放射治療是癌癥患者的主要治療方法之一。人類非小細(xì)胞肺癌腫瘤對(duì)輻射的抵抗是NSCLC治療的重要挑戰(zhàn)。而且,可傳送到腫瘤的輻射劑量又受到輻射對(duì)周圍健康組織附帶損害的限制。所以非常有必要尋找一個(gè)有效的輻射增敏劑。近年來(lái),研究人員開(kāi)發(fā)了一種新型釓基納米顆粒治療診斷劑(AGuIX(?)),用于MRI引導(dǎo)的放射治療(RT),并已被證明可作為有效的輻射增敏劑。已經(jīng)確定的是AGuIX納米顆粒是由于輻射誘導(dǎo)下低能光電子和俄歇電子的激發(fā)以及相互作用而放大了輻射效應(yīng)。在人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1299中,我們證明了 AGuIX納米顆粒加劇了輻射誘導(dǎo)的DNA DSBs損傷并減少了 DNA修復(fù)。在H1299異種移植瘤裸鼠模型中,我們觀察到在放射治療前預(yù)處理AGuIX納米顆粒顯著加劇了腫瘤細(xì)胞損傷以及明顯的生長(zhǎng)抑制。我們的研究為發(fā)現(xiàn)AGuIX納米顆粒的放射增敏機(jī)制奠定了基礎(chǔ),為AGuIX納米顆粒作為放射增敏藥物提供了科學(xué)依據(jù)。目的:明確AGuIX納米顆粒在體內(nèi)外對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1299的輻射增敏作用;初步探究AGuIX納米顆粒的輻射增敏機(jī)制。方法:將細(xì)胞分為以下四組:對(duì)照組,AGuIX納米顆粒組,輻射組和AGuIX納米顆粒聯(lián)合輻射組。通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡,從而觀察AGuIX納米顆粒對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1299的輻射增敏作用。流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期觀察AGuIX納米顆粒對(duì)H1299細(xì)胞周期的影響。免疫熒光實(shí)驗(yàn)和彗星實(shí)驗(yàn)觀察AGuIX納米顆粒對(duì)H1299細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)的影響。此外,我們使用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)DNA損傷修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,我們?cè)诓煌幚斫M的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1299荷瘤裸鼠中觀察腫瘤的生長(zhǎng)情況以及腫瘤組織內(nèi)的DNA損傷情況。結(jié)果:通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)我們觀察到AGuIX納米顆粒對(duì)H1299細(xì)胞有明顯的輻射增敏作用,并且利用流式細(xì)胞術(shù)在AGuIX納米顆粒聯(lián)合輻射組中檢測(cè)到更多的凋亡細(xì)胞。在流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)中,我們觀察到與單獨(dú)使用輻射相比,在輻射前預(yù)處理AGuIX納米顆粒使H1299細(xì)胞G2/M期阻滯延遲。在免疫熒光實(shí)驗(yàn)中我們觀察到在單獨(dú)輻射組和AGuIX納米顆粒聯(lián)合輻射組中,γH2AX 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)有顯著差異,AGuIX納米顆粒聯(lián)合輻射組明顯多于單獨(dú)輻射組。彗星實(shí)驗(yàn)表明,AGuIX納米顆粒加劇了輻射誘導(dǎo)的DNA損傷,并減少了DNA損傷的修復(fù)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,在AGuIX納米顆粒和輻射的聯(lián)合治療組中觀察到顯著的腫瘤生長(zhǎng)抑制以及腫瘤組織內(nèi)的DNA損傷,并在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著高于單獨(dú)AGuIX納米顆粒組和單獨(dú)輻射組。結(jié)論:我們的數(shù)據(jù)表明AGuIX納米顆�？赡苁且环N新型的非小細(xì)胞肺癌輻射增敏劑。AGuIX納米顆粒的輻射增敏機(jī)制涉及到加重的DNA損傷以及減少的DNA損傷修復(fù),但具體的信號(hào)通路仍有待研究。無(wú)論如何,我們的研究為AGuIX納米顆粒作為輻射增敏藥物提供了科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R734.2;R730.55
【部分圖文】：

我們通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn)來(lái)探宄ＡＧｕＩＸ納米顆粒對(duì)非小細(xì)胞肺癌Ｈ１２９９細(xì)胞??輻射敏感性的影響�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ＡＧｕＩＸ納米顆粒增強(qiáng)了非小細(xì)胞??肺癌Ｈ１２９９細(xì)胞的輻射敏感性（圖１－２Ａ，?１－２Ｂ）。為了進(jìn)一步評(píng)價(jià)ＡＧｕＩＸ納米??顆粒對(duì)非小細(xì)胞肺癌Ｈ１２９９細(xì)胞的輻射增敏作用，我們利用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定了??細(xì)胞凋亡。流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ＡＧｕＩＸ納米顆粒聯(lián)合照射??組的Ｈ１２９９細(xì)胞的總凋亡率明顯高于單獨(dú)照射組，且單獨(dú)ＡＧｕＩＸ納米顆粒組與??對(duì)照組相比也顯示出明顯升高的凋亡率（圖１－２Ｃ，１－２Ｄ）。??Ａ?Ｂ??１６??

圖.口目如，口閱叫.的

?ＨＴＣ－Ａ?ＨＴＣ－Ａ??圖１－２?ＡＧｕＩＸ納米顆粒對(duì)Ｈ１２９９細(xì)胞輻射敏感性的影響??（Ａ）?Ｈ１２９９細(xì)胞的克隆形成情況；（Ｂ）?Ｈ１２９９細(xì)胞的存活分?jǐn)?shù)。細(xì)胞給予單獨(dú)使用ＡＧｕＩＸ??納米顆粒、單獨(dú)照射、ＡＧｕＩＸ納米顆粒和照射聯(lián)合處理。（Ｃ）照射后２４小時(shí)ＡＧｕＩＸ納米??顆粒引起的細(xì)胞凋亡增加的定性流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)圖。（Ｄ）?ＡＧｕＩＸ納米顆粒和輻射聯(lián)合處理??誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡增加的定量分析。數(shù)據(jù)分析為平均值士ＳＤ的結(jié)果ｅ?ＰＰｃＯ．ＯＳ；?＊＊Ｐ＜０．０１；??＊＊＊?尸?＜０．００１；?ｎ＝３）??１．３．３輻射誘導(dǎo)下ＡＧｕＩＸ納米顆粒對(duì)Ｈ１２９９細(xì)胞ＤＮＡ損傷的影響??為了探究輻射誘導(dǎo)下ＡＧｕＩＸ納米顆粒對(duì)非小細(xì)胞肺癌Ｈ１２９９細(xì)胞增敏的可??能機(jī)制，我們通過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了與細(xì)胞ＤＮＡ損傷相關(guān)的蛋白ＹＨ２ＡＸ和??５３ＢＰ１的表達(dá)和聚集情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ＡＧｕＩＸ納米顆粒聯(lián)合照射組的Ｈ１２９９??細(xì)胞中表達(dá)ｙＨ２ＡＸ和５３ＢＰ１蛋白的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)（單個(gè)細(xì)胞中ｆｏｃｉ＞１０）均明顯高??于單獨(dú)照射組（圖１－３Ａ，?１－３Ｂ）。說(shuō)明輻射誘導(dǎo)下ＡＧｕＩＸ納米顆粒加劇了?Ｈ１２９９??細(xì)胞的ＤＮＡ損傷。??１７??
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1 杜亞南;新型釓基納米顆粒-AGuIX對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞輻射增敏作用的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2019年

本文編號(hào)：2878580