2.3 結(jié)果20-21
• 2.3.1 心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察20-21
• 2.4 討論21-22
• 2.5 小結(jié)22-23
• 第三章 大鼠膿毒癥模型制備及血漿提取23-26
• 3.1 材料23-24
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑23
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器23
• 3.1.4 溶液配制23-24
• 3.2 方法24-25
• 3.2.1 大鼠膿毒癥模型制備24
• 3.2.2 血漿的提取24-25
• 3.3 討論25-26
• 第四章 心肌細(xì)胞ONOO-的測(cè)定26-31
• 4.1 材料26-29
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物26
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑26
• 4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器26-28
• 4.1.4 溶液配制28-29
• 4.2 方法29
• 4.2.1 血漿的提取29
• 4.2.2 心肌細(xì)胞的分離、培養(yǎng)29
• 4.2.3 實(shí)驗(yàn)分組及處理29
• 4.2.4 3-NT標(biāo)本的提取29
• 4.2.5 ELISA法檢測(cè) 3-NT29
• 4.3 結(jié)果29-30
• 4.4 結(jié)論30-31
• 第五章 心肌細(xì)胞趨化因子表達(dá)測(cè)定31-41
• 5.1 材料31-34
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物31
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑31-32
• 5.1.3 實(shí)驗(yàn)器材32-33
• 5.1.4 溶液配制33-34
• 5.2 方法34-37
• 5.2.1 血漿的提取34
• 5.2.2 心肌細(xì)胞的分離、培養(yǎng)34
• 5.2.3 RT-PCR法檢測(cè)心肌細(xì)胞趨化因子（LIX、KC）mRNA的表達(dá)34-36
• 5.2.4 ELISA法檢測(cè)心肌細(xì)胞趨化因子（LIX、KC）蛋白的釋放36-37
• 5.3 統(tǒng)計(jì)分析37-38
• 5.4 結(jié)果38-39
• 5.4.1 趨化因子LIX、KC時(shí)間點(diǎn)的測(cè)定38
• 5.4.2 抑制ONOO-對(duì)趨化因子的影響38-39
• 5.5 結(jié)論39-40
• 5.6 討論40-41
• 第六章 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中膿毒癥心肌組織炎癥狀態(tài)的評(píng)估41-48
• 6.1 材料41-42
• 6.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物41
• 6.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑41
• 6.1.3 實(shí)驗(yàn)器材41-42
• 6.1.4 溶液配制42
• 6.2 方法42-43
• 6.2.1 提取心肌組織標(biāo)本42
• 6.2.2 病理切片制作步驟42-43
• 6.2.3 ELISA檢測(cè)心肌組織MPO活性43
• 6.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析43-44
• 6.4 結(jié)果44-45
• 6.5 結(jié)論45-46
• 6.6 討論46-48
• 第七章 主要結(jié)論和展望48-50
• 7.1 主要結(jié)論48
• 7.2 展望48-50
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文54-55
• 致謝55

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