【摘要】：目的:探討嗜鉻粒蛋白A衍生多肽CGA47-66(即CHR,Chromofungin)對LPS所誘導(dǎo)的永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞高通透性的影響及其相關(guān)分子機(jī)制。方法:(1)分別用不同濃度的LPS(0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、50μg/ml)刺激HBMEC細(xì)胞,用CCK8法檢測細(xì)胞活力變化并篩選出LPS最佳處理濃度;(2)分別用LPS、CHR、CGA4-16作用于人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,Western blot法檢測不同時間點緊密連接蛋白的表達(dá)情況,篩選出最佳作用的時間點;(3)分別用LPS、CHR、CGA4-16作用于人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,Transwell小室法及EVOM法檢測內(nèi)皮細(xì)胞相對通透性;Western blot及RT-PCR法檢測緊密連接蛋白(ZO-1和Claudin-5)的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)與空白組相比,隨著LPS濃度增加HBMEC細(xì)胞的活性受到顯著抑制(均P0.05);當(dāng)LPS濃度為5μg/ml時,細(xì)胞抑制率約為50%。(2)隨著LPS作用時間延長,其細(xì)胞內(nèi)緊密連接相關(guān)蛋白ZO-1、Claudin-5的表達(dá)逐漸下調(diào),6h后蛋白表達(dá)量降到最低(均P0.05),12h和24h后其蛋白表達(dá)與6h相比無明顯差異。(3)LPS作用下HBMEC單層細(xì)胞電阻值明顯降低(t=-18.214,P0.001),細(xì)胞通透性顯著升高(t=6.083,P=0.004),ZO-1、Claudin-5的蛋白和mRNA表達(dá)明顯下調(diào)(均P0.05),而CHR可顯著改善上述變化(均P0.05)。結(jié)論:嗜鉻粒蛋白A衍生多肽CHR能夠改善LPS所致的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞高通透性,其機(jī)制可能與其緊密連接相關(guān)蛋白的表達(dá)上調(diào)有關(guān)。
【圖文】：

圖１邋ＣＣＫ８法檢測細(xì)胞活性逡逑

１腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)逡逑腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞在顯微鏡下呈梭形或橢圓形，細(xì)胞胞膜透亮，邊界清晰，逡逑胞核清晰可見（圖１）。逡逑圖１邋ＨＢＭＥＣ細(xì)胞形態(tài)（ｌ0ｘｌ0倍）逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｔｈｅ邋ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ邋ｏｆ邋ＨＢＭＥＣ邋ｃｅｌｌ邋（１０ｘ１０）逡逑２邋ＬＰＳ對ＨＢＭＥＣ細(xì)胞活性的影響逡逑ＬＰＳ對于ＨＢＭＥＣ細(xì)胞的活性具有一定的濃度依賴性。隨著ＬＰＳ濃度（０．０１、逡逑０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、５0ｎｇ／ｍｌ）的增加，細(xì)胞抑制率逐漸上升（０．２１６±０．０５０，逡逑０．２４７±０．０３１，０．２６７±０．０６３，邋０．３０２±０．０５７，邋０．３９８士０．０３２，邋０．５０８±０．０４４，邋０．５９２±０．０４３，逡逑０．７７２±０．０５０）。當(dāng)ＬＰＳ為５ｎｇ／ｍｌ時，細(xì)胞的生長抑制率約為５０％；當(dāng)ＬＰＳ濃度為逡逑Ｏ．Ｏｌｊｘｇ／ｍｌ時，細(xì)胞抑制率最低，約為２１．６％；當(dāng)ＬＰＳ為５０ｐｇ／ｍｌ時，細(xì)胞的生長逡逑抑制率達(dá)最高，約為７７．２％邋（見圖２）。逡逑１７逡逑
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R459.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張楠;王思迪;涂盼春;岳英芳;楊智航;;緊密連接相關(guān)蛋白對血腦屏障通透性影響的研究進(jìn)展[J];沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2017年01期

2 關(guān)景霞,孫圣剛,曹學(xué)兵,陳志斌,童萼塘;凝血酶對血腦屏障通透性影響及其機(jī)制的實驗研究[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2003年10期

3 謝云德;精神緊張能改變血腦屏障通透性[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊;1997年03期

4 吳超;李新民;張喜蓮;路巖莉;房艷艷;聶坤;劉菁;;開竅類中藥增加血腦屏障通透性機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國中醫(yī)急癥;2017年07期

5 彭慧婷;高福平;張勤麗;牛僑;;納米氧化鋁對血腦屏障通透性影響的體外研究[J];毒理學(xué)雜志;2013年01期

6 許宏偉,楊期東,劉曉英,肖波,趙真;腦出血后血腦屏障通透性的變化及七葉皂苷鈉的影響[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2004年04期

7 ;腫瘤和藥物對血腦屏障通透性的影響[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);1996年01期

8 趙康峰;孔建;張少平;張麗霞;陽曉燕;張宏偉;白雪濤;;3種化學(xué)物對血腦屏障通透性影響的體內(nèi)、外實驗對比研究[J];毒理學(xué)雜志;2014年06期

9 鞏沅鑫;周其全;;銀杏葉提取物對血腦屏障通透性保護(hù)作用的分子機(jī)制[J];中國新藥雜志;2008年17期

10 李昭君;馬蘇蘇;李�？�;閆濱;;促進(jìn)血腦屏障通透性方法的研究進(jìn)展[J];食品與藥品;2017年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 丁桂榮;邱聯(lián)波;王曉武;李康樗;周詠春;張杰;周家興;郭國禎;;電磁輻射對血腦屏障通透性的影響及其機(jī)制研究進(jìn)展[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會第14屆學(xué)術(shù)交流會議論文集[C];2009年

2 張勤麗;吉俊偉;高福平;白茹;葛翠翠;王志武;牛僑;;納米氧化鋁對小鼠血腦屏障通透性的影響[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

3 王玉凱;胡小懷;任麗;;鈣拮抗劑對大鼠腦缺血后血腦屏障通透性的影響[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

4 吳雪;向大雄;;中藥血腦屏障通透性的評價方法[A];2009全國中藥創(chuàng)新與研究論壇學(xué)術(shù)論文集[C];2009年

5 王衛(wèi)東;尹飛;;缺氧缺血對體外血腦屏障通透性的影響及其機(jī)制的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

6 黃宇晶;馮加純;鄧方;韓冬;劉心剛;;腦缺血再灌注后血腦屏障通透性變化的機(jī)制[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

7 金信春;樓敏;;血腦屏障通透性參數(shù)可預(yù)測靜脈溶栓后基底節(jié)出血轉(zhuǎn)化[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編（上）[C];2014年

8 陳志斌;關(guān)景霞;蔡美華;曹學(xué)兵;蘇慶杰;王W，

本文編號：2607510