目的通過對兩種不同的HBV-DNA檢測試劑的性能進行評價和比較,有利于為臨床檢測提供快速、準確的結(jié)果。方法從正確度、精密度、定量限、線性范圍、干擾試驗等性能方面對兩種不同的國產(chǎn)熒光定量PCR的HBV-DNA檢測試劑進行性能驗證,并選取不同類型的臨床標本進行同步檢測分析,通過相關(guān)性和一致性評價兩種試劑檢測結(jié)果是否存在差異。結(jié)果1.對兩種檢測試劑批內(nèi)和批間的精密度進行分析,結(jié)果表明其精密度在對高濃度的標本檢測時優(yōu)于低濃度。兩種試劑對HBV-DNA檢測的正確度結(jié)果一致性良好,沒有顯著差異。A試劑對HBV-DNA定量限的陽性檢出率達到100%,B試劑的定量限檢出率達到88%,2種試劑的偏差均在?0.5的范圍內(nèi)。兩種試劑的線性范圍驗證符合相關(guān)要求。對兩試劑進行干擾試驗,結(jié)果表明嚴重溶血、脂血標本對低病毒載量HBV DNA的檢測會有影響,但低載量標本的HBV-DNA檢測不受輕微溶血、脂血標本影響,而即時檢測、室溫保存3天、4℃冷藏后7天這三種保存時間影響差異不顯著。2.使用2種檢測試劑對篩選的100份臨床標本進行了相關(guān)性和一致性分析,在病毒載量較低組如小三陽組和其他組時,A試劑檢出率(43.06%)略高于B試劑(40.28%),兩種試劑與對照試劑對共同檢出的標本HBV-DNA檢測相關(guān)性和一致性均較好。對HBV合并HCV感染的肝炎33例標本進行檢測分析,結(jié)果表明兩種試劑在臨床中對混合感染的肝炎病人HBV-DNA檢測結(jié)果均比較可靠(r~2=0.952)。對肝癌患者的臨床標本進行檢測分析,結(jié)果表明兩種試劑的檢測相關(guān)性與一致性良好。結(jié)論選用的兩種HBV-DNA檢測試劑盒性能方面均符合實驗要求。A試劑與B試劑在臨床中對于病毒低載量樣本的檢測具有等效性,能力相當。
【學位單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R446
【部分圖文】：

圖 1 HBV 基因組的結(jié)構(gòu)和組成Fig1 Genes Alignment of Hepatitis B Virus的復(fù)制過程包括以下幾步：附著、侵入、脫殼、轉(zhuǎn)錄、復(fù)制過包膜與相應(yīng)的細胞受體結(jié)合而附著在易感肝細胞表面，組的核衣殼而進入細胞漿內(nèi)。核心顆粒在進入細胞核后通狀 DNA（relaxed circular DNA，rcDNA）,在 DNA 聚合酶環(huán)狀 DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA）,在合酶作用下轉(zhuǎn)錄生成各種 mRNA，在翻譯成對應(yīng)的各種蛋 RNA ( pregenomic RNA，pgRNA)在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下包 HBV DNA。只有成熟的 DNA 的核衣殼才能被裝配包膜蛋有 pgRNA 的不成熟核衣殼。在包裝過程中，只有正確包如 S 蛋白或 preS 蛋白比例不對都會導(dǎo)致異常的裝配和釋放

16圖 1A、B 兩試劑對于質(zhì)評檢測能力的一致性Fig 1 Consistency ofAand B reagents for quality assessment限驗證：國家定量限標準為 25 次檢驗中至少 22 次檢測結(jié)果，通過對 A、B 兩種試劑的 HBV-DNA 靈敏度檢測，結(jié)果陽性檢出率達到 100%（表 4），同時，我們對兩個批號檢較，均在 0.5 的范圍內(nèi)（圖 2），實驗結(jié)果符合國家定量限

安徽醫(yī)科大學碩士學位論文 2 個批號的陽性檢出率達到 88%（表 5），同時，偏差也均在 0.5 的3），也符合國家定量限標準要求。A 試劑的靈敏度和 B 試劑無顯著差 4 A 試劑 HBV-DNA 檢測定量限驗證檢測結(jié)果檢出次數(shù) 檢驗總數(shù) 陽性率 評價6 25 25 100% 符合7 25 25 100% 符合
【參考文獻】

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本文編號：2839211