本文選題：BRCA亞細(xì)胞定位 + 同源重組修復(fù)　； 參考：《臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志》2017年03期

【摘要】：目的 探討腫瘤BRCA1細(xì)胞內(nèi)定位對放射線和PARP抑制劑敏感性的影響。方法 采用siRNA干擾抑制乳腺癌細(xì)胞株MCF7內(nèi)源性BRCA1表達(dá),轉(zhuǎn)染BRCA1細(xì)胞內(nèi)定位不同的載體:p CMV-3x Flag-WT-BRCA1、p CMV-3x Flag-NES-BRCA1、p CMV-3x Flag-NLS-BRCA1。采用免疫熒光法檢測BRCA1的細(xì)胞定位及細(xì)胞核γ-H2AX和Rad51核焦點(diǎn)形成,應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測體外細(xì)胞存活。結(jié)果 轉(zhuǎn)染W(wǎng)T-BRCA1有47%細(xì)胞核表達(dá),23%細(xì)胞質(zhì)表達(dá),30%細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均表達(dá),NES-BRCA1 mutant表達(dá)主要定位于細(xì)胞核(87%);NLS-BRCA1 mutant定位于細(xì)胞質(zhì)(82%)。WTBRCA1、NES-BRCA1 mutant和NLS-BRCA1 mutant三種載體轉(zhuǎn)染的細(xì)胞4 Gy放射處理后2 h,Rad51核焦點(diǎn)陽性細(xì)胞數(shù)分別為87%、84%及13%;放射后24 h,γ-H2AX核焦點(diǎn)陽性細(xì)胞分別為22%、25%及59%。NLS-BRCA1 mutant轉(zhuǎn)染細(xì)胞較WTBRCA1和NES-BRCA1 mutant轉(zhuǎn)染細(xì)胞ABT-888和放射處理后誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞增加,克隆存活減少。結(jié)論 BRCA1的細(xì)胞內(nèi)定位影響DNA雙鏈斷裂同源重組修復(fù),并可預(yù)測腫瘤對放射和PARP抑制劑的敏感性。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of tumor BRCA1 cell localization on radiosensitivity and PARP inhibitor sensitivity. Methods siRNA interference was used to inhibit the expression of endogenous BRCA1 in breast cancer cell line MCF7, and transfected into BRCA1 cells with different vectors: P CMV-3x Flag-WT-BRCA1P CMV-3x Flag-NES-BRCA1P CMV-3x Flag-NLS-BRCA1. The cellular localization of BRCA1 and nuclear focus formation of 緯 -H2AX and Rad51 were detected by immunofluorescence assay, apoptosis was detected by flow cytometry, and cell survival in vitro was detected by clone formation assay. Results 47% of the cells transfected with WT-BRCA1 expressed 30% of the cytoplasm and 30% of the cytoplasm. The expression of NES-BRCA1 mutant was mainly located in the NLS-BRCA1 mutant of the cells transfected with NLS-BRCA1. WTBRCA1, NES-BRCA1, NES-BRCA1 mutant and NLS-BRCA1 mutant were transfected with 4 Gy radiation treatment. The number of focal point positive cells was 87% and 13% in the latter 2 h, 22% and 25% in 緯 -H2AX cells at 24 h after irradiation, respectively, and the number of 59%.NLS-BRCA1 mutant transfected cells was higher than that of ABT-888 cells transfected with WTBRCA1 and NES-BRCA1 mutant cells and apoptosis cells induced by radiation treatment. Clone survival reduced. Conclusion intracellular localization of BRCA1 affects the repair of DNA double strand break homologous recombination and can predict the sensitivity of tumor to radiation and PARP inhibitors.
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣州呼吸疾病研究所;中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科;
【分類號(hào)】：R737.9

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 Tatyana Grushko;Olufunmilayo I Olopade;;BRCA1 Promoter Hypermethylation is Associated with Expression and Copy Number of BRCA1 in Sporadic Breast Cancer[A];中國藥理學(xué)會(huì)化療藥理專業(yè)委員會(huì)第九屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

2 禹立霞;謝麗;沈潔;魏嘉;錢曉萍;丁慧;劉寶瑞;;BRCA1 mRNA在常見腫瘤中的表達(dá)水平[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

3 魏敏杰;任婕;趙海山;金萬寶;;散發(fā)性乳腺癌組織BRCA1基因啟動(dòng)子甲基化與蛋白表達(dá)的相關(guān)性[A];藥物相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)專題研討會(huì)論文集[C];2006年

4 任婕;王麟;金鋒;米小軼;魏敏杰;;BRCA1和相關(guān)蛋白在乳腺癌中的表達(dá)與相關(guān)分析[A];兩岸三地藥理學(xué)與臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

5 Carlota Costa;Jose Javier Sanchez;Ana Gimenez-Capitan;Teresa Moran;Susana Benlloch;Miquel Taron;Rafael Rosell;;BRCA1,RAP80 and SUMO ligases (PIAS1 and PIAS4) mRNA expression levels and survival in advanced gastric cancer patients receiving second-line docetaxel chemotherapy[A];2011醫(yī)學(xué)科學(xué)前沿論壇第十二屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

6 任婕;魏敏杰;;散發(fā)性乳腺癌組織中BRCA1表達(dá)和影響因素分析[A];中國藥理學(xué)會(huì)化療藥理專業(yè)委員會(huì)第九屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

7 魏敏杰;任婕;金鋒;金萬寶;;BRCA1蛋白在散發(fā)性乳腺癌組織中的表達(dá)[A];藥物相關(guān)蛋白質(zhì)組學(xué)專題研討會(huì)論文集[C];2006年

8 ;The mechanism of BRCA1 participate sporadic breast carcinomas genesis[A];兩岸三地藥理學(xué)與臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

9 孫喜文;李志高;馬玉彥;;BRCA2 N372H多態(tài)性和危險(xiǎn)因素暴露交互作用與散發(fā)性乳腺的關(guān)系[A];腫瘤病因?qū)W研究與中西醫(yī)結(jié)合腫瘤綜合診療交流研討會(huì)論文集[C];2009年

10 任婕;魏敏杰;金鋒;趙海山;姚維范;馮婉玉;;在不同亞群的散發(fā)性乳腺癌組織中BRCA1蛋白的表達(dá)[A];兩岸三地藥理學(xué)與臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 馮衛(wèi)東;“綜合殺傷力”將成新癌癥藥物開發(fā)方式[N];科技日報(bào);2009年

2 王倫　劉晨;高危人群應(yīng)做BRCA1檢測[N];健康報(bào);2007年

3 編譯 王迪;BRCA基因?qū)＠慌袩o效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

4 王迪;BRCA1/BRCA2 基因變異提高乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

5 麥迪信;BRCA2攜帶者易患前列腺癌[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

6 張?zhí)锟?法國對美國基因?qū)＠f“不”[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

7 董歡霽;診斷乳腺癌 基因檢測不可靠？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

8 記者 班瑋;預(yù)防性雙乳切除并非一定必要[N];新華每日電訊;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王雁;Ras相關(guān)Aurora kinases和Stanniocalcin 2在卵巢癌發(fā)生和進(jìn)展中的作用及機(jī)理研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 楊紓旖;BRCA1/2和VDR熱點(diǎn)突變區(qū)域的基因多態(tài)性與新疆哈薩克族乳腺癌的相關(guān)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

3 梁俊國;RRM1、BRCA1在晚期NSCLC的表達(dá)與吉西他濱/鉑類治療臨床研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

4 仇恒濱;BRCA1突變和異常表達(dá)與犬乳腺腫瘤相關(guān)性的分析[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 陶陶;高危家族卵巢癌和散發(fā)性卵巢癌患者BRCA1/2基因突變的研究及臨床意義探討[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

6 曹文明;中國乳腺癌高危人群BRCA1/BRCA2基因的胚系突變研究[D];浙江大學(xué);2013年

7 吳濤;新疆高風(fēng)險(xiǎn)遺傳性乳腺癌BRCA1/2基因突變、啟動(dòng)子甲基化檢測及相關(guān)因素分析研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

8 凌泓;BRCA1相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性與三陰性乳腺癌易感性的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

9 任婕;乳腺癌易感基因BRCA1沉默與散發(fā)性乳腺癌發(fā)病相關(guān)性的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

10 王金華;人乳腺癌細(xì)胞MCF-7中BRCA2啟動(dòng)子的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 汪洋;BRCA1和TopBP1表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌含鉑方案療效的相關(guān)性研究[D];浙江大學(xué);2015年

2 翟夢星;荷斯坦奶牛BRCA2基因、STAT3基因SNPs檢測及其與乳房炎和產(chǎn)奶性狀的關(guān)聯(lián)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 竇曉夢;P53、Livin、ERCC1、BRCA1、PARP 在上皮性卵巢癌中表達(dá)及其對卵巢癌化療耐藥、臨床預(yù)后的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 杜陽;分析ERCC1、BRCA1和GSTP1基因表達(dá)對非小細(xì)胞肺癌療效及預(yù)后的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

5 余智;BRCA2回復(fù)突變與NACT-IDS后卵巢癌鉑類抵抗的初步研究[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

6 朱安娜;BRCA1/2突變與中國漢族女性乳腺癌發(fā)病關(guān)系及中外顯性遺傳多態(tài)性與其關(guān)聯(lián)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

7 魏金玉;BRCA1基因功能性遺傳突變與中國人群食管鱗癌患病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性研究[D];北京化工大學(xué);2015年

8 郭端英;KRAS和BRCA1/2基因突變狀態(tài)對卵巢上皮癌患者預(yù)后的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

9 廖瑩;遺傳性卵巢癌家族BRCA1/2和MSH2基因突變的分析研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

10 張艷苓;中央壞死性乳腺癌臨床病理特征的研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：1836389