目的初步建立健康兒童的血漿甲羥戊酸激酶活性及免疫球蛋白D濃度的正常參照值范圍,并運用于驗證1例基因確診的甲羥戊酸激酶缺乏癥患兒的免疫代謝特點。同時通過回顧性總結國外多中心大樣本資料,闡述甲羥戊酸激酶缺乏癥的發(fā)病機制、流行病學、臨床表現(xiàn)、診斷標準及、治療原則及預后情況,以提高臨床醫(yī)生對本病的認識。方法(1)采集40例正常兒童的靜脈血,通過雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(sandwich ELISA),獲得正常兒童血漿甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase,MVK)活性及免疫球蛋白D的正常參照值范圍,同時通過SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學分析,對血漿MVK活性以及IgD水平進行相關性分析,并對不同性別、不同年齡組健康兒童的測量值進行差異性分析。(2)以2017年5月在由深圳市兒童醫(yī)院風濕免疫科診治的1例甲羥戊酸激酶缺乏癥(mevalonate kinase deficiency,MKD)患兒家系為研究對象,總結該患兒的臨床資料,包括病史特點、體格檢查及輔助檢查結果等,并采用單樣本t檢驗比較患兒血漿MVK活性及IgD水平與正常參照組之間的差別。(3)在PubMed、EMBASE、Ovid、萬方數據庫、中國知網、中國生物醫(yī)學文獻數據庫數據庫等國內外數據庫分別以“mevalonate kinase deficiency(MKD)、hyperimmunoglobulinemia D with periodic fever syndrome(HIDS)、mevalonic aciduria(MA)、甲羥戊酸激酶缺乏癥、高IgD伴周期性發(fā)熱綜合征、甲羥戊酸尿癥”等為關鍵詞進行文獻檢索,并選取報告10例以上的多中心大樣本病例系列報告進行文獻復習,回顧性總結MKD的發(fā)病機制、流行病學、臨床表現(xiàn)、診斷標準、治療原則及預后情況。結果(1)基于ELISA檢測方法,獲得40例健康兒童的血漿MVK活性的正常參照值范圍為96.17±19.24 μ g/L,血漿IgD水平的正常參照值范圍為44.11 ±28.51mg/L,不同性別、不同年齡組兒童的血漿MVK活性與IgD水平無統(tǒng)計學差異。(2)研究對象為5歲10月男性患兒,生后10天起病,主要表現(xiàn)為反復性發(fā)作性發(fā)熱,每次發(fā)作間隔2～4周,每次熱程3～7天,發(fā)作時伴乏力、多汗、腹痛、關節(jié)腫痛、頭痛;查體存在貧血貌、頸部淋巴結、肝脾腫大;輔助檢查提示血清IgA(5.31～11.26)g/L(參考值 0.41～2.97 g/L),血膽固醇(2.07～2.97)mmmol/L(參考值 3.1～5.8mmol/L),血紅蛋白(65～102)g/L(參考值 110～160 g/L),直接抗人球蛋白試驗陽性;關節(jié)MRI提示踝關節(jié)MRI提示雙踝關節(jié)積液,滑膜明顯增厚伴強化;基因測序結果顯示MVK基因c.827AG、p.E276G和c.827AG、p.E276G復合雜合變異,分別來源于其父親和母親;患兒急性發(fā)作期的MVK活性為10.987 μ g/L,發(fā)作間歇期為25.078 μ g/L,均顯著低于正常參照值(96.17± 19.24 μ g/L);而患兒的血漿IgD活性在急性發(fā)作期(4894.97mg/L)與發(fā)作間歇期(4968.75mg/L)均顯著高于正常參照值(44.11±28.51 mg/L)。本例患兒對非甾體類抗炎藥療效欠佳,給予糖皮質激素口服可控制癥狀并可正常上學。(3)MKD為單基因遺傳自身炎癥性疾病,屬于常染色體隱性遺傳,致病基因位于染色體12q24,該基因突變可引起MVK活性降低,導致甲羥戊酸途徑障礙,造成類異戊二烯產物缺乏,促使IL-1β等炎癥因子過度產生,繼而出現(xiàn)全身炎癥反應,根據MVK活性減低程度為兩個表型,即高IgD 伴周期性發(fā)熱綜合征(Hyperimmmunoglobulinemia D with periodic fever syndrome,HIDS)和甲羥戊酸尿癥(mevalonic aciduria,MA)。HIDS 的臨床特征為反復性、周期性發(fā)熱,通常伴有淋巴結腫大、脾腫大、關節(jié)痛/關節(jié)炎、腹痛和皮疹等,罕見淀粉樣變性;MA患兒還可伴有嚴重的神經系統(tǒng)損傷、發(fā)育畸形和眼部病變并多數早夭。診斷本病主要依據2015年歐洲兒童風濕病研究組織提出的臨床診斷標準及基因檢測。HIDS發(fā)作次數可能隨年齡增長而減少,部分患兒在治療后癥狀可得到持續(xù)控制,而MA患兒通常預后較差,約40%的患兒在嬰兒期夭折。目前MKD尚無根治方法,遵循個體化治療原則,以對癥支持治療為主,首選非甾體類抗炎藥(NSAIDs),二線治療包括糖皮質激素及生物制劑,造血干細胞移植成功病例亦有報道,植物類異戊二烯可能成為治療MKD的新靶點。結論本文初步建立了正常兒童的血漿MVK活性及IgD水平的檢測方法,并獲得健康兒童的MVK活性及IgD水平正常參照值范圍,同時運用于檢測1例確診HIDS患兒的MVK活性及IgD水平。該例患兒于新生兒期起病,以周期性反復性發(fā)熱伴劇烈腹痛、嘔吐、關節(jié)痛、頭痛為主要表現(xiàn),輔助檢查提示非特異性炎癥指標升高,基因檢測提示MVK基因復合雜合突變,同時排除了感染性及腫瘤性疾病,因此HIDS診斷成立,檢測提示患兒MVK活性減低、IgD水平升高,符合MKD免疫代謝特點。
【學位單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R725;R446.6
【部分圖文】：

定板上的小孔里，洗滌一次；加待測抗原，如兩者是特異的，則發(fā)生結合，然后把逡逑多余抗體洗除；加入與待測抗原呈特異反應的酶聯(lián)抗體，使形成“夾心”；加入該酶逡逑的底物，若看到有色的酶解產物產生，說明在孔壁上存在相應的抗原（如圖１）。逡逑ｌｖ邋Ｖ邋１邐＋邋？邐邐丨邋Ｖ邋露７逡逑ｗ相化抽促抗體邐Ａｇ逡逑0逡逑Ｖ邋ｖｌ邋＋邋Ａ－邐＞ｒ逡逑鮑標檢測抗體逡逑ｆｖＭ邋＋邋．邋＾＊邋_炲義系孜镥義賢跡彼固逡徊郊行姆噶庖呶絞匝椋ǎ螅幔睿洌鰨椋悖楨澹牛蹋桑櫻粒┰礤義希保澹插澹停鄭嘶钚約觳夥椒ㄥ義賢は勸患佐俏燜峒っ福ǎ停鄭耍┛固宓陌晃⒖字�，襾砦加入碑T盡⒈曜計貳㈠義俠備躉錈福ǎ齲遙校┍曇塹募觳飪固澹掠⒊溝紫吹�。用底五P�，邋霪，邋５’邋－辶x纖募諄槳罰ǎ裕停攏┫隕�，ＴＭＢ栽忼衍O錈傅拇呋倫衫渡�，并灾]岬淖饔緬義舷倫勺鈧盞幕粕�。颜色导{釙澈脫分械募佐俏燜峒っ福ǎ停鄭耍┏收喙亍Ｓ妹稿義媳暌竊冢矗擔埃睿聿ǔは虜舛ㄎ舛齲ǎ埃鬧擔�，紦溟孂品浓度。辶x希保玻澹毖靜杉氨４駑義喜捎茫牛模裕量鼓懿杉矗懊】刀耐庵芫猜鲅歟恚歟常埃埃白胄模保胺種渝義轄禿煜赴擲耄褂酶呔燃友剮⌒娜〕鲅蟹腫�，并将茲存于－辶x希玻

本文編號：2809569