本文關(guān)鍵詞：shRNA下調(diào)MMP-9對(duì)MCAO大鼠腦保護(hù)作用的DTI研究　出處：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：背景和目的缺血性腦損傷已經(jīng)成為人類腦血管疾病的最常見類型之一,并且腦梗死后的一些常見并發(fā)癥嚴(yán)重?fù)p害著人類的健康。其中,腦水腫做為腦梗死后的重要并發(fā)癥之一,對(duì)腦梗死的發(fā)生發(fā)展起著很重要的作用。然而,基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)則與腦水腫、血腦屏障通透性緊密相關(guān)。本研究預(yù)通過對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型腦缺血區(qū)組織的DTI成像評(píng)價(jià),從而來探討腦梗死后水腫區(qū)的面積及FA值與MMP-9基因表達(dá)的相關(guān)性,并進(jìn)一步探討慢病毒介導(dǎo)的sh RNA下調(diào)MMP-9基因的表達(dá),減輕急性腦梗死后腦水腫的面積,從而保護(hù)大鼠的神經(jīng)功能,以及改善其影像學(xué)表現(xiàn)。材料與方法1、將體重為260g至300g的32只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為以下四組(每組8只):A組(假手術(shù)組):用鑷子分離頸外動(dòng)脈分支,并把該分支結(jié)扎,暴露頸內(nèi)頸外動(dòng)脈分叉,在分叉處視野下前進(jìn)0.5 cm后固定線拴,并未真正插入大鼠頸內(nèi)動(dòng)脈顱內(nèi)段;B組(MCAO組):單籠飼養(yǎng)MCAO模型成功后的大鼠;C組(生理鹽水組):制作MCAO模型兩周前,向大鼠右側(cè)腦室注射生理鹽水5μl;D組(慢病毒干預(yù)組):制作MCAO兩周前,向大鼠右側(cè)腦室注射慢病毒介導(dǎo)的sh RNA 5μl。在造模成功后4h、8h、12h、18h、24h時(shí)間點(diǎn),本研究的各組大鼠均進(jìn)行了神經(jīng)功能評(píng)分(m NSS)和磁共振掃描,采用的是美國GE Discovery MR 750 3.0T超導(dǎo)高場磁共振掃描機(jī)進(jìn)行批量掃描,使用上海晨光公司生產(chǎn)的大鼠專用線圈,用棉塞固定大鼠頭部使其呈仰臥位,保持頭先進(jìn),掃描中心定位在大鼠視交叉,常規(guī)掃描軸位T1WI、T2WI、T2WI FLAIR、DWI、DTI等序列。計(jì)算病灶側(cè)的ADC值和FA值。2、另取32只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(每組8只),在對(duì)應(yīng)于MRI檢查時(shí)間點(diǎn)取大鼠缺血側(cè)腦組織,Western blot測(cè)定缺血側(cè)腦組織MMP-9蛋白表達(dá);3、另外再取32只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(每組8只),在對(duì)應(yīng)于MRI檢查時(shí)間點(diǎn)取缺血側(cè)腦組織,行石蠟切片,進(jìn)行免疫組化染色,觀測(cè)MMP-9蛋白的表達(dá);4、通過SPSS 17.0軟件對(duì)本實(shí)驗(yàn)中的所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,采用sx±記錄計(jì)數(shù)資料。檢驗(yàn)方法為t檢驗(yàn),重復(fù)測(cè)量方差分析,Pearson相關(guān)分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05,P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1、在缺血后4h、8h、12h、18h、24h時(shí),慢病毒干預(yù)組的m NSS評(píng)分較MCAO模型組降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)2、在缺血后4h、8h、12h、18h、24h時(shí),慢病毒干預(yù)組缺血區(qū)的ADC值、FA值較MCAO模型組升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組間的ADC值、FA值在4h、8h、12h、18h、24h時(shí)間點(diǎn)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)3、局灶性腦缺血后MMP-9蛋白表達(dá)逐漸增多;慢病毒干預(yù)組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的MMP-9蛋白的表達(dá)較MCAO模型組有所降低,且在相應(yīng)的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)4、各手術(shù)組大鼠的m NSS神經(jīng)功能評(píng)分與缺血性腦梗死核心區(qū)的FA值、MMP-9蛋白表達(dá)存在負(fù)相關(guān)。結(jié)論1、腦梗死區(qū)腦組織MMP-9表達(dá)上調(diào)參與大鼠腦梗死周圍水腫的形成以及神經(jīng)功能損傷的發(fā)生。2、慢病毒介導(dǎo)的sh RNA通過抑制MMP-9基因的表達(dá),減輕血管源性水腫,發(fā)揮腦梗死后的保護(hù)作用。3、磁共振DTI可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)缺血性腦梗死大鼠缺血區(qū)的改變及其注射病毒進(jìn)行基因抑制后變化。
[Abstract]:Background and objective: ischemic brain damage has become one of the most common human cerebrovascular disease types, and some of the common complications after cerebral infarction and serious damage to human health. Among them, as one of the major complications of cerebral edema after cerebral infarction, cerebral infarction occurrence and development plays a very important role. However, matrix metalloproteinase -9 (MMP-9) and brain edema, blood brain barrier permeability is closely related to this study. Based on the pretreatment of rats with middle cerebral artery occlusion (middle cerebral artery occlusion, MCAO) DTI imaging model of cerebral ischemia tissue evaluation, so as to explore the correlation between FA area and the area of edema and MMP-9 gene expression values after cerebral infarction. The expression of SH RNA and to further explore the lentivirus mediated downregulation of the MMP-9 gene, relieve acute brain edema after cerebral infarction area, so as to protect the nerve function of rats, and improve the imaging 琛ㄧ幇.鏉愭枡涓庢柟娉，

本文編號(hào)：1403553