發(fā)布時間：2017-09-20 21:11

  本文關(guān)鍵詞：基于磁性分離技術(shù)的化學(xué)發(fā)光適體傳感器檢測赭曲霉毒素A

  更多相關(guān)文章： 赭曲霉毒素A 核酸適配體 化學(xué)發(fā)光 磁性微球

【摘要】：赭曲霉毒素A(OTA)是一種具有很強(qiáng)毒性的真菌毒素,其毒性在真菌毒素家族中位列第二位,僅次于黃曲霉毒素。OTA在自然界分布廣泛,不僅污染谷物糧食,還嚴(yán)重污染動物性食品,對人類構(gòu)成極大的威脅。鑒于食品安全問題關(guān)乎整個社會的安危,應(yīng)當(dāng)引起全世界的高度關(guān)注,因此建立OTA的高靈敏簡便快速分析方法越發(fā)受到科研人員的重視。本論文基于不同的傳感模式和化學(xué)發(fā)光機(jī)理,構(gòu)建了幾種不同的適體傳感器,從而實現(xiàn)了OTA的化學(xué)發(fā)光檢測。且這幾種OTA適體傳感器均以磁性微球作為分離和固定載體,實現(xiàn)傳感器的均相反應(yīng)異相分離。整篇論文內(nèi)容可分為如下三個部分:第一部分基于OTA適體鏈上的鳥嘌呤(G)堿基與化學(xué)發(fā)光試劑苯甲酰甲醛(PG)的瞬時衍生化反應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的原理,以O(shè)TA適體為檢測探針,建立了一種無標(biāo)記適體傳感器,采用化學(xué)發(fā)光法(CL)實現(xiàn)了OTA的定量分析。隨著待測OTA濃度的增大,傳感器CL值逐漸減小,對比未加入OTA的空白組,引起的CL變量(?CL)逐漸增大。優(yōu)化實驗條件下,OTA濃度在0.1~50ng/mL范圍內(nèi),其對數(shù)值(X)與?CL(Y)呈現(xiàn)較好線性關(guān)系(r~2=0.9952),最低檢出限為0.1ng/m L。對紅酒樣品進(jìn)行加標(biāo)回收,回收率在103.3%~112.5%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在4.2%~7.2%之間(n=3)。另外,結(jié)果顯示該無標(biāo)記適體傳感器化學(xué)發(fā)光檢測OTA具有較高特異性。第二部分以金納米粒子作為標(biāo)記物,建立了一種適體傳感器,利用納米金催化魯米諾體系產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的機(jī)制,實現(xiàn)OTA的定量分析。本法以O(shè)TA適體作為固定相,利用OTA與納米金標(biāo)記的報告序列競爭結(jié)合磁性微球表面OTA適體,從而得到OTA濃度與CL信號的呈一定相關(guān)性。最優(yōu)實驗條件下,OTA濃度在0.01~20ng/m L范圍內(nèi),其對數(shù)值(X)與?CL(Y)呈良好線性關(guān)系(r~2=0.9922),最低檢出限為0.01ng/mL。加標(biāo)回收率在104.1%~112.7%之間,RSD值在5.9%~8.7%之間(n=3)。經(jīng)考察,采用納米金標(biāo)記的適體傳感器化學(xué)發(fā)光檢測OTA具有良好特異性。第三部分沿襲第二部分的傳感原理,僅以辣根過氧化物酶(HRP)代替納米金作為標(biāo)記物,利用HRP催化魯米諾體系產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的原理,從而定量分析OTA。最優(yōu)實驗條件下,OTA濃度在0.01~50ng/m L范圍內(nèi),其對數(shù)值(X)與?CL(Y)線性相關(guān)(r~2=0.9898),最低檢出限為0.01ng/mL。加標(biāo)回收率在98.5%~109.3%之間,RSD值在5.2%~7.7%之間(n=3)。另外,本法特異性考察結(jié)果良好。
【關(guān)鍵詞】：赭曲霉毒素A 核酸適配體 化學(xué)發(fā)光 磁性微球
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：TS207.3;O657.3;TP212
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一章 緒論10-27
• 1.1 前言10-11
• 1.2 OTA理化性質(zhì)11-12
• 1.3 核酸適配體技術(shù)12-13
• 1.4 OTA檢測方法研究進(jìn)展13-20
• 1.4.1 OTA的傳統(tǒng)檢測方法13-14
• 1.4.2 基于核酸適配體技術(shù)的OTA分析方法14-20
• 1.5 納米金與磁性微球20-21
• 1.5.1 納米金20
• 1.5.2 磁性微球20-21
• 1.6 化學(xué)發(fā)光法21-24
• 1.6.1 化學(xué)發(fā)光機(jī)理21
• 1.6.2 化學(xué)發(fā)光分析法21
• 1.6.3 化學(xué)發(fā)光體系21-23
• 1.6.4 G堿基與PG化學(xué)發(fā)光機(jī)理23-24
• 1.7 主要內(nèi)容及創(chuàng)新點分析24-27
• 1.7.1 主要內(nèi)容24-25
• 1.7.2 創(chuàng)新點分析25-27
• 第二章 無標(biāo)記適配體傳感器化學(xué)發(fā)光法檢測OTA27-38
• 2.1 引言27-28
• 2.2 實驗部分28-31
• 2.2.1 試劑與材料28-29
• 2.2.2 儀器與設(shè)備29
• 2.2.3 OTA適配體傳感器組裝29-30
• 2.2.4 化學(xué)發(fā)光法檢測30
• 2.2.5 無標(biāo)記適體傳感器性能評價30-31
• 2.3 實驗結(jié)果與討論31-36
• 2.3.1 實驗原理31-32
• 2.3.2 傳感器制備條件考察32-34
• 2.3.3 封閉劑的選擇34
• 2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立34-35
• 2.3.5 無標(biāo)記適體傳感器性能評價35-36
• 2.4 本章小結(jié)36-38
• 第三章 納米金適體傳感器化學(xué)發(fā)光法檢測OTA38-51
• 3.1 引言38
• 3.2 實驗部分38-42
• 3.2.1 試劑與材料38-39
• 3.2.2 儀器與設(shè)備39
• 3.2.3 納米金的制備及表征39-40
• 3.2.4 DNA-AuNPs的制備40-41
• 3.2.5 納米金適體傳感器制備41
• 3.2.6 化學(xué)發(fā)光檢測41
• 3.2.7 納米金適體傳感器化學(xué)發(fā)光檢測OTA性能評價41-42
• 3.3 實驗結(jié)果與討論42-49
• 3.3.1 實驗原理42-43
• 3.3.2 納米金表征43-44
• 3.3.3 DNA修飾納米金考察44-45
• 3.3.4 傳感器制備條件考察45-47
• 3.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立47-48
• 3.3.6 納米金適體傳感器性能評價48-49
• 3.4 本章小結(jié)49-51
• 第四章 辣根過氧化酶適體傳感器化學(xué)發(fā)光檢測OTA51-60
• 4.1 前言51
• 4.2 實驗部分51-53
• 4.2.1 試劑與材料51-52
• 4.2.2 儀器與設(shè)備52
• 4.2.3 辣根過氧化酶適體傳感器制備52-53
• 4.2.4 化學(xué)發(fā)光檢測53
• 4.2.5 辣根過氧化物酶適體傳感器性能評價53
• 4.3 實驗結(jié)果與討論53-59
• 4.3.1 實驗原理53-54
• 4.3.2 反應(yīng)條件優(yōu)化考察54-57
• 4.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立57-58
• 4.3.4 辣根過氧化物酶適體傳感器性能評價58-59
• 4.4 本章小結(jié)59-60
• 第五章 結(jié)論與展望60-63
• 5.1 結(jié)論60-61
• 5.2 展望61-63
• 致謝63-64
• 參考文獻(xiàn)64-69

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1 H·RObert;黃玉貞;;用化學(xué)發(fā)光法研究聚合物測量化學(xué)發(fā)光提供聚合物降解方面的新信息[J];合成材料老化與應(yīng)用;1983年02期

2 ;化學(xué)發(fā)光簡介[J];應(yīng)用化學(xué);1974年01期

3 王沭沂;吳國強(qiáng);;一種測定水中微量鉻的新方法——化學(xué)發(fā)光法[J];環(huán)境保護(hù);1986年11期

4 陳耘;化學(xué)發(fā)光及其應(yīng)用[J];湖南化工;1987年03期

5 熊源榮;化學(xué)發(fā)光[J];自然雜志;1989年06期

6 劉昌銀;;用化學(xué)發(fā)光法評價高分子的老化[J];合成材料老化與應(yīng)用;1990年01期

7 楊詩鐘;;橡膠研究工作中的化學(xué)發(fā)光的應(yīng)用[J];彈性體;1993年02期

8 王瓊娥,莊惠生,陳國南,陳麗映;測定痕量鐵的化學(xué)發(fā)光新體系[J];福州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1999年S1期

9 鐘進(jìn)義,王傳現(xiàn),王建華;化學(xué)發(fā)光法測定葡多酚對羥和超氧陰離子自由基的清除[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年05期

10 張繼東,季泉,鐘義,蔣彤;化學(xué)發(fā)光法測定輕質(zhì)油中的痕量硫[J];湖北化工;2001年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張新榮;張成孝;;液相化學(xué)發(fā)光分析的新進(jìn)展[A];中國地質(zhì)科學(xué)院南京地質(zhì)礦產(chǎn)研究所文集（40）[C];1989年

2 林金明;;化學(xué)發(fā)光柱后檢測技術(shù)及其應(yīng)用[A];第八屆全國發(fā)光分析暨動力學(xué)分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

3 張鑫智;;化學(xué)發(fā)光免疫定量應(yīng)用及存在問題[A];第九屆西北五�。▍^(qū)）檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

4 陳志濤;邱彬;陳國南;;一種新型雙吖啶化學(xué)發(fā)光探針的合成及應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第十四屆有機(jī)分析及生物分析學(xué)術(shù)研討會會議論文摘要集[C];2007年

5 趙云莎;黃均明;劉榮軍;趙書林;;基于化學(xué)發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移的毛細(xì)管電泳化學(xué)發(fā)光法同時測定5-羥色胺和5-羥基吲哚乙酸[A];全國生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

6 孫述文;呂九如;;鈰(Ⅳ)-亞硫酸根體系后化學(xué)發(fā)光行為的研究-流動注射后化學(xué)發(fā)光法測定舒必利[A];第八屆全國發(fā)光分析暨動力學(xué)分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

7 張月霞;楊振華;耿紅;董川;;粉筆塵對大鼠肺泡巨噬細(xì)胞化學(xué)發(fā)光的影響[A];中國毒理學(xué)會第六屆全國毒理學(xué)大會論文摘要[C];2013年

8 韓鶴友;;化學(xué)發(fā)光振蕩及其分析化學(xué)中的應(yīng)用[A];第八屆全國發(fā)光分析暨動力學(xué)分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

9 李莉;盧昌咸;;高良姜素化學(xué)發(fā)光新體系的發(fā)光動力學(xué)性質(zhì)研究[A];甘肅省化學(xué)會二十六屆年會暨第八屆中學(xué)化學(xué)教學(xué)經(jīng)驗交流會論文集[C];2009年

10 王術(shù)皓;姚型軍;莊惠生;林世蕾;杜凌云;;高錳酸鉀氧化酸性鉻蘭K化學(xué)發(fā)光法測定鉍[A];第八屆全國發(fā)光分析暨動力學(xué)分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 本報記者　 康義瑤;這塊蛋糕,有我一份[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2007年

2 歐陽應(yīng);我國化學(xué)發(fā)光診斷試劑研究取得進(jìn)展[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2004年

3 徐亞靜;我國首創(chuàng)化學(xué)發(fā)光微孔板HIV診斷技術(shù)[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 本報記者 溫藝晗;金融風(fēng)暴未能阻擋北京科美融資步伐[N];中國現(xiàn)代企業(yè)報;2008年

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1 宗晨;化學(xué)發(fā)光及其成像免疫分析新方法研究[D];南京大學(xué);2014年

2 Zeeshan Ali;基于磁性納米顆粒和化學(xué)發(fā)光的多種病毒同時檢測方法的研究[D];東南大學(xué);2015年

3 梁耀東;化學(xué)發(fā)光新體系、電化學(xué)發(fā)光新方法的研究及應(yīng)用[D];西北大學(xué);2006年

4 曹偉;藥物和生物大分子的化學(xué)發(fā)光法研究[D];山東大學(xué);2007年

5 姚寒春;化學(xué)發(fā)光及相關(guān)化學(xué)計量學(xué)方法的應(yīng)用研究[D];西北大學(xué);2007年

6 徐秦峰;吖啶酯化學(xué)發(fā)光體系及毛細(xì)管電泳—化學(xué)發(fā)光聯(lián)用研究[D];武漢大學(xué);2011年

7 陳效蘭;魯米諾化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)研究及其相關(guān)應(yīng)用[D];中南大學(xué);2013年

8 李娜;金屬納米粒子參與的化學(xué)發(fā)光及其在高效液相色譜分析中的應(yīng)用研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

9 李麗清;化學(xué)發(fā)光新體系在藥物分析中的應(yīng)用研究[D];河北大學(xué);2007年

10 劉海燕;流動注射—化學(xué)發(fā)光法在藥物分析及農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用研究[D];華東師范大學(xué);2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐雙嬌;基于魯米諾反應(yīng)的化學(xué)發(fā)光新方法及其應(yīng)用研究[D];西南大學(xué);2015年

2 王雯雯;基于化學(xué)發(fā)光動力學(xué)分辨策略的多組分免疫分析方法檢測免疫球蛋白[D];西南大學(xué);2015年

3 王紅;G-四鏈體DNA酶催化魯米諾化學(xué)發(fā)光在鉀離子、鉛離子分析中的應(yīng)用[D];西南大學(xué);2015年

4 毛青青;腈基擬除蟲菊酯及H_2S的化學(xué)發(fā)光檢測新方法[D];陜西師范大學(xué);2015年

5 郭莉;高嶺土的改性及其化學(xué)發(fā)光行為研究[D];北京化工大學(xué);2015年

6 趙常鑫;海泡石納米材料催化化學(xué)發(fā)光及其分析應(yīng)用[D];北京化工大學(xué);2015年

7 馬媛;納米銀—魯米諾化學(xué)發(fā)光體系檢測新型藥物的研究與應(yīng)用[D];延安大學(xué);2015年

8 王沛;基于等溫酶擴(kuò)增反應(yīng)的免標(biāo)記化學(xué)發(fā)光miRNA檢測新方法[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

9 陳祖琴;ZnO納米顆粒促進(jìn)魯米諾化學(xué)發(fā)光的研究及應(yīng)用[D];重慶大學(xué);2015年

10 垞麗皮艷·阿布力米特;PON1化學(xué)發(fā)光底物的合成、性質(zhì)及應(yīng)用研究[D];重慶大學(xué);2015年

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本文編號：890397