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亳州市肺結(jié)核患者耐藥情況及耐藥相關(guān)基因分析

發(fā)布時(shí)間:2020-06-07 12:04
【摘要】:目的:了解亳州市肺結(jié)核患者的耐藥流行病學(xué)情況,特別是初復(fù)治患者耐藥情況的差異。了解當(dāng)?shù)啬彤悷熾潞屠F骄甑南嚓P(guān)基因突變情況,探討線性探針技術(shù)(LPA)對結(jié)核病藥物檢測的特異性和敏感性。為結(jié)核病疫情的發(fā)現(xiàn)、控制和治療提供參考。方法:對調(diào)查期內(nèi)連續(xù)納入的痰抗酸染色陽性的肺結(jié)核病例進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。收集的痰液標(biāo)本并進(jìn)行體外培養(yǎng);采用比例法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn),收集異煙肼利福平(RFP)、(INH)、鏈霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、氧氟沙星(OFX)和卡那霉素(KAM)6種抗結(jié)核藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果。以標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株作為對照,將異煙肼(INH)和利福平(RFP)耐藥的菌株,提取DNA并擴(kuò)增目的基因,分析異煙肼(INH)和利福平(RFP)耐藥基因的突變情況,并通過與傳統(tǒng)藥敏的比較,探討線性探針技術(shù)(LPA)對耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)的快速診斷意義。結(jié)果:1.肺結(jié)核患者的流行病學(xué)特征本次研究納入251例患者,男性208人,占82.87%;女性43人,占17.13%。初治患者212例,復(fù)治患者39例。年齡最小的患者15歲,最大的91歲,平均年齡為52.64歲,患者年齡主要分布在中年和老年。職業(yè)以農(nóng)民為主,有232例,占92.43%;非農(nóng)民只有19例。患者中,低收入人群比例較大,年人均收入低于20000元的患者人數(shù)占64.14%。初中及以下文化的低學(xué)歷患者人數(shù)較多,有231例,占92.03%。2.結(jié)核分枝桿菌分離培養(yǎng)和總體耐藥情況共培養(yǎng)266例陽性菌株,經(jīng)菌種鑒定后,有251例為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(MTB),占94.36%;15例為非結(jié)核分枝桿菌(NTM),占5.64%。故本次研究納入有效病例251例。在251例結(jié)核分枝桿菌感染患者中,初治患者212例,復(fù)治患者39例。178例患者對6種藥物全部敏感,占70.92%;有73例患者至少對一種藥物耐藥,總耐藥率29.08%。耐藥率最高的為RFP(16.33%),6種抗結(jié)核藥物的總耐藥率順序?yàn)镽FPINH=SMOFXEMBKAM。一線藥物總耐藥率27.89%,二線藥物總耐藥率8.37%。251例菌株共檢出耐多藥菌株31例,占12.35%,廣泛耐藥菌株3例。3.初復(fù)治患者的藥敏情況比較藥敏結(jié)果顯示:初治耐藥率25.94%,耐藥率最高的為SM(15.09%),復(fù)治耐藥率46.15%,耐藥率最高的為RFP(43.59%)。復(fù)治患者對一線藥物耐藥率大于初治患者(χ~2=7.66,P0.05),對二線藥物耐藥率也大于初治患者(χ~2=8.89,P0.05)。復(fù)治MDR患者耐藥率明顯大于初治患者(χ~2=14.47,P0.05),復(fù)治患者對INH、RFP、OFX的耐藥率均大于初治患者。4.羅氏培養(yǎng)方法和線性探針技術(shù)的性能比較以羅氏培養(yǎng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),對RFP或INH耐藥菌株46例采用線性探針方法檢測。RFP的耐藥敏感度97.5%,特異性為83.33%,一致性為0.808;INH的耐藥敏感度為88.89%,特異性為90%,一致性為0.712。線性探針技術(shù)對耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)檢測的靈敏度為83.33%,特異性為87.50%,一致性為0.679。線性探針和羅氏培養(yǎng)兩種方法對MDR-TB的檢出無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ~2=0.73,P0.05)。5.基因突變的情況40例利福平耐藥的菌株,rpoB基因突變的位點(diǎn)主要是S531L,有27例,占67.5%。33例異煙肼耐藥的菌株,突變主要是KatG基因的S315T1位點(diǎn),有22例,占66.7%;7例inhA基因的突變均是C15T位點(diǎn),其中3例S315T1位點(diǎn)也同時(shí)發(fā)生改變。結(jié)論亳州市結(jié)核病患者的耐藥情況不容樂觀,特別是復(fù)治患者的耐藥情況較為嚴(yán)重。利福平和異煙肼菌株耐藥基因突變與國內(nèi)部分地區(qū)研究基本一致,但仍有自己的特點(diǎn)。線性探針技術(shù)對利福平和異煙肼的耐藥檢測有較高的敏感性和特異性,其結(jié)果有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。
【圖文】:

結(jié)核分枝桿菌,培養(yǎng)基,前處理,斜面


安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生碩士(MPH)學(xué)位論文加入 1-2 倍左右體積 4%的氫氧化鈉前處理液,擰緊螺旋蓋,放置在旋渦振蕩器震蕩 30-60 秒至標(biāo)本充分混勻,室溫放置 15 分鐘待用。1.4.3.2.3 痰標(biāo)本保存:留取涂片陽性的痰標(biāo)本,放置于-20℃冰箱凍存,待分離養(yǎng)物合格后再銷毀。1.4.3.2.4 接種:前處理完成后,用無菌吸管吸取前處理液 0.1 毫升,均勻接種支酸性羅氏培養(yǎng)基斜面上,37℃下保持斜面水平向上培養(yǎng) 24 小時(shí),然后直立放繼續(xù)培養(yǎng)。羅氏培養(yǎng)基陽性結(jié)果見圖 2。

職業(yè)構(gòu)成,患者,情況,非農(nóng)民


分類 人數(shù) 構(gòu)成比(%)(歲) 0~ 10 3.9821~ 64 25.5041~ 72 28.6961~ 105 41.83別 男性 208 82.87女性 43 17.13業(yè)構(gòu)成入研究的 251 例患者,職業(yè)以農(nóng)民為主,有 232 例,占 92.43%,非農(nóng)民其中學(xué)生有 4 例,企業(yè)職工 3 例,商業(yè)服務(wù)人員 3 例,事業(yè)單位員工 1輸業(yè)人員 2 例,離退休人員 3 例,,其他 3 例。詳情見圖 3。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R446.5;R521

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2701391

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