發(fā)布時間：2020-06-17 18:46

【摘要】：目的:研究低氧預處理人羊膜間充質干細胞修復放射性損傷涎腺的功能。方法:(1)應用機械法和酶消化法從人羊膜組織中分離人羊膜間充質干細胞,通過及免疫細胞化學染色,細胞成脂和成骨誘導分化以及細胞免疫表型鑒定,對干細胞特性進行鑒定。將細胞進行低氧及常氧預處理48h,以備動物實驗使用,以上實驗步驟由同課題組代敏同學完成;(2)雌性小鼠18只,一次性使用15Gy的電子線局部照射頭頸部制作涎腺損傷模型和6只正常小鼠,分為4組,空白對照組(Control)、照射+PBS組(IR+PBS)、照射+常氧處理人羊膜間充質干細胞組[IR+Nor-hAMSCs(IR+Nor)]、照射+低氧預處理人羊膜間充質干細胞組[IR+HP-hAMSCs(IR+HP)];(3)將注射細胞濃度調整為1×10~6/ml,注射劑量為20ml,于小鼠下頜下腺原位移植,細胞治療后2月對各項指標進行檢測;(4)檢查指標:測定各組小鼠體重、唾液流量率及滯后時間后,處死小鼠取下頜下腺稱重,行HE染色、TUNEL組織凋亡檢測、α-Amy免疫組化檢測,對所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結果:(1)小鼠體重在單純放射損傷后下降,后緩慢恢復至放射損傷前水平。放射損傷后1周小鼠唾液流量明顯下降,為正常流量的42.9%,放射損傷后2月測量小鼠唾液流量為正常小鼠的31.6%,下頜下腺組織HE染色顯示:小鼠下頜下腺體內腺泡細胞大量消失,組織結構紊亂,見團塊狀炎性細胞浸潤,間質內散在纖維化;(2)細胞治療后2月,IR+HP組和IR+Nor組唾液流量、腺體重量較IR+PBS組明顯改善,但少于空白對照組(P0.05),IR+HP組較IR+Nor組有少量增加(P0.05);IR+PBS組滯后時間長于空白對照組(P0.05),IR+Nor組和IR+HP組兩組間滯后時間大致相同,但仍長于空白對照組,各組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);(3)細胞治療后2月HE染色:IR+PBS組中腺泡細胞數(shù)量大量減少,剩余腺泡細胞呈現(xiàn)空泡性變,結構改變巨大,見團塊狀炎性細胞浸潤,間質出現(xiàn)纖維樣改變。IR+Nor組較IR+PBS組,腺泡細胞數(shù)量增多,漿液性腺泡輕度水腫,見少量散在炎性細胞浸潤,間質纖維化減輕。IR+HP組較IR+PBS組,腺泡細胞數(shù)量顯著增加,細胞結構接近正常細胞;(4)細胞治療后2月細胞凋亡率:IR+PBS組高于IR+HP組及IR+Nor組(P0.05),IR+HP組低于IR+Nor組(P0.05);(5)免疫組化染色:α-Amy在各組間均有表達,IR+HP組及IR+Nor組較IR+PBS組表達增加(P0.05),IR+HP組較IR+Nor組的表達增加(P0.05)。結論:低氧預處理的人羊膜間充質干細胞較常氧培養(yǎng)方式能更加有效修復放射損傷涎腺的功能。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R781.7;R730.55
【圖文】：

義醫(yī)學院碩士研究生論文 王英1.3 放射損傷后小鼠下頜下腺病理變化情況正常小鼠下頜下腺組織的表現(xiàn)主要大量腺泡細胞排列整齊，細胞結構完整。傷后 1 月顯示腺泡細胞數(shù)目較正常組減少，部分腺泡細胞結構受損，見散在炎浸潤。放射損傷后 2 月顯示腺泡細胞數(shù)目明顯減少，大部分腺泡細胞結構受損塊狀炎性細胞浸潤，間質內見散在纖維化。見圖 3、表 1。BA

圖 8 細胞治療后 2 月對小鼠小頜下腺組織結構的影響(×200)A.空白對照組小鼠下頜下腺 HE 染色圖（×200）；B.IR+PBS 組小鼠下頜下腺 HE 染色圖（200）；C.IR+Nor 組小鼠下頜下腺 HE 染色圖（×200）；D. IR+HP 組小鼠下頜下腺 HE 染色圖（200）表 5 細胞治療后 2 月各組小鼠下頜下腺組織切片中的腺泡細胞數(shù)量 ( x ±S, n=6)組別 腺泡細胞數(shù)目（個）Control 組 162.43±6.73IR+PBS 組 90.43±7.32***IR+Nor 組 110.57±7.59*** ###IR+HP 組 126.57±8.23*** ### ++

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 姚觀平;余麗梅;范振海;方寧;任飛;羅嬌;張小雨;王鈺瑩;劉金偉;;人羊膜間充質干細胞移植骨髓抑制小鼠的造血功能[J];中國組織工程研究;2013年23期

2 霍雙枝;施萍;龐希寧;;人羊膜負載人羊膜間充質干細胞對SD大鼠皮膚創(chuàng)面愈合的影響[J];中國醫(yī)學科學院學報;2011年06期

3 張路;方寧;陳代雄;劉祖林;劉金偉;萬衛(wèi)紅;章濤;;人羊膜間充質細胞具有向心肌樣細胞分化的特性[J];中國生物工程雜志;2007年12期

本文編號：2718011